香蕉通过胚状体途径的快速繁殖研究

采用吸芽顶端分生组织培养的方法快速繁殖香蕉已广泛应用于生产。近年来,我们通过胚状体途径的快速繁殖已取得成功。取香蕉花序顶端3—5厘米,分别将雄花、花苞片和花序轴剪碎作外植体。基本培养基为MS。诱导胚状体培养基为 MS 2,4-D2mg/L(单位以下同) BA0.5 NAA0.5,胚状体发育和分化培养基为 MS BA3.0 NAA0.2;加速再生植株生长培养基为 MS KT0.2 NAA0.     

中粒种咖啡花药培养成完整植株

1 植物名称中粒种咖啡(coffea robusta)。 2 材料类别花药。 3 培养条件基本培养基为MS,(1)诱导愈伤组织培养基附加KT0.8 mg/L(单位下同)、2,4-D 0.8、NAA1、蔗糖5％、琼脂0.5％,pH 5.8。(2)诱导胚状体培养基附加BA 2、KT 0.5、NAA 0.2、CH 500、蔗糖3％、琼脂0.6％,pH 5.8。(3)胚状体分化成苗培养基为3/4MS附加BA0.5、NAA0.8、GA0.1、活性炭0.1％、蔗糖2.5％、琼脂0.7％,pH 5.8。培养温度25     

防风组织培养中畸形胚状体的发生和控制

采用组织培养和石蜡切片法,分析多种因素对防风畸形胚状体发生和发育过程的影响及控制。结果表明,诱导正常体细胞胚高频发生的培养基组合是：启动胚性愈伤组织的培养基是MS 0．5mg／L 2．4-D,蔗糖浓度3％;分化培养基是MS 1mg／L 6-BA 0．2mg／L NAA 0．5mg／L ABA,蔗糖浓度4％～5％;成熟培养基是MS培养基,蔗糖浓度3％。结论：一定浓度的生长素是诱导防风胚性愈伤组织的关键因素,细胞分裂素在体细胞胚的分化和发育过程中起协同作用;蔗糖浓度、ABA、接种方法以及适宜的培养条件和培养容器等均可有效降低畸形胚状体的发生率。     

三七胚培养中的胚胎发生

三七成熟胚培养于MS 1 mg/l IAA或NAA或2,4-D的培养基上。二月后,在MS 1mg/l IAA或NAA的培养基上由外植体可诱导产生胚状体,但在含2,4-D的培养基上只产生愈伤组织而无器官分化。胚状体转入MS GA_3 1mg/l IAA0.5 mg/l培养基上可发育成具胚根、根芽的小植株。     

三尖杉的离体胚培养

1植物名称三尖杉(Cephalotaxus fortunei Hook.f.)。2材料类别离体胚。3培养条件芽诱导培养基:MS 6-BA2.0mg·L-1(单位下同) IAA1.0 NAA0.1;芽增殖培养基:MS 6-BA2.0 IAA1.0 NAA1.0;生根培养基:1/2MS IBA1.0 NAA0.5 KT0.2。以上各培养基     

非洲紫罗兰叶片体细胞胚培养及快繁技术研究

以非洲紫罗兰叶片为材料进行胚状体诱导及快繁技术研究.结果表明:.在MS NAA0.1mg/L BA0.1 mg/L 2,4-D1.0 mg/L的培养基上培养15d利于诱导胚性细胞分化,起始黑暗培养5～10d可提高胚性细胞分化率;在MS BA0.05～1mg/L的培养基上可诱导胚状体大量发生;在MS NAA0.1mg/L十BA0.1 mg/L的培养基上能够获得茎芽快速增殖;在1/2MS NAA0.01mg/L的培养基上可以生根.     

三七胚培养中的胚胎发生

三七成熟胚培养子MS+1 mg／L 1AA或NAA或2,4 — D的培养基上。二月后,在MS+1 mg／L 1AA或NAA的培养基上由外植体可诱导产生胚状体,但在含2,4 — D的培养基上只产生愈伤组织而无器官分化。胚状体转入MS+CA3 1 mg／L+IAAo.5 mg／L培养基上可发育成具胚根、根芽的小植株。     

网纹甜瓜幼嫩卷须培养初报

本试验表明,网纹甜瓜卷须愈伤组织诱导的培养基以N₆大量元素+MS其他元素+NAA 0.5 ppm+BA 3.0 ppm最好;愈伤组织的增殖以MS+BA 2.0 ppm或4.0 ppm为好;胚状体的形成和茎叶分化在MS+BA 4.0 ppm培养基上分化发育最佳。     

何首乌体细胞胚的诱导及植株再生研究

以何首乌茎尖、茎段为外植体,经体细胞胚发生途径,进行胚性愈伤组织诱导、体细胞胚的诱导、植株再生的研究.并采用临时压片法对体细胞胚的发育过程进行观察.结果表明愈伤组织诱导最适培养基为Ms＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L,体细胞胚诱导最适培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L.将产生的体细胞胚首先接种于MS基本培养基使其充分发育后转入MS＋6-BA 2.0 mg/L培养基中诱导出芽,出芽率高于直接采用Ms＋6-BA 2.0 mg/L培养基诱导.体细胞胚的发育过程是首先在愈伤组织表面形成许多瘤状突起即胚性细胞团,胚性细胞团继续发育成球形胚、盾形胚,球形胚、盾形胚成熟后发育成植株.     

茶花组织培养中体细胞胚状体的形成

本文研究了茶花组织培养中胚状体的形成及各种影响因素。在低浓度BA和NAA的MS培养基上,从子叶等诱导形成胚状体。组织学观察表明,胚状体起源于子叶的表皮细胞。将分离下来的胚状体转移到营养培养基上,能长成苗,并能不断增殖。液体振荡培养促进了胚状体根的生长和茎的发育,已从胚状体得到正常的小植株。     

龙眼花粉植株的诱导

以优良品种“东璧”花粉处于单核期的花药为材料。诱导愈伤组织用MS培养基,附加K1.0 mg/l,2,4-D 2.0 mg/l,活性炭5,000 mg/l,蔗糖5％。分化胚状体在杜鹃培养基补加6BA 0.5mg/l,NAA0.1mg/l,蔗糖3％中取得成功。这些胚状体只有再转入减少了激素和有机氮的杜鹃培养基中才能萌根、发芽,长成正常的龙眼花粉绿苗。第一批完整花粉绿苗是在1980—1981年得到的。随后经根尖压片镜检,多数细胞具有15条染色体,证明它们是来自花粉的单倍体植株。     

石刁柏胚乳愈伤组织内胚胎发生的组织细胞学观察

石刁柏(Asparagus officinalis L.)的幼嫩胚乳接种于MS+NAA 5ppm+6-BA 1ppm和MS+NAA 1ppm+6-BA 0.5ppm的培养基上诱导产生愈伤组织。将愈伤组织转移到MS+6-BA 1ppm+NAA 0.5ppm的分化培养基上,培养30天后即可形成胚状体,组织细胞学观察表明:胚状体起源于愈伤组织内或近表层的单个胚性细胞。在胚状体发生的早期阶段,观察到与柳叶菜型和藜型胚胎发育大致相似的细胞分裂方式,从而出现了T型或线型的四个细胞的原胚。在多细胞原胚及球形胚期具有单列或不规则排列的多细胞胚柄。石刁柏胚乳愈伤组织中的胚胎发生是不同步的,在同一块愈伤组织的切片中可以观察到不同发育阶段的胚状体。在外形上还可以观察到一个子叶、两个子叶或四个子叶等多种不同形态的胚状体。一部份胚状体能发育成完整小植株。     

苦荞胚性愈伤组织诱导与植株再生研究

以苦荞子叶和下胚轴为外植体,进行了不同浓度激素组合的MS和SH固体培养基对胚性愈伤组织诱导及植株再生的研究。结果发现,MS培养基比SH培养基更有利于胚性愈伤组织诱导;2,4-D是诱导愈伤组织的有效激素,KT能有效促进胚状体的形成;下胚轴和子叶都能有效诱导出胚性愈伤组织和再生植株。下胚轴在MS 1.5mg·L-12,4-D 1.5mg·L-1BA培养基,子叶在MS 2mg·L-12,4-D 0.5~1.5mg·L-1BA上能高效诱导出愈伤组织;愈伤组织在MS 2mg·L-12,4-D 0.1mg·L-1KT培养基中继代,能有效诱导胚性愈伤组织;来自下胚轴的胚性愈伤组织在1/2MS 2.0mg·L-1BA 0.5mg·L-1KT 0.1mg·L-1NAA培养基上能够高频再生出芽,来自子叶的胚性愈伤组织在1/2MS 1.0mg·L-1BA 0.1mg·L-1KT 0.1mg·L-1NAA培养基上芽诱导率较高;MS 1mg·L-1NAA是适宜的再生苗生根培养基。     

金花茶子叶在离体培养中胚状体的发生和小植株的形成

研究了金花茶(Camellia chrysantha(Hu)Tuyama)子叶在离体培养中体细胞胚状体发生的条件。在MS基本培养基中附加苄基嘌呤(BA)或苄基嘌呤与萘乙酸(NAA)组合,诱导了胚状体发生。组织学观察表明,胚状体起源于子叶的表皮细胞。在增添细胞分裂素和生长素的MS或改良B_5液体培养基里振荡培养,明显地促进了胚状体根的生长和茎的发育。胚状体在继代培养中能保持旺盛的再生能力。已得到两个繁殖率较高的胚状体无性系。在合适的条件下,胚状体能长成正常的小植株。     

一品红组织培养中植物激素对胚状体发生的效应

以一品红(Euphorbia pulcherrima Willd)幼茎为外植体,接种在培养基MS+ZT 0.5mg*L-1(以下单位相同)、NAA 0.5、IBA 0.5、2,4-D 1.0、6-BA 1.0上诱导愈伤组织,其中以MS+NAA 0.5时愈伤组织诱导率最高,为96.4%.将继代培养的愈伤组织,接种到MS+ZT 1.0+NAA 0-2.0、IBA 0-2.0、2,4-D 0-2.0;MS+6-BA 1.0+NAA 0-2.0、IBA 0-2.0、2,4-D 0-2.0培养基上,进行胚状体的分化培养,其中以ZT 1.0+2,4-D 0.5效果最好.     

羽衣甘蓝的小孢子胚诱导和植株再生

以羽衣甘蓝10个品种的游离小孢子培养,研究其胚状体及其再生植株诱导方法的结果表明,琼脂糖和活性炭对诱导胚状体发生及发育有促进作用;改良MS培养基中添加0.01%的活性炭可促进植株再生;确定1/2MS NAA 0.1 mg·L-1是优化生根的培养基;小孢子再生植株成活率可达74.6%.     

黄连体细胞胚胎发生的研究

黄连(Coptis chinensis)叶片外植体在 MS 2,4-D 1 ppm 培养基上很容易产生愈伤组织。愈伤组织在转入分化培养基 MS 6-BA 0.5ppm NAA 1ppm 培养基上以后,能产生大量胚状体。胚状体可经过球形、心形、鱼雷形及子叶期等诸阶段发育成小植株。对胚状体用4%的藻酸钠和2%的氯化钙进行人工种皮包埋后,在无菌条件下,胚状体转变成苗。愈伤组织在分化培养基上经几次继代后,整个愈伤组织可转变为胚性愈伤组织并形成一个个胚性细胞团。胚状体可从其表面或愈伤组织内的任一细胞团产生。这一研究结果为获得大量分散的单个胚状体及人工种子的研制提供了良好的实验系统。     

甜椒花药培养及再生植株技术体系的研究

为建立甜椒(Capsicum annuum var.grossum)花药培养及再生植株技术体系,对影响花药胚状体诱导和分化的因素进行了研究。结果表明,培养基组成对胚状体诱导率的影响以NAA基本培养基椰乳KT,最佳胚状体诱导培养基为NTH+0.1 mg L–1 NAA+10%椰乳+1 mg L–1 KT+50μmol L–1 Ag NO3+30 g L–1蔗糖+5 g L–1琼脂+2 g L–1活性炭。花药经过24 h低温预处理和8 d高温预培养后,胚状体诱导率可达23.38%。植物生长调节剂对胚状体出芽率的影响为6-BANAAIAA,最佳胚状体分化培养基为NTH+1 mg L–1 6-BA+0.3 mg L–1 NAA+0.1 mg L–1 IAA+30 g L–1蔗糖+5 g L–1琼脂。胚芽转入1/2MS+0.5 mg L–1 IBA+30 g L–1蔗糖+5 g L–1琼脂培养基后,生根率可达92.5%。     

黑龙骨的组织培养与植株再生

1植物名称黑龙骨(Periploca forrestii Schltr.)。2材料类别种胚萌发的无菌苗茎段。3培养条件以MS为基本培养基。(1)种子萌发培养基:不含任何激素的MS;(2)诱导分化培养基:MS TDZ2.0mg·L-1(单位下同) NAA0.1;(3)增殖培养基:MS 6-BA2.0 NAA0.1;(4)生根     

风信子的组培

用风信子(Hyacinthus orientalis) 的小鳞茎常规消毒,切成0.4×0.4厘米的小块,接种在MS+6BA10毫克/升+ NAA1毫克/升培养基内,在15—20℃自然光加1000勒克司日光灯,每天10小时光照15天后,形成愈伤组织块,一个月后每块形成10—66个胚状体。将胚状体移植于生长培养基MS+6BA2毫克/升+NAA2毫克/升内继续培养,15天后