L6565小鼠白血病病毒诱发小鼠白血病

为探讨病毒与白血病发生的关系,我们用L6565小鼠白血病病毒(L6565MLV)悬液感染乳鼠,每周观察小鼠的发病情况及病理变化,并用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)动态检测小鼠体内病毒核酸的分布.结果发现小鼠感染病毒后3～5周,其脾脏和淋巴结呈早期白血病的病理改变.至第10～12周小鼠发生淋巴细胞白血病,表现出耸毛、活动减少、腹膨胀等症状.病毒核酸于感染后第2周首先在小鼠胸腺、脾脏检测到,随时间延长,病毒核酸广泛分布在外周血、胸腺、脾脏、淋巴结等多种脏器组织中.本实验表明L6565小鼠白血病病毒可诱发小鼠白血病,其机制可能与病毒促使淋巴细胞向白血病细胞转化有关.     

带有L6565小鼠白血病病毒的细胞系的建立

用L6565小鼠的胸腺、脾脏、肝脏和肾脏组织,以及外周血的无细胞提取液,分别感染NIH3T3细胞,经逆转录酶活性测定,挑选出两株感染了L6565白血病病毒的细胞,并证实L6565白血病病毒感染小鼠后主要分布于血液和淋巴系统。电镜下可观察到细胞内含有A型和C型病毒颗粒,细胞的倍增时间分别为18和16小时。细胞的XC合胞试验为阳性,在光镜下未观察到细胞的形态发生转化。收集细胞内和释放到细胞培养液中的病毒并注入新生小鼠皮下,两个月左右做血象和组织病理检查,存活小鼠全部发生了淋巴细胞型白血病。     

L615白血病鼠胸腺和脾脏淋巴细胞脱氢酶同工酶的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对比研究了纯系６１５鼠和Ｌ６１５可移植性淋巴细胞型白血病鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的葡萄糖－６－磷酸脱氢酶同工酶（ＥＣｌ．１．１．４９,Ｄ－葡萄糖－６－磷酸：ＮＡＤＰ氧化还原酶,Ｇ６ＰＤ）和乳酸脱氢酶同工酶（ＥＣｌ．１．１．２７,Ｌ－乳酸：ＮＡＤ氧化还原酶,ＬＤＨ）。并应用定量细胞化学法对ＬＤＨ和６ＰＤ全酶活性进行了测定。结果：在Ｌ６１５白血病鼠胸腺淋巴细胞中（白血病细胞占４０％）,Ｇ６ＰＤ同工酶谱显示异常,全酶活性明显增高、ＬＤＨ同工酶谱及全酶活性未发生明显变化。Ｌ６１５白血病鼠脾脏淋巴细胞中（白血病细胞占８４％）,Ｇ６ＰＤ和ＬＤＨ同工酶谱均显示异常,同时全酶活性也明显增强。提示：Ｇ６ＰＤ对白血病细胞的恶性增殖和浸润似乎更为敏感。     

小鼠生态条件对Friend小鼠白血病病毒感染的影响

本文探讨了Ｆ１小鼠生态条件（鼠龄和免疫状态）对Ｆｒｉｅｎｄ小鼠白血病病毒（Ｆｒ．ＭｕＬＶ）感染的影响。利用对Ｆｒ．ＭｕＬＶ抗性的Ｆｖ４小鼠（含Ｆｖ４抗性基因纯合子的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠）与对Ｆｒ．ＭｕＬＶ敏感的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠交配，获得含Ｆｖ４抗性基因杂合子的Ｆ１小鼠（ＢＡＬＢ／Ｃ×Ｆｖ４）。然后经小鼠腹腔接种Ｆｒ．ＭｕＬＶ病毒液进行攻击，并检查不同鼠龄和免疫状态下的Ｆ１小鼠对Ｆｒ．ＭｕＬＶ的敏感性，以阐明Ｆ１小鼠的鼠龄和免疫状态对Ｆｒ．ＭｕＬＶ感染的影响。结果表明，新生Ｆ１小鼠可发生Ｆｒ．ＭｕＬＶ感染，脾脏中有大量病毒增殖，并引起白血病；免疫抑制剂Ｆｋ５０６投与下的成年Ｆ１小鼠亦可发生Ｆｒ．ＭｕＬＶ的感染，脾脏中有病毒增殖，但不引起白血病；而新生或成年Ｆｖ４小鼠以及成年Ｆ１小鼠可抵抗Ｆｒ．ＭｕＬＶ的感染，脾脏中无病毒增殖，不发病。说明Ｆ１小鼠的鼠龄和免疫状态等生态条件可影响其对Ｆｒ．ＭｕＬＶ感染的敏感性，并且可影响Ｆｖ４基因抗病毒作用。     

Friend小鼠白血病病毒（Fr.MuLV）对新生金地鼠的感染性研究

一般认为,Ｆｒｉｅｎｄ小鼠白血病病毒（Ｆｒｉｅｎｄｍｕｒｉｎｅｌｅｕｋｅｍｉａｖｉｒｕｓ：Ｆｒ．ＭｕＬＶ）属同种嗜性白血病病毒（ｅｃｏｔｒｏｐｉｃＭｕＬＶ）,只感染小鼠或大鼠,分别引起小鼠发生白血病和大鼠发生呆小病;但对小鼠或大鼠以外的动物（包括人等）无感染性。为进一步探讨该病毒的感染范围,本文进行了该病毒对金地鼠的感染性研究。结果表明,该病毒可在新生金地鼠体内增殖,引起新生金地鼠出现体重减轻、脾萎缩、并发早死等呆小病样症状,病理学检查发现接种该病毒后新生金地鼠的脾脏、胸腺呈明显的病理变化。提示Ｆｒ．ＭｕＬＶ对新生金地鼠具有感染作用,并产生病毒增殖和引起呆小病样症状,为阐明Ｆｒ．ＭｕＬＶ的感染范围和致病作用提供了实验依据。     

前病毒插入诱变与白血病发生的研究进展

慢性白血病病毒包括禽白血病增生症病毒、猫白血病病毒、牛白血病病毒、长臂猿白血病病毒和小鼠白血病病毒等,它们的基因组结构完整,具有病毒复制能力,但是序列内不含有癌基因,这是此类病毒的共同特点,其中以小鼠白血病病毒最具代表性。小鼠白血病病毒感染动物后可产生不同类型白血病,潜伏期较长（3－4个月）。小鼠白血病病毒诱发白血病机制较复杂,是一个由多因子参加、多阶段发展的过程。本文就小鼠白血病病毒前病毒插入诱发的淋巴细胞白血病和粒细胞白血病中,原癌基因激活及其作用机制进行综述。     

超薄层等电聚焦电泳对白血病小鼠胸腺和脾淋巴细胞脱氢酶同工酶的分析

用高分辨力的等电聚焦技术分析615和L615小鼠胸腺及脾淋巴细胞 LDH 同工酶,表明两种小鼠胸腺淋巴细胞同工酶酶谱相同,具有相同等电点的条带含量无显著性差异;而两种小鼠脾淋巴细胞同工酶酶谱不同,某些具有相同等电点的同工酶带含量有显著或极显著性差异。     

小鼠白血病病毒致白血病机制的研究进展

小鼠白血病病毒分为两类;（１）急性转化ＭｕＬＶ：Ａｂｅｌｓｏｎ,ＭｕＬＶ 其代表,基因组含有ｖ－ａｂｌ癌基因,编码产生Ｐ１２０＾ｇａｇ－ａｂｌ磷蛋白,诱发小林巴细胞白血病,（２）慢性转化ＭｕＬＶ：极大多数ＭｕＬＶ均属于此类。基因组不携有ｖ－ｏｎｃ癌基因为其特点,Ｍｏｌｏｎｅｙ－ＭｕＬＶ（Ｍ－ＭｕＬＶ）是研究这类ＭｕＬＶ致瘤机制的良好模型。白血病生成中包括原癌基因激活、ＭＣＦ重组体形成、１５号染色体     

Fv-4基因杂合子小鼠对Fr.MuLV感染的敏感性差异的分析

目的 :探讨新生和成年的Fv 4基因杂合子小鼠 (BALB/C小鼠×G小鼠 )对Friend小鼠白血病病毒 (Fr.MuLV)感染的敏感性差异及其与小鼠淋巴细胞表面Fv 4基因产物的表达量的关系。方法 :经腹腔接种Fr.MuLV分别感染新生和成年的杂合子小鼠 ,观察小鼠对Fr.MuLV感染的敏感性差异 ;并用间接免疫荧光标记 FACS测定法 ,分别对小鼠脾脏淋巴细胞表面的Fv 4基因产物进行定量检测与分析。结果 :接种病毒后 ,新生杂合子小鼠可被病毒感染并出现脾脏肿大等症状 ,而成年杂合子小鼠则不发病 ;但是 ,在新生和成年的杂合子小鼠脾脏淋巴细胞表面均可以检测出Fv 4基因产物 ,其表达量基本相同。结论 :新生和成年的Fv 4基因杂合子小鼠对Friend小鼠白血病病毒感染的敏感性不同 ,但该敏感性差异与小鼠细胞表面Fv 4基因产物的表达量无关。提示Fv 4基因杂合子的抗Fr.MuLV感染可能还有其他机制或因素的参与。     

黄芪对BALB/C小鼠感染Coxsackie B_3病毒后T细胞免疫的影响

本文用抗原特异性细胞毒技术检测小鼠感染coxsackie B_3病毒后并腹腔注射黄芪一周在5—28天脾脏、外周血及心肌中T淋巴细胞亚群分布的变化情况。结果显示:黄芪治疗组小鼠外周血、脾脏中Thy1+细胞百分率在感染后第7—14天明显增高(P<0.05),在心肌中则低于同期生理盐水组。L3T4+淋巴细胞百分率黄芪治疗组在病毒感染后5—14天的脾脏,第9天的外周血和第7、14天的心肌中显著低于生理盐水组,而Lyt2+淋巴细胞百分率两实验组间均无统计学差异,提示中药黄芪对急性病毒性心肌炎小鼠T细胞免疫具有明显的调节作用,且主要是通过调节Thy1+和L3T4+淋巴细胞亚群而起到治疗目的的。     

miRNA在白血病中的研究进展

microRNA(miRNA)是一种小分子非编码RNA,在细胞增殖、分化和凋亡等多种生理过程中发挥着重要作用.白血病相关miRNA研究进展迅速,并呈现了miRNA介导白血病瘤细胞增殖、分化和凋亡的调控网络.深入了解相关miRNA与白血病的发生、发展关系将为白血病的治疗开辟新途径.     

Potentiation of the efficacy of murine L1210 leukemia vaccine by a novel immunostimulator 7-thia-8-oxoguanosine: Increased survival after immunization with vaccine plus 7-thia-8-oxoguanosine

Summary We have investigated the ability of a novel immunopotentiator, 7-thia-8-oxoguanosine (7T8OG) to increase the efficacy of a weakly immunogenic murine L1210 leukemia vaccine. The vaccine was prepared by irradiating L1210 leukemia cells in a cesium source with a total of 6000-R dose. DBA/2 mice were treated with 150 mg/kg 7T8OG and/or with vaccine consisting of 10⁷ irradiated cells. In combination therapy, mice first received the vaccine and then were injected with 75 mg/kg 7T8OG 2 h and 4 h after vaccination. One week after the last treatment all mice were inoculated with 10⁴ live leukemia cells intraperitoneally. Control, untreated mice (n = 66) injected with 10⁴ live leukemia cells had a mean survival time ± standard error of 10.5±0.2 days. Treating mice (n = 66) with one, two or three doses of 7T8OG administered i.p. 1 week apart did not increase survival (mean survival time = 10.7 days). Mice immunized with one, two or three doses of vaccine had 14.5±1.1, 45.4±6.2 and 68.3±10.6 days mean survival, respectively. 7T8OG-stimulated vaccination increased the survival dramatically. The best survival was noted when the mice were treated with 2× (vaccine + 7T8OG). Immunization of mice (n = 30) with this treatment regimen increased the mean survival to 156±10.0 days. Over 90% of mice that were treated this way had a cumulative survival time greater than 160 days. In contrast, only 12% of the mice immunized twice with the leukemia vaccine alone survived over 160 days. These results suggest a rationale for the use of this immuno-potentiator with various vaccines for a more effective immunization.     

SHIP1在急性髓细胞白血病患者中的表达及对人白血病细胞凋亡的影响研究

目的:探讨含SH2结构域的肌醇1(SHIP1)在急性髓细胞白血病患者中的表达及对人白血病细胞凋亡的影响。方法:采用Western blot检测收集的急性髓细胞白血病患者骨髓中SHIP1的表达。人白血病细胞U937转染SHIP1过表达载体(pEGFP-SHIP1组)及对照空载体(pEGFP组),同时设置对照组,对照组细胞不转染载体,其他步骤同pEGFP-SHIP1组和pEGFP组。流式细胞仪检测48 h的细胞凋亡情况,Western blot检测48 h细胞中SHIP1、Bcl-2、Bax、Akt、p-Akt的表达。结果:急性髓细胞白血病患者骨髓中SHIP1表达明显低于正常人(P0.05)。pEGFP-SHIP1组细胞中SHIP1、Bax表达和凋亡率均明显高于pEGFP组及对照组(P0.01),Bcl-2、p-Akt表达均明显低于对照组(P0.01)。结论:SHIP1在急性髓细胞白血病患者骨髓中表达下调,其可能通过Akt信号促进人白血病细胞凋亡。     

Rat Stem-Cell Leukemia Gene Expression Increased during Testis Maturation

Histamine oxidase (EC class 1.4.3) was found in cells of Arthrobacter globiformis IFO 12137 (ATCC 8010) grown on histamine. The enzyme purified to a specific activity of 9.4units/mg had a purity of at least 80%. The enzyme oxidized histamine with concomitant formation of H₂O₂. Phenylethylamine, dopamine, aromatic monoamines, and aliphatic mono- and diamines were oxidized at lower rates. Cu²⁺-chelators inhibited the enzyme, indicating that the enzyme is Cu²⁺-dependent. Carbonyl-blocking reagents also inhibited the enzyme. The enzyme catalyzed the Nitro Blue Tetrazolium/glycinate reaction, which is characteristically catalyzed by quinones and quinoproteins. These results strongly suggest that the enzyme contains a quinonoid cofactor.     

Characterization of miRNomes in Acute and Chronic Myeloid Leukemia Cell Lines

Myeloid leukemias are highly diverse diseases and have been shown to be associated with microRNA（miRNA） expression aberrations. The present study involved an in-depth miRNome analysis of two human acute myeloid leukemia（AML） cell lines, HL-60 and THP-1, and one human chronic myeloid leukemia（CML） cell line, K562, via massively parallel signature sequencing. mRNA expression profiles of these cell lines that were established previously in our lab facilitated an integrative analysis of miRNA and mRNA expression patterns. miRNA expression profiling followed by differential expression analysis and target prediction suggested numerous miRNA signatures in AML and CML cell lines. Some miRNAs may act as either tumor suppressors or oncomiRs in AML and CML by targeting key genes in AML and CML pathways. Expression patterns of cell type-specific miRNAs could partially reflect the characteristics of K562, HL-60 and THP-1 cell lines, such as actin filament-based processes, responsiveness to stimulus and phagocytic activity. miRNAs may also regulate myeloid differentiation, since they usually suppress differentiation regulators. Our study provides a resource to further investigate the employment of miRNAs in human leukemia subtyping, leukemogenesis and myeloid development. In addition, the distinctive miRNA signatures may be potential candidates for the clinical diagnosis, prognosis and treatment of myeloid leukemias.     

沙利度胺配合化疗应用于急性白血病患者的疗效评价

目的:探究急性白血病患者给予沙利度胺配合化疗在抗血管生长方面的临床成效。方法:选取我院2009年3月-2014年1月收治的86例急性白血病患者,随机分为研究组和对照组,每组43例。对照组患者给予常规化疗方案,研究组在对照组基础上给予沙利度胺配合化疗。观察两组患者治疗前后血浆VEGF,VEGFR,b FGF及MVD的水平变化。比较两组患者的临床疗效及不良反应发生率。结果:治疗前,两组患者VEGF、VEGFR、b FGF及MVD水平无显著差异(P0.05);治疗后,研究组患者VEGF、VEGFR、b FGF及MVD水平均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。研究组患者治疗的有效率为88.4%,对照组为76.7%,研究组显著优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。研究组不良反应发生率为79.1%,对照组为81.4%,差异无统计学意义(P0.05)。结论:沙利度胺配合化疗治疗急性白血病能调控促血管生长因子水平,提高疗效,不良反应可耐受。     

混合表型急性白血病的细胞及分子遗传学研究进展

混合表型急性白血病(mixed-phenotype acute leukemia, MPAL)是一类同时表达不止一个谱系特异性抗原的恶性克隆性疾病,发生率低,仅占急性白血病的2%~5%。多数MPAL患者可检测出克隆性染色体异常及分子遗传学改变,其中一些特异性异常如t(9;22)(q34;q11)及KMT2A重排在MPAL的诊断分型、靶向治疗及预后判断中具有重要的指导意义。近年来,随着全基因组测序、全外显子测序、靶向测序及单核苷酸多态性-微阵列比较基因组杂交等分子生物学技术的广泛应用,人们发现一些新的分子遗传学异常如ZNF384重排及WT1基因突变等也与疾病的发生发展及预后密切相关。这些发现进一步丰富了对MPAL发病机制的认识。现将有关MPAL细胞及分子遗传学的研究进展进行综述。     

聚焦慢性粒细胞白血病

随着靶向治疗时代的到来,慢性粒细胞白血病 （CML）已经从不治之症转变为基本可控的慢性病。患者生存率有了显著提高,当然在疗效、耐受性及耐药性方面仍有提升的空间。长期以来,酪氨酸激酶抑制剂格列卫（Gleevec）一直被认为是合理药物设计的典范,但更有效的二代药物已经开始作为一线药物获得认可。然而,由于缺乏完整的生存期数据,这些二代药物和格列卫相比所具有的优势还有待于进一步去发现。由于患者需要长时间治疗,毒性和成本的可控性更可能成为选择治疗药物的重要推动因素。治疗慢性粒细胞白血病的产品线首先侧重于解决耐药性问题,尤其是在一线药物治疗失败而三线药物又无法满足需求的情况下。如果患者使用酪氨酸激酶抑制剂有效,那么最终的问题是患者是否可以通过这些药物治愈。     

54 例慢性淋巴细胞白血病的临床回顾性分析*

摘要目的：本研究旨在探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)的实验室检查特点及特征性临床表现。方法：利用血细胞分析仪、流式细 胞术、骨髓形态分析及R显带技术等对我院2002 年4 月-2012 年4 月收治的54 例慢性淋巴细胞白血病患者的相关临床资料如 血细胞计数、骨髓形态、染色体及免疫表型等进行检测并对结果进行回顾性分析。结果：CLL多发于老年患者,男性多见,中位年 龄65 岁（45-82 岁）。大部分患者初诊时可出现典型的临床表现,37 例（68%）患者初诊时淋巴结大,49 例（91%）初诊时白细胞≥ 10× 109/L,淋巴细胞绝对值≥ 5× 109/L。13 例（24%）初诊时肝脾或者脾大,17 例（31%）初诊时乏力、消瘦。34（63%）例患者可见典 型的CLL免疫表型,CD5、CD19. CD23、CD20 的阳性率分别为90%、87%、72%、67%。32 例患者染色体检测结果表明：13q-2 例, 17p-2 例,11q-1 例,+12 有1 例,6q-1 例,t(14,16)1 例。2 例患者发生了自身免疫性溶血性贫血（AIHA）。1例患者发生了Richter转 化,肿大淋巴结活检显示部分区域为弥漫性大B细胞淋巴瘤,其高表达CD20、CD19、CD22。结论：慢性淋巴细胞白血病具有其典 型的临床表现、免疫表型及遗传学改变,并且对诊断及治疗有重要意义。