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用TAB法测定了三尖杉酯碱的膜脂氧化效应;用纳秒荧光偏振技术研究了氧化膜脂对DPH标记大鼠心肌肌质网膜脂、ANM标记心肌肌质网Ca^2+-ATPa功能及磷酸化微区运动状态的影响。随膜脂中氧化磷脂的增加,肌质网膜脂双层的微粘度增加,磷脂分子摆动角减小;DPH的荧光强度减弱,荧光寿命缩短。Ca^2+-ATPase的ATP水解活性降低。ANM标记Ca^2+-ATPase磷酸化微区的r(t)曲线半衰期减至 相似文献
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经磷脂酶A2 去脂的肌质网Ca2 + - ATPase 重组于不同比例的二油酰磷脂酰胆碱(Dioleoylphophatidylcholine,DOPC) 和二油酰磷脂酰乙醇胺(Dioleoylphophatidylethanolamine,DOPE) 形成脂酶体,研究了不同磷脂环境中Ca2 + - ATPase 的ATP 水解和Ca2 + 转运活力。结果表明,DOPC 和DOPE 分别有利于ATP 水解和Ca2 + 的转运,DOPE 可以增强Ca2 + - ATPase 的ATP水解和Ca2 + 转运之间的偶联效率。利用内源荧光、荧光淬灭及Forster 能量转移原理测定Ca2 + -ATPase 相应的构象变化, 发现随着DOPE/ DOPC 比例的改变使Ca2 + - ATPase 构象发生相应的变化。 相似文献
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跨膜Ca~(2+)梯差对大豆下胚轴质膜H~+-ATPase活力的影响 总被引:8,自引:0,他引:8
采用两相法得到高纯度封闭的大豆下胚轴质膜微囊,研究了跨膜Ca2+梯差对质膜H+-ATPase质子转运和ATP水解活力的影响。结果表明,在1000:0.1,1000:0.5,1000:1及1000:10(μmol/L:μmol/L)几种梯差下,随着跨膜钙梯差的减小,质膜H+-ATPase质子转运活力逐步降低。然而,上述几种梯差对H+-ATPase水解活力的影响却很小。进一步研究发现,1000:0.1及1000:1(μmol/L:μmol/L)两种梯差对Km值没有影响,但K+对H+-ATPase的激活作用在两种梯差下存在显著差别。MC540荧光、DPH荧光偏振结果表明,跨膜钙梯差影响着膜脂的聚集状态和流动性。本文对跨膜Ca2+梯差对于大豆下胚轴质膜H+-ATPase水解与质子转运活力影响的可能机制进行了讨论。 相似文献
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低氧、血管紧张素Ⅱ对肺内小动脉平滑肌细胞膜Ca2 ┐ATPase活力的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本课题观察了低氧及血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对分离培养家兔肺内小动脉平滑肌细胞(PASM-Cs)膜Ca2+-ATPase活力的影响,同时用钙通道阻断剂维拉帕米(verapamil,VP)进行干预,进一步了解细胞内钙与Ca2+-ATPase活力的关系。结果表明:PASMCs膜Ca2+-ATPase活力对低氧具有短暂的耐受性,随低氧时间延长,Ca2+-ATPase活力呈时间依赖性抑制;低氧、ANGⅡ均能抑制Ca2+-ATPase活力(P<0.01)低氧+AⅡ对Ca2+-ATPase活力的抑制具叠加效应(P<0.05);VP可逆转低氧、AngⅡ、低氧+AngⅡ对Ca2+-ATPase活力的抑制(P<0.01)。结果提示:低氧,ANGⅡ可通过抑制肺血管平滑肌细胞膜Ca2+-ATPase活力而可能削弱肺血管平滑肌舒张功能也可能是低氧性肺动脉高压(HPH)形成的原因之一。 相似文献
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研究了神经节苷脂GM_3参入肌质网膜后Ca~(2+)-ATP酶活力的变化,结果表明:GM_3参入肌质网膜后,对肌质网Ca~(2+)ATP酶活性(ATP水解活力与转运活力)有明显的激活作用.当参入的GM_3浓度为8μmol/L、参入时间为120min、温度为30℃时,对Ca~(2+)-ATP酶的激活作用最大. 相似文献
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研究了神经节苷脂GM3参入肌质网膜后Ca^2+-ATP酶活力的变化。结果表明:GM3参入肌质网膜后,对肌质网Ca^2+-ATP酶活性(ATP水解活力与转运活力)有明显的激活作用。当参入的GM3浓度为8μmol/L、参入时间为120min、温度为30℃时,对Ca^2+-ATP酶的激活作用最大。 相似文献
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稀土离子对CaM及Ca2+-Mg2+-ATPase活力及CD研究 总被引:4,自引:0,他引:4
研究了稀土离子(Ln3+)对钙调蛋白(CaM)调控的Ca2+-Mg2+-ATPase的活力影响。结果表明,在CaM和Ca2+-Mg2+-ATPase的体系中,一些Ln3+(La3+、Gd3+)对由CaM调节的Ca2+-Mg2+-ATPase的活力影响呈现双相效应,即Ln3+在低浓度时,能提高激活Ca2+-Mg2+-ATPase的水解活力;在高浓度时,则抑制CaM调节Ca2+-Mg2+-ATPase活力的能力;少数Ln3+(Sm3+)仅表现出抑制效应。在无CaM的Ca2+-Mg2+-ATPase体系中,高浓度的Ln3+抑制Ca2+-Mg2+-ATPase的基础活力。结合圆二色(CD)谱信息对Ln3+和CaM相互作用的分子机制进行了初步的探讨。 相似文献
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Birefringence of flow of preparations of myosin 总被引:4,自引:0,他引:4
BINKLEY F 《The Journal of biological chemistry》1948,175(1):385-390
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A sensitive method for the detection of small quantities of hydrophobic antioxidant free radical scavengers such as butylatedhydroxytoluene (BHT) and butylatedhydroxyanisole (BHA) in aqueous samples is described. The procedure involves extraction of the hydrophobic free radical scavenger into an organic solvent phase, followed by the subsequent reaction of an aliquot of this extract with the stable cation radical tris(p-bromophenyl)amminium hexachloroantimonate (TBACA). In experiments with BHT and BHA, the loss of TBACA absorbance at 730 nm was found to be linearly proportional to the amount of antioxidant added, with quantities of BHT as small as 200 pmol being easily detectable. In aqueous suspensions of dimyristoylphosphatidylcholine vesicles, assays of the aqueous BHT concentration showed that BHT partitioned strongly into the membrane phase, achieving very high BHT/phospholipid ratios. For a given concentration of BHT, partitioning into the membrane phase was greater in large, multilamellar liposomes than in either small, single-walled vesicles or in purified rat brain synaptic vesicle membranes. Direct assay of BHT and BHA in phospholipid membranes, however, was complicated by a nonspecific interaction between TBACA and the phospholipid. 相似文献
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