家蝇幼虫血淋巴粗提物抑菌活性初步研究

以4种细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌)为供试菌,测定了家蝇幼虫血淋巴粗提物的抑菌活性。结果显示,家蝇幼虫血淋巴各浓度粗提物对4种供试细菌均有一定的抑菌活性,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌率最大,其他依次为大肠杆菌>枯草芽胞杆菌>巨大芽孢杆菌,在0.8mg/mL时的抑菌率分别为51.09%、48.66%、43.27%和40.62%;在各浓度下不同菌种之间的抑菌率差异不显著,抑菌活性随着血淋巴粗提物浓度的增加而增强。在0.8mg/mL时对各细菌的抑菌圈直径分别为12.00mm、12.22mm、9.11mm和10.33mm,均显著大于对照,但低于头孢霉素。     

烟草赤星病菌拮抗性大豆根瘤内生菌的筛选及抑制作用

以烟草赤星病菌为供试病原菌,采用对峙法、代谢液培养法对分离自大豆根瘤的内生细菌进行抑菌筛选,对筛选菌株作用的病原菌菌丝进行显微观察,研究筛选菌株细胞培养特征及生理生化特性、16S rDNA测序序列、系统发育,以及进行温室接种防病试验.结果表明: 大豆根瘤内生菌经初筛、复筛,对烟草赤星病菌抑菌率42%以上的有7株菌,分别属于芽孢杆菌属、假单胞菌属、中华根瘤菌属和寡养单胞菌属.显微观察表明,在拮抗性内生菌作用下病原菌菌丝末端出现明显畸形,呈珊瑚状分枝、球状膨大等;代谢液试验表明,内生菌对病原菌的抑制作用主要是内生菌代谢产生的胞外物质在发挥作用;对峙试验表明,芽孢杆菌可迅速形成生物薄膜,有效阻碍病原菌丝生长和延伸.盆栽防病试验表明,拮抗性内生菌处理下烟草病情指数显著低于对照,表明筛选菌株可作为烟草赤星病的生防菌株资源.     

汤姆青霉PT95和Q1菌株产酶活力及抗菌活性研究

为探讨汤姆青霉菌株产酶活力以及抑菌性能。实验采用Folin酚法、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)糖化力法、二硝基水杨酸(DNS)比色法和对硝基苯酚法进行蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶和脂肪酶活力测定;同时采用牛津杯法测定发酵滤液对金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)的抑制作用,并测定最小抑菌浓度(MIC)。结果表明PT95菌株产蛋白酶活力为230.473 U、纤维素酶活力为3.463 U,产淀粉酶活力为1.679 MMU、脂肪酶活力10.793 U;Q1菌株产蛋白酶活力为167.247 U、纤维素酶活力为2.147 U,产淀粉酶活力为1.402 MMU、脂肪酶活力为6.350 U;PT95菌株对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌抑菌率分别可以达到53.73%和19.47%,Q1菌株对三种待测菌都有抑菌作用,抑菌率分别是56.37%(枯草芽孢杆菌)、26.87%(金黄色葡萄球菌)和19.47%(大肠杆菌),两株菌株发酵液中均存在抑菌物质,且均对枯草芽孢杆菌的抑菌率最高,两株菌的发酵液对枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度分别为0.64和0.32 mg/mL。     

一种含血浆沉淀物的新型培养基及其应用

本文以枯草芽孢杆菌为例,应用一种含血浆沉淀物的新型培养基PSM-1培养基和常规培养基(Luria-Bertani培养基,下简称LB培养基),在相同条件下,培养枯草芽孢杆菌进行液体发酵;并分别用PSM-1培养基和LB培养基培养的枯草芽孢杆菌菌液进行几种常见植物病原菌的抑菌实验。结果表明,(1)PSM-1培养基即减少了酵母粉、蛋白胨等昂贵营养物的使用量,实现了废弃物的循环利用,为工业化生产降低了约70%的生产成本;(2)用PSM-1培养基发酵芽孢类细菌时,芽孢率≥90%,而用LB培养基时,芽孢率约为80%,所以用PSM-1培养基发酵芽孢类细菌芽孢率提高了12.5%;(3)通过枯草芽孢杆菌的抑菌实验观察,PSM-1培养基培养出的枯草芽孢杆菌菌液抑菌性能优于LB培养基培养的枯草芽孢杆菌菌液的抑菌性能。50 L及2 t发酵罐生产性实验结果表明,此种含血浆沉淀物的新型培养基(PSM-1)性能可靠,可以用于芽孢类细菌的培养。     

长足大竹象雄性附腺提取物抑菌作用研究

以3种细菌(大肠杆菌Escherichia coli、金黄色葡萄球菌Bacillus subtilis、枯草芽孢杆菌Staphyloccocus aureus)为供试菌,测定了长足大竹象Cyrtotrachelus buqueti雄性附腺提取物的抑菌活性。结果表明:长足大竹象雄性附腺提取物对革兰氏阳性菌如枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌均有一定的抑菌活性。不同浓度的粗提物对枯草芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌抑菌影响差异均具有高度统计学意义(P0.01),抑菌活性随着粗提物浓度的增加而增强。粗提物对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度分别为0.2 mg·m L~(-1)、0.4 mg·m L~(-1)。不同处理温度对长足大竹象雄性附腺粗提物的抑菌作用有一定影响。     

陕北野生甘草内生菌的分离及抑菌活性筛选

采用组织块分离法从陕北野生甘草根中分离出21株内生菌,其中细菌12株,真菌6株,放线菌3株.为明确内生菌代谢产物的抑菌活性,采用抑制菌丝生长速率法和组织测定法系统测定了其发酵液对植物病原真菌的抑制作用.结果表明,在离体条件下,甘草内生菌发酵液对供试的7种植物病原菌菌丝生长均有一定的抑制作用,其中Z4和F1菌株的发酵液对供试病原菌菌丝生长的抑制作用较强,特别是对苹果干腐病菌和烟草赤星病菌的抑制作用最强,抑制率分别可达92.36%、90.16%和91.20%、90.43%,EC50分别仅为54.38、90.31和57.50、89.58 mg·L-1;组织法测定中,发酵液稀释10倍后,Z4和F1菌株对苹果干腐病的保护作用分别为75.39%和73.13%,治疗效果分别为67.61%和60.75%.     

响应面法优化提高萎缩芽孢杆菌E20303抑制马铃薯干腐病病原菌活性的研究

【背景】萎缩芽孢杆菌E20303可以有效地抑制马铃薯干腐病病原菌的活性,而响应面法可在较少的试验次数下优化生防菌发酵培养基配方与发酵条件,获得的最优组合将为马铃薯干腐病生防菌剂的制备与应用提供参考。【目的】以分离自青海察尔汗盐湖湖泥中且对马铃薯干腐病病原菌具有较高抑菌活性的萎缩芽孢杆菌E20303为研究对象,利用响应面法对其培养基配方和发酵条件进行优化,以期提高其对马铃薯干腐病病原菌的抑菌活性。【方法】采用单因素试验、中心组合设计试验及响应面法设计优化萎缩芽孢杆菌E20303发酵培养基配方及发酵条件。【结果】培养基最优发酵配方(g/L):淀粉10.72、酵母粉23.60、七水合硫酸镁16.00、碳酸钙1.14、磷酸二氢钾8.00和磷酸氢二钾16.00,优化后抑菌率由46.51%提高至62.00%;最优发酵条件为装液量102.89 mL、pH 8.64、温度28.73℃、转速200 r/min、培养时间3 d、接种量2%,优化后抑菌率由51.15%提高至72.51%。【结论】实验获得了对马铃薯干腐病病原菌的抑菌活性明显提高的萎缩芽孢杆菌E20303发酵配方及发酵条件,为马铃薯干腐病生防制...     

菊苣根提取物的抑菌活性研究

采用离体的试验方法测定了菊苣根的石油醚、乙酸乙酯和乙醇提取物对7种植物病原真菌和3种细菌的抑制活性。采用盆栽试验方法测定了菊苣根提取物对小麦白粉病的防治效果。结果表明,乙醇和乙酸乙酯提取物均有一定的抑制植物病原真菌和细菌活性。且乙酸乙酯提取物效果更佳。在10 g.L-1浓度下,乙酸乙酯提取物能显著抑制小麦赤霉病菌、玉米大斑病菌和烟草赤星病菌3种病原真菌菌丝的生长,抑制率均在85%以上;对小麦根腐病菌、玉米大斑病菌和烟草赤星病菌的孢子萌发抑制率也均在80%以上;对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达21.01 mm和17.23 mm;对盆栽小麦白粉病的预防和治疗作用分别为50.93%和65.82%。     

细胞型朊蛋白抑菌活性的初步探索

目的:研究细胞型朊蛋白(PrP~c)有无抑菌活性。方法:把Pr Pc分别与金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、大肠杆菌等5种菌孵育一定时间,然后用碘化丙锭对上述5种样品染色后采用流式细胞仪检测各样品的荧光信号。结果:通过对流式细胞仪的荧光信号进行分析,发现PrP~c对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有明显的抑制活性,而另外3种菌的样品没有检测到荧光信号的增强,亦即PrP~c对这3种菌无抑菌活性。结论:细胞型朊蛋白有一定的抑菌活性,有望成为一种新型的抗菌肽。     

核桃青皮乙醇提取物抑菌活性研究

以34种植物病原真菌和5种细菌为供试菌,采用离体试验方法对核桃青皮乙醇提取物及其萃取相进行抑菌效果研究.结果表明:核桃青皮乙醇提取物对供试病原真菌均有一定的抑制活性;在浓度为40 mg·mL~(-1)时,乙酸乙酯萃取相抑菌效果最好,对番茄灰霉、棉花立枯和小麦纹枯3种病原真菌的抑制率均为100%,对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达12.07 mm和12.54 mm;不同浓度乙酸乙酯萃取相对相同病原菌的抑制效果差异显著,对番茄灰霉、棉花立枯、苹果炭疽、小麦纹枯和小麦赤霉5种病原菌的EC_(50)分别为:7.263 4、6.219 1、9.069 5、5.591 2和10.310 2 mg·mL~(-1).     

瑞香狼毒根的抑菌活性研究（Ⅰ）

以苹果干腐病菌、小麦赤霉病菌、番茄早疫病菌、南瓜枯萎病菌、玉米大斑病菌、烟草赤星病菌和辣椒疫霉病菌为供试菌,采用生物活性跟踪法、生长速率测定法和系统溶剂提取法对瑞香狼毒根中的杀菌活性物质进行了筛选和分离。结果表明,杀菌活性物质主要集中在乙酸乙酯提取物和甲醇粗提物中。从乙酸乙酯提取物中分离出两种杀菌活性物质AF1-4和AF1-5,同时还发现瑞香狼毒根中还存在增菌物质。     

银杏内生真菌No.1028的培养条件及其代谢产物对作物真菌病害的抑制作用

通过大量筛选从银杏茎中分离到一株内生真菌(编号为No.1028),其代谢产物对重要作物真菌病害病原菌具有明显的抑制作用。结果表明:离体条件下内生真菌发酵液对番茄早疫病菌、黄瓜枯萎病菌、菜豆炭疽病菌、葡萄炭疽病菌、水稻纹枯病菌、黄瓜立枯病菌均有较强的抑制作用,对上述不同病原菌的抑制率分别为:66.7%、48.3%、64.6%、36.5%、57.1%和23%。同时也研究了不同碳源、氮源、无机离子对内生真菌No.1028生物学特性和生长的影响。结果发现玉米粉、黄豆饼粉比较适合其生长和抑菌代谢产物的合成,Na+对抑菌代谢产物的合成有较明显的促进作用。     

内生细菌B10对稻瘟病菌抑制作用的初步研究

目的:研究内生细菌B10对水稻稻瘟病菌的抑制作用,为菌株的应用提供理论依据。方法:采用菌丝生长速率法、孢子萌发法和田间试验测定内生细菌发酵上清液和菌液对稻瘟病菌的抑制作用。结果:内生细菌B10发酵上清液对稻瘟病菌菌丝生长和孢子萌发有较强的抑制作用,100倍稀释液对菌丝生长的抑制率为79.37%,对孢子萌发的抑制率为63.42%,对稻瘟病的田间防治效果达70.2%以上。结论:内生细菌B10对稻瘟病有较强的抑菌作用。     

大戟内生菌的抑菌活性及其与宿主相关性研究

为了开发利用药用植物的内生菌资源,以大戟和其内生真菌作为材料,以一株乌桕来源的内生菌作为对照,研究自身具有抑菌作用的药用植物的内生菌在抑菌作用上和宿主的相关性.结果表明,大戟内生菌镰刀菌E5有抑制宿主受试病原菌的作用,并在活植物体内表现出对受试病原菌的拮抗作用;其抑菌能力受宿主成分刺激而加强,而宿主成分对受试病原菌无抑制作用,乌桕来源的内生菌链隔孢S12无抑制受试病原菌的作用.内生菌E5需要在氧气充足条件下培养才能产生抑菌作用,抑菌活性最大产生时间和生物量最大值不同时出现.内生菌E5的抑菌能力受到pH、温度、紫外线影响.大戟内生菌E以上特点,体现了其与宿主之间的互惠共生关系.     

银沙槐内生放线菌抗菌活性及其与内生细菌的拮抗关系

从荒漠濒危植物银沙槐根部分离到内生放线菌12株和内生细菌31株.以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为指示菌对内生放线菌进行了抗菌活性筛选.结果表明：3株放线菌对3种指示菌均有抑制作用,2株完全无抑菌作用.采用菌块抑制法分析内生放线菌对来自同一植物内生细菌的抑制效果,44.9%的组合出现抑制现象,最大抑菌圈直径为28.5mm,最小者仅8.25 mm,主要抑制对象是革兰氏阴性菌和芽孢菌;55.1%的组合无抑制现象.说明内生菌的相互作用具有多样性.     

内生真菌对花生残茬腐解及土壤酚酸含量的影响

土壤中花生残茬是导致连作障碍的原因之一。为了探讨施加内生真菌Phomopsis liquidambari(B3)对加速花生残茬腐解、改善连作花生土壤环境、缓解花生连作障碍的作用及其可能机理,通过向土壤中添加花生(Archis hypogaea)残体,利用盆栽试验探讨了施加B3对花生残茬腐解率、土壤部分酚酸物质和酶活性的影响。结果表明:与CK相比,在萌发期和苗期,添加B3处理显著加快残茬腐解,提高纤维素木质素降解率,增加土壤中对羟基苯甲酸、香草酸和香豆酸的含量;在花生整个生育期,施加B3显著调节了土壤中漆酶、锰过氧化物酶(Manganese peroxidase,Mn P)、木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase,Li P)和多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)活性的动态变化,这种变化有利于花生残茬快速腐解和酚酸类化感物质的及时转化。开花期之后施加B3处理土壤酚酸含量显著降低,花生荚果增产19.9%。实时定量PCR结果表明内生真菌B3在土壤中30 d内可以被检测,并对复杂多样的酚酸类物质具有广谱高效的降解能力。由此说明,施加内生真菌B3可以显著加快连作土壤中花生残茬腐解,进而通过减少土壤酚酸含量来缓解由残茬腐解引起的连作障碍。     

被内生真菌侵染的禾草提取液对真菌的抑制作用

以带有与不带有Neotyphodium属内生真菌的醉马草Achnatherum inebrians、披碱草Elymus dahuricus和野大麦Hordeum brevisubulatum的草粉浸提液对细交链孢Alternaria alternata、根腐离蠕孢Bipolaris sorokiniana、燕麦镰孢Fusarium avenaceum和绿色木霉Trichoderma viride进行了抑菌活性研究。结果表明:披碱草、醉马草和野大麦草粉浸提液对细交链孢、根腐离蠕孢、燕麦镰孢和绿色木霉的菌落生长、孢子萌发率和芽管长度均有一定的抑制作用。而披碱草中的Neotyphodium可显著增强披碱草草粉浸提液对细交链孢、燕麦镰孢、绿色木霉菌落生长及对细交链孢和根腐离蠕孢孢子萌发及燕麦镰孢芽管长度的抑制作用;醉马草中的Neotyphodium显著增强了醉马草草粉浸提液对燕麦镰孢、绿色木霉菌落生长和芽管长度,以及细交链孢、根腐离蠕孢和燕麦镰孢孢子萌发的抑制作用;野大麦中的Neotyphodium显著增强了野大麦草粉浸提液对绿色木霉菌落生长、孢子萌发和芽管长度的抑制作用。     

Assessment of diversity,distribution and antibacterial activity of endophytic fungi isolated from a medicinal plant <Emphasis Type="Italic">Adenocalymma alliaceum</Emphasis> Miers

A study was conducted for isolation, identification and antibacterial potential of fungal endophytes of Adenocalymma alliaceum Miers., (Bignoniaceae), a medicinal shrub vine plant which has long history for its usages in curing various disorders. A total of 149 isolates of endophytic fungi representing 17 fungal taxa were obtained from 270 segments (90 from each stem, leaf and petiole) of this plant. Hyphomycetes (77.85%) were the most prevalent, followed by Ascomycetes (8.05%) and Coelomycetes (4.03%) respectively. A considerable amount of fungal isolates was kept under (10.07%) Mycelia-Sterilia (MS). Leaf harboured maximum colonization of endophytic fungi (72.22%) which was greater than stem (67.78%) and petiole (25.54%). The Jc similarity index was maximum (0.619) between stem vs leaf followed by leaf vs petiole (0.571) and stem vs petiole (0.428). The dominant endophytic fungi were Alternaria alternata, Aspergillus niger, Stenella agalis, Fusarium oxysporum, Curvularia lunata and Fusarium roseum. Among twelve endophytic fungi tested for antibacterial activity, crude extracts of nine endophytic fungi (75%), showed antibacterial potential against one or more clinical human pathogens. Alternaria alternata, Curvularia lunata, Penicillium sp. and Chaetomium globosum exhibited significant antibacterial activity against 4 of 5 tested pathogens, showing broad spectrum activity. This investigation explains the value of sampling from different tissues of a host plant for the greater species diversity, and additionally, the antibacterial screening of some endophytic fungi from this specific medicinal plant may represent a unique source for many of the useful antibacterial compounds.     

膜荚黄芪内生真菌次生代谢产物鉴定及抑菌活性

从膜荚黄芪(Astragalus membranaceus)叶中分离出一株内生真菌———瓶霉菌属(Phialophorasp.)。鉴定次生代谢产物中含有皂甙类、多糖类和黄酮类物质,并通过薄层层析证明内生真菌次生代谢产物的粗提物与黄芪植物水煎液的粗提物含有相同的成分。证明发酵液及菌丝体提取物对4种常见细菌具有不同程度的抑菌活性。     

蒺藜内生真菌发酵液抗菌及抗肿瘤活性初步研究

【目的】筛选出具有抗菌和抗肿瘤活性的蒺藜内生真菌。【方法】采用牛津杯法、稻瘟菌模型及肿瘤细胞模型评价蒺藜内生真菌PDB和察氏培养基发酵产物的抗菌活性和肿瘤细胞毒性。【结果】PDB培养基发酵液和察氏培养基发酵液抑菌圈直径大于10 mm的菌株分别占总菌株数的19.05%和23.81%。PDB培养基发酵液和察氏培养基发酵液对稻瘟菌的最小抑制浓度(MIC)低于10%的菌株分别占总菌株数的19.05%和47.61%。对肿瘤细胞抑制率高于50%的PDB发酵产物占PDB发酵产物总数的52.38%, 而对肿瘤细胞抑制率高于50%的察氏发酵产物占察氏发酵产物总数的28.57%。【结论】部分蒺藜内生真菌的发酵产物具有抗菌和抗肿瘤活性。