植物样品组织导电技术

为了解决植物样品导电和二次电子发射率的问题,采用表面真空喷镀(或离子溅射)的办法,使样品表面均匀地蒸镀上一层导电膜(金、铂、碳等),供扫描电镜观察其表面微细结构形貌。由于样品在喷镀过程中要受到热辐射等影响,往往引起样品变形,而且还要受到设备和材料的限制。为了解决样品热辐射变形等影响,电镜工作者寻找了许多方法,如新鲜样品低压观察     

“锇酸—丹宁酸—锇酸”法在扫描电镜术中植物样品制备的应用

用扫描电镜(SEM)观察生物样品,首先要使样品表面导电。现在的常规法是用金属喷镀法来达到这一目的。该方法的主要缺点是金属膜的厚度和膜层的不均匀性,而对一些多孔粗糙的样品要在整个表面喷镀一层连续的金属膜更为困难。随着细胞生物学的不断发展,所观察样品结构的要求也越来越细微,使这一     

植物样品组织导电技术

为了解决植物样品在进行电镜观察时,导电和二次电子发射率的问题,通常采用真空喷镀(或离子溅射)的方法,使样品表面均匀地蒸涂上一层导电膜(金、铂、碳等),供电镜观察表面形貌。但是样品在真空中进行喷镀时往往受到不同程度的热辐射影响,引起样品变     

新鲜生物样品扫描电镜低压观察技术

扫描电子显微镜在生物学上的应用已很普遍。用扫描电镜观察生物表面所揭示的细微结构、远比光学显微镜图象清晰、分辨率高,为生物学的研究提供了很好的工具。由于扫描电镜生物样品的常规制备比较烦琐,须经固定、脱水、干燥,表面喷镀金属膜等过程,不但样品制备周期较长,而且因操作环节繁多往往容易造成样品损伤和变形,使图象不够理想。而新鲜     

真菌的冷冻扫描电镜观察

冷冻扫描电镜法是根据低温生物学原理,生物样品经过超低温处理后进行电镜观察的一种方法。经超低温冷冻固定的生物样品可保持其原有的形态特征和生物活性。样品内部水份在超低温(—150℃)下,即使在真空中升华速度     

扫描电子显微镜植物材料的一种化学干燥技术

扫描电镜新鲜生物材料的制备,一般都要经过干燥处理,其目的主要是使样品不产生收缩畸变,以使样品的形态结构保持在生活状态,如此获得的样品图像才自然真实。现代广为应用的扫描电镜生物样品的干燥方法是临界点干燥(CPD)法。另外还有莰烯干燥法、乙腈干燥法和叔丁醇干燥法等。Jemes(1983)应用化学试剂六甲基二硅胺烷(nexamthyl disilazane,简称 HMDS),分子式[(CH_3)_3Si]_2对昆虫组织进行干燥处理并     

高水分、富含淀粉植物组织的扫描电镜制备技术优化

应用常规高真空扫描电子显微镜观察生物样品必须经过脱水和干燥处理,但无论采用临界点干燥还是冷冻干燥方法,都存在样品表面不同程度失真的问题。植物高水分、富含淀粉组织样品经处理后,容易出现淀粉流失、细胞壁变形等现象,从而造成扫描图像粗糙,无法获得真实的细胞内部结构。本文通过对CO_2临界点干燥、化学固定样品冷冻干燥和新鲜样品冷冻干燥3种扫描电镜样品制备技术中后期制样进行机械断裂和液氮脆断改进,优化出两种植物高水分、富含淀粉组织的扫描电镜样品制备方法:(1)样品首先进行FAA化学固定,经冷冻干燥后用液氮脆断,对断面喷金镀膜和扫描电镜观察。利用该方法所得细胞结构完整,细胞壁整齐,淀粉粒和蛋白轮廓明确,可用于分析淀粉粒和蛋白颗粒在细胞内的分布。(2)新鲜样品直接进行冷冻干燥,经液氮脆断后对断面喷金镀膜和扫描电镜观察。利用该方法所得细胞壁整齐,淀粉粒轮廓更清晰,并且无蛋白颗粒干扰,用于分析淀粉粒在细胞内的分布更加理想。     

慢性睡眠剥夺对颞下颌关节微结构的影响

目的:研究慢性睡眠障碍对大鼠颞下颌关节微结构的影响。方法:采用改良多平台法(MMPM)建立睡眠剥夺模型,将90只Wistar大鼠随机分为3组(n=30),分别为小平台组、网格组和对照组。小平台组和网格组大鼠接受每天18 h的睡眠剥夺和6 h间歇期(10:00—16:00),间歇期大鼠正常笼养。实验第7、14和21天时分别行动物行为学观察、旷场试验和动物血浆检测,并通过HE染色和扫描电镜观察颞下颌关节微结构的变化。结果:与对照组和网格组相比,小平台组大鼠血清促肾上腺激素(ACTH)和皮质醇(CORT)水平均增高(P<0.05),髁突软骨HE染色显示软骨细胞层次及厚度改变;扫描电镜结果显示关节盘表面纤维排列松散。结论:慢性睡眠障碍可能导致颞下颌关节微结构发生病理性改变。     

开展红外光谱测试服务工作

为了贯彻科学技术工作要面向经济建设的方针,推动科研工作,充分发挥贵重仪器的作用,生物物理研究所五室开展了红外光谱测试服务工作。该室所用测试仪器为580B型红外光谱仪扫描范围4000cm~-1—180cm~-1(2.5μ—50μ),其特点是附件添置齐全,可进行各种样品的测试。和带有微量样品池,可测试微量液体;有聚光器,可测微量固体;有可变光路池,可测不同厚度液体样品;备有变温池,测量温度变化范围可由     

花粉块内花粉粒形态观察的扫描电镜样品制备方法

探讨在扫描电镜下观察花粉块内花粉粒的样品制备方法。以翅萼石斛(Dendrobium cariniferum Rchb.f.)的花粉块为材料,在常规扫描电镜样品制备的基础上,采用导电双面胶带拉断法,暴露出花粉块内部的花粉粒,使用扫描电镜进行观察。在扫描电镜下清晰观察到了花粉块内花粉粒的立体形态、大小和表面纹饰。此法简单易行,操作方便,进一步优化后可作为扫描电镜下观察花粉块内花粉粒形态的通用方法。     

扫描电镜照相的拼片技术

<正> 在扫描电子显微镜对样品的观察摄影中,由于仪器的最低倍数有一定的限度(我所仪器为30倍),因此对于大样品的全貌往往需要用几张或几十张照片拼接而成(图1)。另外,对于一些细长的样品,例如昆虫的触角、足、须等,如果用低倍率在一张照片上反映全貌的话,只     

一种快速、简易的扫描电镜植物样品干燥新方法

扫描电子显微镜是观察植物样品表面超微结构的有效方法,大部分新鲜植物样品需经过干燥处理才可以进行扫描电镜观察。该研究在传统叔丁醇冷冻干燥法的基础上,建立了叔丁醇一步冷冻干燥法,省略了固定、脱水、置换等步骤,简便易行,干燥后的样品形态饱满,最大程度保持了样品原貌。用叔丁醇一步冷冻干燥法干燥的样品可以与CO_2临界点干燥法和常规叔丁醇冷冻干燥法的效果相媲美。通过对不同的样品进行干燥处理,结果证明,该方法具有广泛适用性。     

绒毡层及小孢子发育研究的扫描电镜样品制备

锇酸-二甲基亚砜—锇酸冷冻割断法制备的样品,在扫描电镜下,可观察绒毡层及小孢子发育过程,细胞形态保存良好,结构清晰,立体感强,为用扫描电镜研究植物细胞结构提供了一个有应用价值的方法。     

化学杀雄剂（铁氰化钾）在组织培养过程中对菜豆花药雄性不育影响的初步研究

本实验利用铁氰化钾处理组织培养的菜豆早期花药(小孢子单核期),以检验该药剂的杀雄效果。在组织培养条件下,药剂杀雄的有效浓度为0.1—0.5ppm;通过组织化学及扫描电镜等细胞学观察表明,杀雄作用与绒毡层过氧化物酶受抑制及小孢子外粉壁形成受阻有关。     

电镜Formvar膜制备要点

在光学显微镜下研究各种对象时,标本都是放在载玻片上,但在电镜下,由于电子不能穿透玻璃,所以不能用玻片作为标本的支持物,于是便采用一种很薄的电子透明薄膜附着在金属网上作为支持膜,用以支持所要观察的各种样品。金属载网一般有直径3毫米与2毫米两种,常用的载网是铜质的,故称铜网,铜网上的这层薄厚度约200A。如果膜太薄时,样品容易漂移或被电子束打破,膜太厚时,分辩率将降低。支持膜除了有一定的厚度和机械强度外,这层膜还应具有透明,在电镜下无可见的结构及与所装载的样品不起化学反应等特性。常用的支持膜有火棉胶膜和Formvar膜。高分辩研究时用碳膜或微筛膜(即带孔的膜)。由于Formvar膜     

如何防止花粉流失

植物花粉肉眼难以看到,在按扫描电镜常规方法制备样品很容易流失。如果在取材时将花药整体采取一起固定,操作时不碰破花药囊,花粉就不会流失。这样可按扫描电镜常规方法处理样品(双固定时间可延长到12小时以上,固定时需抽真空),待临界点干燥做完之后,再用镊子把花药轻轻夹到贴有双面胶纸的样品座上,捣碎花药囊花粉就会从囊中落出而粘在胶纸上,喷金后即可进行电镜观察。注:实验样品由林志华同志供给,蔡继炯同志拍摄电镜照片.     

三种显微技术对人毛囊蠕形螨的观察和研究

目的 采用荧光显微镜、扫描电镜和激光共聚焦显微镜对人体毛囊形蠕形螨进行形态学观察.方法 选用5 μg/mL碘化丙啶(propidine iodide,PI)对虫体进行荧光染色,避光染色15 min,分别置于荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察;2.5%戊二醛固定虫体标本,梯度酒精和叔丁醇脱水,金喷镀后扫描电镜观察.结果 荧光显微镜下碘化丙啶对虫体有很强的结合力,虫体荧光信号均匀展示于细胞表面,充分展现虫体形态,扫描电镜更加清楚、细致地展示人体毛囊型蠕形螨的超微结构,激光共聚焦显微镜将虫体分层扫描图片进行三维重建,真实、完全、直观地展露了虫体.结论 三种显微技术均可展示蠕形螨超微形态.PI对虫体有很好的荧光染色作用,使激光扫描共聚焦显微镜能够获得更加精准的超微形态结构,结合三维重建技术有着广泛的应用价值.     

应用冷冻割断法研究鱼类卵母细胞生长的制样方法

生物样品制备技术的改进和发展,使扫描电镜能够观察生物组织内部结构1,2;但对生物组织内部结构观察的制样方法多是针对较小细胞组成的实质组织和器官,而对鱼类卵母细胞(尤其是生长和成熟期)这种大型细胞构成的卵巢的制样方法则无报道。本文以越南鱼(Tilapia mossambira)为主,介绍冷冻割断对鱼类卵巢制样,置扫描电镜下观察卵母细胞生长及内部结构变化的方法。       

变质甘蔗中毒病原菌节菱孢的分类鉴定

对163株从中毒甘蔗和变质甘蔗样品中分离的产毒节菱孢进行了分类鉴定,其中98株定名为甘蔗节菱孢(Arthrinium sacchari M.B.Ellis),占60.1％;43株定名为蔗生节菱孢(A.saccharicola Stevenson),占26.4％;22株为暗孢节菱孢[A.phaeospermum(Corda)M.B.Ellis],占13.5％。前两个种为国内新记录。并用小培养法及扫描电镜观察了分生孢子的形态及着生特点。     

苏氏(鱼芒)味蕾的显微和超微结构

用表面染色法、普通光镜、扫描电镜和透射电镜对一种气呼吸鲶形目鱼类——苏氏(鱼芒)(Pangasius sutchi)须部和口咽腔中的味蕾进行研究。在观察样品上存在三种类型的味蕾:Ⅰ型味蕾位于高乳突上;Ⅱ型味蕾位于低乳突上,Ⅲ型味蕾位于表皮正常水平。根据扫描电镜的观察结果本文首次