向日葵的幼胚培养

实验所用的基本培基中以B_5培养基对向日葵幼胚培养为最适。激素萘乙酸主要促进幼胚的胚性生长。吲哚乙酸(IAA)与激动素(KT)的配合使用,对幼胚的分化起明显的调节作用。天然提取物则明显地促进幼胚生长、其中荸荠汁的培养基可使向日葵球形胚进行正常发育。 用两种改良的B_5培养基做胚胎培养系统,使向日葵种间杂交胚生长发育。先将杂交后的心形胚培养在胚胎生长培养基上,进行充分的胚性生长。然后把胚转移到萌发培养基,使其萌发形成幼苗,最后移入土壤直至开花。     

幼胚下胚轴及子叶上植株的诱导

由6个苹果品种和1个梨品种的幼胚下胚轴及子叶基部直接诱导出不定芽。不定芽的发生是成从的。实验使用MS作基础培养基,其中附加细胞分裂素和生长素的浓度为BAP 1—3ppm,NAA 0.5ppm。但是,我们在进一步实验中表明,在上述培养基中除去了生长素亦得到同样结果。在含有0.5ppm IBA的土豆培养基上,离体诱导下胚轴及子叶基部处在发育中的不定芽生根,成长为完整植株。这一结果为克服果树及农作物杂交育种中常见的幼胚不育和扩大繁殖优良品种的无性系植株,提供一个可能的实用方法。     

油茶未成熟子叶幼胚离体培养成苗的研究

MS培养基适用于油茶未成熟子叶与幼胚的离体培养。在附加2ppm NAA+4PPm BA的培养基上诱导愈伤组织,转入减少生长素或无生长素,提高细胞分裂素的培养基中,可产生大量丛生小苗,每管可达40株以上。也可以在再分化培养基上直接诱导丛生苗。丛生小苗分株培养后,用液体培养基在滤纸桥上诱根,并用透明薄膜室移栽成活。试验表明生长素NAA、IAA对愈伤组织的诱导与分化都有良好效果,BA、ZT与NAA的适当配比是诱导丛生小苗的重要因素。只有绿色或黄绿色的愈伤组织才能分化。培养基含2.4-D,蔗糖5%以上都不利于愈伤组织绿化,也不利于分化。子叶基部与幼胚的培养条件基本相同,而且其分化能力与发育阶段有密切关系,取六月以后,油茶胚乳已完全消失的子叶与幼胚作外植体,较易诱导成苗。除了丛生苗的诱导外,幼胚在怀特培养基附加低浓度的生长素与细胞分裂素上可获得根茎完整的胚苗。但移栽的成活率却低于上述诱根的丛生苗。     

幼胚长度、2，4-D浓度、光强度等对花生体细胞胚发生的影响及高效再生系统的建立

花生幼胚在含2,4-D的诱导培养基中,形成近球状的致密的胚性愈伤组织、杆状两极结构及子叶期体胚。继代培养也有体胚发生。光照明显抑制体胚发生类似于自然栽培的情况。成熟培养基中诱导体胚根、芽两极发育完全。光下,具有根、芽的体胚于再生培养基中长成小植株后移栽于盛沙土的盆中正常生长、结实。在较好的影响因素(光照、幼胚长度、激素、切分方式、接种密度)组合下,体胚发生频率达75％以上,每子叶形成体胚3个以上。该体细胞胚高效再生系统与合子胚的发育相似,是遗传转化和胚发育研究的良好系统。     

幼胚长度,2,4—D浓度,光强度等对花生体细胞胚发生的影响 …

花生幼胚在含２,４－Ｄ的诱导培养基上,形成近球状的致密的胚性愈伤组织、杆状两极结构及子叶期体胚。继代培养也有体胚发生。光照明显抑制体胚发生类似于自然栽培的情况。成熟培养基中诱导体胚根、芽两极发育完全。光下,具有根、芽的体胚于再生培养基中长成小植株后移载于盛沙土的盆中正常生长、结实。在较好的影响因素（光照、幼胚长度、激素、切分方式、接种密度）组合下,体胚发生频率达７５％以上,每子叶形成体胚３个以上。     

向日葵幼胚培养中体细胞胚胎发生的观察

1.向日葵不同品种体细胞胚胎发生的情况不同。2.较高浓度的蔗糖有利于向日葵幼胚的体细胞胚胎发生。3.在同样条件下,2mm长的幼胚较其它时期的幼胚体细胞胚胎发生的频率高。4.在蔗糖浓度为17.5％并分别加入0.5—10.0ppm玉米素的Nitsch培养基中,向日葵幼胚产生体细胞胚胎发生的频率随着玉米素浓度的增高而增加。5. 2,4-D能使体细胞胚胎发生,但不能分化器官。6.切片观察表明:在含玉米素的培养基上,幼胚产生了胚性细胞团和胚状体。并多数发生于子叶与下胚轴的深层。胚性细胞团周围细胞退化,使其与周围组织之间形成间隙。     

温度对枳椇次生胚发生和植株再生的影响

在含有2,4-D的培养基上所诱导和增殖的枳棋体细胞胚只能形成无再生能力的畸形胚。通过次生胚发生途径可以在不加植物生长调节物质的培养基诱导出发育正常的体细胞胚,子叶期胚的次生胚诱导能力高于早期体胚。相对高的温度(30℃)有利于次生胚的诱导,相对低的温度(20℃)更有利于次生胚的发育、植株再生和移栽成活。     

猕猴桃属美味猕猴桃和毛花猕猴桃种间杂交的胚胎学和胚援救

本文报道美味猕猴桃(Actintdia delictosa cv.Hayward)(6x)和毛花猕猴桃(A.eria-ntha)(2x)杂交当代种子的胚胎学分析和胚援救的结果:1.根据杂交种子外部形态和胚胎发育程度,区分为正常的和败育的两类,其比率接近1:1。正常种子的胚发育分化正常,且含有适量胚乳。败育种子中,除少数不含胚和胚乳外,绝大多数种子的胚发育终止于球形、心形和早子叶阶段,胚体畸形。胚乳处于消失或完全解体。2.在被试8组培养基中,最适合胚萌发和生长的是:MS+IAA0.5ppm+GA_30.5ppm,MS+2ip2ppm+IAA0.5ppm+GA_30.5ppm和 MS+2ip2ppm+GA_30.5ppm。适于实生苗生长的培养基为 MS+GA_30.5ppm 和 MS 培养基。在 MS+BAP2ppm 和 MS+IAA0.5ppm+GA_30.5ppm 培养基上,一些正常种子和少数不正常种子胚的下胚轴直接形成了许多不定芽,从而诱导产生了更多的杂种植株。但是在MS十BAP2ppm+GA_30.5ppm,MS+BAP2ppm+IAA0.5ppm 和 MS+2ip2ppm+GA_30.5ppm培养基上,虽然胚产生了愈伤组织,但都未分化出器官。杂种实生苗根尖细胞近半数的含有近4倍性染色体数(4x=116),约半数为其他倍性。     

华山松胚性愈伤组织诱导与幼胚离体培养

探索华山松(Pinus armandii)体细胞胚胎发生技术对其实施规模化无性繁殖和开展遗传转化具有重要意义。本文以1/2LM为基本培养基, 通过激素调节等措施对华山松的胚性愈伤组织诱导和幼胚的离体培养技术进行了初步研究。研究结果: 胚性愈伤组织诱导率最高可达52.71%, 但愈伤组织继代培养后没有体细胞胚胎的分化; 首次从其子叶期的幼胚中直接诱导出具有根和茎的完整植株, 诱导率达92%以上。文章确认了采集的幼胚发育状态对胚性愈伤组织的诱导有重要影响, 并对诱导的培养条件等进行了探讨。     

华山松胚性愈伤组织诱导与幼胚离体培养

探索华山松（Pinus armandii）体细胞胚胎发生技术对其实施规模化无性繁殖和开展遗传转化具有重要意义。本文以1／2LM为基本培养基,通过激素调节等措施对华山松的胚性愈伤组织诱导和幼胚的离体培养技术进行了初步研究。研究结果：胚性愈伤组织诱导率最高可达52．71％,但愈伤组织继代培养后没有体细胞胚胎的分化;首次从其子叶期的幼胚中直接诱导出具有根和茎的完整植株,诱导率达92％以上。文章确认了采集的幼胚发育状态对胚性愈伤组织的诱导有重要影响,并对诱导的培养条件等进行了探讨。     

小麦远缘杂交幼胚无性系的建立及植株分化能力的长期保持

在小麦远缘杂交中,获得有较高分化能力的杂种幼胚无性系,对研究胚状体的发生发育及细胞系分化能力长期保持的方法都有着十分重要的意义。本研究以普通小麦、缺4D 小麦作母本,簇毛麦、滨麦、山羊草作父本,人工杂交17个组合的幼胚为外植体,在 MS 培养基上进行愈伤组织诱导、继代和分化培养。获得了高频率分化能力的杂种幼胚无性系8个,并能使其继代培养5—6年后,仍能保持较高的分化能力,对胚状体的发生和发育进行了组织切片和扫描电镜观察。     

茶花组织培养中体细胞胚状体的形成

本文研究了茶花组织培养中胚状体的形成及各种影响因素。在低浓度BA和NAA的MS培养基上,从子叶等诱导形成胚状体。组织学观察表明,胚状体起源于子叶的表皮细胞。将分离下来的胚状体转移到营养培养基上,能长成苗,并能不断增殖。液体振荡培养促进了胚状体根的生长和茎的发育,已从胚状体得到正常的小植株。     

丁香（Syringa L.）种间杂交幼胚离体培养研究

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究。结果表明,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为50g·L^-1;幼胚在50-60d胚龄时培养最容易成功;加入适量的椰乳、谷氮酰胺或谷氨酸及活性炭可以促进幼胚的萌发和生长。低浓度（0.01mg·L^-1）BA的加入可以提高幼胚的萌发率;NAA浓度以0.01mg·L^-1为最佳。     

小麦幼胚培养高效成株系统的建立

研究探讨了不同的基因型、幼胚取材时期、4℃处理时间、盾片接种方式、分化及生根条件等对小麦幼胚培养再生成株特性的影响,并在此基础上建立了一套高效、可靠、重复性好的小麦组培再生系统。优化条件下,该系统从幼胚诱导致密愈伤组织的频率为89％,致密愈伤组织的分化频率诱导2周时为95％,培养近3个月时仍可达50％以上。此外还发现部分叶状结构当转至新鲜的分化培养基上时能够进一步发育成为芽苗。分化的芽苗在生根培养基上大多生成丛生苗。从基部切开后,每棵芽苗／分蘖均可独立成株。组培苗均可正常地开花结实。     

橡胶树未成苗体细胞胚的茎芽分化及利用

以橡胶树未成苗体细胞胚为试材,选取未成苗双子叶胚、连体胚、多子叶胚、单子叶胚和子叶愈伤化胚作为外植体,研究不同体细胞胚类型的外植体分化茎芽的情况,并利用其进行幼态微型芽条的培育研究。结果表明:在植株诱导培养基中培养80d后,未成苗双子叶胚、连体胚、多子叶胚、单子叶胚、子叶愈伤化胚均能分化出芽,双子叶胚分化率最高(达90%),单子叶胚最低(20%),多子叶胚和连体胚最多可分化出芽3个,双子叶胚2个。幼态微型芽条增殖的最优培养基为MS+6-BA2mg·L-1或MS+6-BA2mg·L-1+KT1mg·L-1,而添加NAA对芽的伸长有抑制作用;适宜幼态微型芽条伸长培养的基本培养基为MS。     

丁香(Syringa L.)种间杂交幼胚离体培养研究

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究.结果表明,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为50g·L^-1;幼胚在50～60d胚龄时培养最容易成功;加入适量的椰乳、谷氨酰胺或谷氨酸及活性炭可以促进幼胚的萌发和生长.低浓度(0.01mg·L^-1)BA的加入可以提高幼胚的萌发率;NAA浓度以0.01mg·L^-1为最佳.     

小麦幼胚培养高效成株系统的建立

研究探讨了不同的基因型、幼胚取材时期、４℃处理时间、盾片接种方式、分化及生根条件等对小麦幼胚培养再生成株特性的影响,并在此基础上建立了一套高效、可靠、重复性好的小麦组培再生系统。优化条件下,该系统从幼胚诱导致密俞伤组织的频率为８９％,致密愈伤组织的分化频率诱导２周时为９５％,培养近３个月时仍可达５０％以上。此外还发现部分叶状结构当转至新鲜的分化培养基上时能够进一步发育成为芽苗。分化的芽苗在生根培养     

玉米幼胚高效再生系统的建立

建立了玉米幼胚高效再生系统。经研究发现,苏玉1号、农大3138、农大108的幼胚培养在含有2,4－D（2.5mg/L）的IM培养基上后,大多数幼胚能愈伤化并增大,形成基部相连、上部分开的微芽结构;微芽结构在转移到BM培养基上后,形成小植株;进一步转移到RM培养基上,它们长根并形成完整杆株。玉米幼胚高效再生植株与下列因素有关：玉米基因型、幼胚大小、幼胚长芽至分化时间、6－BA、IBA、Gelrite。不同品种玉米再生能力有显著差异,幼胚大小在1－2mm之间再生能力强,幼胚长芽至分化时间4－6d最好。激素6－BA浓度在0.5-0.6mg/L之间有利于微芽形成小植株,IBA浓度在0.6-1.0mg/L促进生根。Gelirte可代替琼脂粉用于玉米生根。     

小麦幼胚培养再生单性雌花的研究

通过45个基因型的小麦（Triticum aestivumL.)幼胚培养,发现有11.1%的基因型从靠近再生芽基部的愈伤组织上分化形成花器官,再生花芽呈裸露的,多子房丛生的,具有藏盛羽毛状柱头而缺乏雄蕊,外稃,内稃和颖片的单性雄花。组织切片观察发现,其雌蕊起源于再生芽附近的分生组织细胞,并通过次生雌蕊再生的方式形成从生状,其羽毛状结构的发育先于子房中胚珠的分化,除正常的单胚珠外,还发现双生胚珠分化。X^2独立性检验结果显示,花芽再生率存在强烈的基因型效应,小麦品种YA-1表现突出（44.4%)。其花芽再生潜力能在不同年份间较好地再现,说明YA-1的花芽再生能力具有相对稳定性,与脱分化培养基的效应相比,YA-1的花芽再生效率主要受继代培养基成分的影响,其中,6-BA,NAA和加倍无机铁盐的配比较2,4,-D和正常浓度无机铁盐的配比更有利于YA-1的幼胚培养再生花芽,同时,外植体实验表明,YA-1的幼穗和成熟胚培养无任何成花反应,而其幼胚外植体具有特异的花芽再生能力。据此认为,YA-1的幼胚培养有助于为小麦花发育机理研究建立理想的实验系统。     

小麦幼胚培养再生单性雌花的研究

通过45个基因型的小麦(Triticum aestivum L.)幼胚培养,发现有11.1%的基因型从靠近再生芽基部的愈伤组织上分化形成花器官.再生花芽呈裸露的、多子房丛生的、具有茂盛羽毛状柱头而缺乏雄蕊、外稃、内稃和颖片的单性雌花. 组织切片观察发现,其雌蕊起源于再生芽附近的分生组织细胞,并通过次生雌蕊再生的方式形成丛生状,其羽毛状结构的发育先于子房中胚珠的分化. 除正常的单胚珠外,还发现双生胚珠分化.χ2独立性检验结果显示,花芽再生率存在强烈的基因型效应.小麦品种YA-1 表现突出(44.4%),其花芽再生潜力能在不同年份间较好地再现,说明YA-1的花芽再生能力具有相对稳定性.与脱分化培养基的效应相比,YA-1的花芽再生效率主要受继代培养基成分的影响. 其中,6-BA、NAA和加倍无机铁盐的配比较2,4-D和正常浓度无机铁盐的配比更有利于YA-1的幼胚培养再生花芽.同时,外植体实验表明,YA-1的幼穗和成熟胚培养无任何成花反应,而其幼胚外植体具有特异的花芽再生能力.据此认为,YA-1的幼胚培养有助于为小麦花发育机理研究建立理想的实验系统.