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1.  秋水仙素对大鼠前脑生长抑素mRNA表达的影响  被引次数:2
   向正华  蔡文琴  孟璘  钱国桢  王代学《中国组织化学与细胞化学杂志》,1995年第2期
   本实验用地高辛标记生长抑素(SOM)反意。RNA探针原位杂交组织化学研究了秋水仙素对大鼠前脑SOMmRNA表达的影响。结果表明秋水仙素对前脑各核区SOMmRNA的表达有明显的影响。结果表明秋水仙素对前脑各核区SDMmRNA的表达有明显的核区特异性:大脑新皮质各区,隔核和脚内核中SOMmRNA阳性神经元数目及含量增加;海马复合体和下丘脑室周核和弓状核中SOMmRNA阳性神经元数目及含量下降;嗅脑,尾壳核和丘脑等核区的则无明显变化、秋水仙素对SOMmRNA表达的核区特异性对正确分析秋水仙素条件下获得的神经肽或神经递质的定位资料具有重要的指导意义。    

2.  大鼠鼻粘膜肽能神经末梢分布的研究  被引次数:1
   赵长青  陶正德  肖健云  赵素萍  杨东晓《中国组织化学与细胞化学杂志》,1996年第1期
   用免疫组化技术(ABC法)系统研究了大鼠鼻粘膜9种肽能神经末梢分布的特征,这9种神经肽分别是P物质(substanceP,SP),神经激肽A(neurokininA,NKA),神经激肽B(neurokininB,NKB),降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP),血管活性肠多肽(vasoactiveintestinalpolypeptide,VIP),神经肽Y(neuropeptideY,NPY),甘丙肽(galanin,GAL),生长抑素(somatostatin,SOM)及神经降压素(neurotensin,NT),同时选择与鼻粘膜神经肽(NP)作用密切相关的三叉神经节(TG)细胞进行上述NP的定位。用重组PSP65质粒(400SOMcDNA)制备SOMmRNA单链探针,以地高辛精标记,在鼻粘膜及TG细胞进行SOMmRNA的原位杂交组化研究。结果提示大鼠鼻粘膜有丰富的肽能神经末梢;TG细胞含有多种NP并且可以合成SOM。该研究结果对重新认识鼻粘膜神经分布规律有一定意义。    

3.  大鼠脊髓内生长抑素mRNA原位杂交的研究  
   陶元祥 魏锋《动物学报》,1996年第42卷第3期
   采用地高辛标记生长抑素反意RNA探针经原位杂交和显色后,光学显微镜下观察生长抑素mRNA在大鼠脊髓内的定位。结果显示:脊髓内含有大量呈紫蓝色的生长抑素mRNA阳性神经细胞,岍性磷酸酶反应产生    

4.  生长抑素前体蛋白1和前脑啡肽原mRNA在鸡肠Remak神经中的分布  
   柳金雄  冯亚枚  陈秋生《动物学报》,2007年第53卷第2期
   肠Remak神经(Intestinal nerve of Remak,INR)是禽类特有的一根自主神经节链,但INR中肽类递质的分布至今仍然存在许多疑问。本文应用RT-PCR方法从鸡脑组织提取的RNA中扩增生长抑素前体蛋白1(Somatostatin precursor1,PSS1)和前脑啡肽原(Preproenkephalin,PPE)基因片段,将其连接于pGM-Teasy质粒,经过转化大肠杆菌、挑取阳性克隆和测序鉴定,确定为目的片段。分别以线性化的SS1/pGM-Teasy和PPE/pGM-Teasy质粒为模板,用体外转录的方法合成正反义地高辛标记RNA探针。通过原位杂交方法将合成的探针用于探查PPE和PSS1 mRNA在鸡空回肠段和直肠段INR中的分布情况。结果表明:INR中大部分神经细胞中有PPE和PSS1的mRNA的转录,其中PPE探针杂交阳性细胞在空回肠段和直肠段INR分别占83.79%±7.96%和96.04%±4.53%,而PSS1探针在空回肠段和直肠段INR中的杂交阳性细胞分别占86.98%±7.93%和86.07%±6.11%;在整个INR中都可能有PPE和PSS1 mRNA共存于同一神经细胞的现象;原位杂交阳性神经细胞胞体呈有突起的梭形或椭圆形,其纵轴与INR延伸的方向平行;阳性神经细胞胞体在INR神经节中呈层状或成群分布,在节间束也有少量的阳性细胞分布。本文从基因水平证明INR中大量神经细胞进行PPE或PSS1的mRNA的转录,并可能作为外源性生长抑素1和脑啡肽能神经纤维支配到肠壁和输卵管    

5.  地高辛标记反意RNA探针检测脑组织切片生长抑素mRNA  被引次数:2
   姚钧  王瑞安《中国组织化学与细胞化学杂志》,1994年第1期
   本实验采用含大鼠生长抑素基因的pSP65cDNA质位通过转化至噬菌体内大量扩增,经提取,纯化后,用限制性内切酶进行酶切使质枝线性化,并将其作为模板,用地高辛(DigoxigeninDig)作为标记物,体外转录合成生长抑素反意RNA(cRNA)探针。实验动物选用wistar新生大鼠。冰冻切片,端、间脑切片经杂交前用Dig-UTP标记的cRNA探针杂交,杂交后用抗Dig-碱性磷酸酶复合物进行酶联免疫反应。X-磷酸盐-NBT显色。结果显示新生大鼠脑内生长抑素mRNA神经元着紫蓝色。杂交反应物集中于核周的胞浆及短小的突起内。胞核不着色。胞体轮廓清晰,周围背底浅淡。结果表明Dig标记cRNA探针不仅具备非同位素标记探针的优点而且能快速和准确检测组织细胞内mRNA的表达。    

6.  恒河猴肺内CGRP及CGRP mRNA免疫组织化学和原位杂交的研究  
   张远强 许若军《动物学研究》,1998年第19卷第2期
   本实验采用免疫组织化学ABC-GDN法和地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术,研究了降钙素基因相关肽(CGRP)及其mRNA在恒河猴内的表达。结果显示CGRP分布于恒河猴肺内各级支气管粘膜上皮的神经内分泌细胞(NEC)和神经上皮样小体(NEB)中。CGRP杂交阳性细胞的分布与免疫组织化学的结果相同。CGRP mRNA杂交信号均匀分布于整个细胞质,而CGRP免疫反应物仅在神经内分泌细胞的基部更明显,说    

7.  大白鼠弓状核内生长抑素mRNA分布的原位杂交组化研究  
   印克杰 戴晓章 周平 童鑫康《动物学杂志》,1996年第31卷第1期
   本文用原位杂交组织化学技术对大鼠下丘脑弓状核内生长抑素mRNA(SOMmRNA)的分布进行研究。发现生长抑素mRNA主要分布于弓状核的神经元胞体及近端树突内。含SOMmRNA的神经元可分为浓染大细胞及淡染小细胞两种类型。结果表明弓状核内某些神经元可以合成生长抑素。    

8.  2Hz和100Hz电针加速脑内三种阿片肽基因表达  被引次数:20
   郭惠夫 王晓民《生理学报》,1997年第49卷第2期
   我室以往的工作证明2Hz和100Hz电针可引起中枢释放不同种类的阿片肽,本工作试图阐明不同频率的电针是否影响三种阿片肽的基因转录。用地高辛标记的反义cRNA探针进行原位杂交,显示大鼠脑内前脑啡肽原(PPE),前强啡肽强(PPD)和前阿黑皮素原(POMC)mRNA。结果:(1)低、高频电针均不影响POMC mRNA的水平。(2)对PPE的影响,两种频率电针诱导脑干网状结构头端腹内侧区PPE mRNA    

9.  nov基因的表达与脑的种系发育分化平行相关  被引次数:4
   苏炳银  蔡文琴  张成岗  Bernard Perbal《动物学报》,2001年第47卷第6期
   用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学方法研究了鲢、鸡、牛、犬和猫脑肾母细胞瘤过度表达是基因阳性神经元的比较发育。结果显示,低等脊椎动物鲢脑仅有少量nov mRNA阳性神经元,分布于延髓的迷走神经背核、三叉神经背核、丘脑前核、丘脑后核、下丘脑背侧核、下丘脑外侧核。鸡脑阳性神经元除广泛分布于脑干外,小脑、丘脑的多数核闭、下丘脑的背侧核、腹侧核和后核以及大脑纹状体等多数脑区也有一定分布。哺乳动物牛、犬和猛脑中nov mRNA阳性神经元广泛分布,在脑干、小脑、间脑和大脑都检测到强烈阳性信号。以上结果表明,在众低等脊椎动物到高等脊椎动物的进化过程中nov基因的表达也从低级中枢向高级中枢扩展,提示该基因的表达与脑的种系发育、脑功能的分化平行相关。    

10.  兴奋性氨基酸加强高原低氧大鼠下丘脑前生长抑素原mRNA的表达  被引次数:5
   阮怀珍  范晓棠  张金海  袁碧波  吴喜贵《中国应用生理学杂志》,2000年第16卷第4期
   目的和方法:应用大鼠高原低氧模型及原位杂交技术和氨基酸测定法,研究下丘脑前生长抑素原(PPS)mRNA表达和谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)含量的变化。结果:高原低氧组大鼠下丘脑Glu和Asp的含量明显增多,室周核、室旁核、弓状核PPS-mRNA阳性神经元数目显著增加;而NMDA受体拮抗抗剂氯铵酮,虽然对Glu和Asp含量无明显影响,但可使高原低氧大鼠下丘脑PPS-mRNA阳性神经元数目减少    

11.  胃扩张刺激对大鼠大脑皮层及海马CCK mRNA表达的影响  被引次数:3
   Tang M  Ni H  Xu L《Sheng li xue bao : [Acta physiologica Sinica]》,1999年第51卷第5期
   胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)是脑肠肽中的一种,被认为是饱因子。本实验采用以地高辛标记的CCK cDNA为探针的原位杂交和半定量RT-PCR技术。用水囊扩张胃作为对胃壁的机械刺激模拟食物对胃的充盈作用,观察大鼠大脑皮层和海马内含CCK神经元CCK mRNA表达的变化情况。    

12.  胎脑黑质脑内移植矫正PD鼠纹状体内脑啡肽mRNA过度表达  
   杨辉  蔡文琴  张可成《中国组织化学与细胞化学杂志》,1995年第2期
   用6-OHDA损毁大鼠一侧黑质—纹状体通路可引起PD模型鼠脑纹状体内多巴胺匿乏.同时,亦可导致脑啡肽mRNA过度表达。我们用地高辛标记的cRNA探针对纹状体内脑啡肽mRNA含量进行了斑点杂交定量研究,发现损伤侧脑啡肽mRNA含量较健侧增高80%,胎中脑移植到失神经支配的纹状体内,脑啡肽mRNA过度表达得以矫正至正常水平,说明胎多巴胺能神经元脑内移植能够调节脑啡肽基因表达,提供了移植物能与宿主发生神经整合、建立突触联系的间接证据。    

13.  青霉素诱发癫痫及耳穴电针后大鼠前脑生长抑素mRNA的变化  被引次数:1
   刘蓉予  黄显奋《中国组织化学与细胞化学杂志》,1998年第3期
   应用地高辛标记的生长抑素(SS)RNA探针原位杂交法观察大鼠在青霉素诱发的癫痫及耳穴电针抑制癫痫发作后有关的脑区中SSmRNA含量的变化。结果显示,青霉素致痫后24小时梨状皮质、额叶皮质、扣带回、隔外侧核、杏仁基底核海马CA1-CA4区和齿状回颗粒细胞层、多形层等脑区SSmRNA的表达显著增加,与正常对照组比较P<005。耳穴电针抑痫(80100HZ,6mA)后额叶皮质、杏仁基底核、海马齿状回、前梨状皮质SSmRNA的表达明显减少,P<005。提示前脑结核中的生长抑素与青霉素致痫和耳针抑痫有关。    

14.  地高辛标记寡核苷酸探针检测大鼠胰岛素mRNA  
   张远强  张舒华  刘新平  《中国组织化学与细胞化学杂志》,1995年第4期
   本实验采用地高辛标记前胰岛素寡核苷酸探针原位杂交组织化学技术,研究了Wistar大鼠胰腺组织胰岛素基因的表达。实验用Wistar大鼠5只,胰腺经4%多聚甲醛灌注固定,并在同一固定液中后固定24h,常规石蜡包埋切片。结果表明,经前胰岛素寡核苷酸探针杂交的胰腺切片中,胰岛B细胞呈蓝色。杂交反应物位于B细胞的细胞质和部分核仁中,胞核无色。胰岛其它细胞及胰腺外分泌部腺泡细胞无杂交反应物。对照切片中均无阳性信号出现。结果表明地高辛标记寡核苷酸探针不仅具备非同位素标记探针的优点而且能精确检测特异性mRNA的表达。本研究方法操作便利,可靠精确,重复性好。    

15.  两种非放射性标记方法在染色体原位杂交中敏感性的比较  
   乔旭刚 朱平《生物技术》,1995年第5卷第5期
   通过原位杂交比较了地高辛配基和生物素标记探针,检测染色体单拷贝基因的敏感性。结果表明:在打点检测条上地高辛配基可检出30fg低限探针DNA,生物素为1pg。经原位杂交地高辛配基可检测出单拷贝基因,生物素未成功。    

16.  无脊椎动物的神经元中也发现有胺肽递质共存现象  
   李继尧《生理科学进展》,1983年第2期
   过去人们一直认为,一种神经元只能释放一种神经递质。但近年来的一些研究证明,脊椎动物脑内的某些神经元除含有一种经典的神经递质外,尚含有某种脑肠肽。例如,在去甲肾上腺素能神经元内发现有生长抑素;在5-羟色胺能神经元中发现有P物质;在人和鼠脑的某些神经元中胆囊收缩素和多巴胺共存等。    

17.  缺血性肾损害时肾小球系膜细胞内皮素A受体mRNA表达的检测  
   周毅  陈淑芬《中国实验动物学报》,2000年第8卷第1期
   目的 采用夹闭双肾动脉方法建立缺血性肾损害动物模型 ,探讨缺血性肾损害时肾小球系膜细胞内皮素A受体mRNA表达的情况。方法 应用地高辛标记的ETARcDNA探针进行的原位杂交检测肾脏系膜细胞的内皮素A受体mRNA的表达 ,结果 显示缺血性肾损害组动物的肾脏系膜细胞内此素A受体mRNA表达明显高于假手术对照组 ,P <0 0 5。提示 :内皮素可能参与了该疾病的发病过程    

18.  发现有四种肽类物质共存于豚鼠小肠粘膜下神经元  
   王健平《生理科学进展》,1985年第1期
   通常认为胃肠道粘膜下神经节可能是感受胃肠粘膜刺激的感觉神经元或支配胃肠粘膜的运动神经元或兼而有之。近年来应用免疫组织化学染色技术发现:豚鼠小肠粘膜下神经节的神经细胞中含有多种脑肠肽以及合成乙酰胆碱所必需的酶的免疫反应活性,例如胆囊收缩素(CCK)、神经肽Y(NPY)、生长抑素(SOM),P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)、胆碱乙酰基转移酶(ChAT)的免疫活性。Furness等用相互间无交叉反应的高度特异性抗体同时标记豚鼠小肠粘膜下神经元中的不同抗原,再以荧光标记的高度特异性第二抗体标记第一抗体,研究了该神经胞体内各标记神经化学物质的共存情况。发现豚鼠小肠粘膜下神经节中神经元可分二大类:45%神经胞体中仅有VIP免疫反应性,主要集中在神经节中心,其神经末梢可能    

19.  热休克蛋白在高温致神经管畸形中的表达  
   于丽  管英俊  高英茂  李如江  李锋杰《中国组织化学与细胞化学杂志》,2003年第12卷第2期
   目的:检测热休克蛋白在高温致神经管畸形中的表达状况,以探讨高温致神经管畸形的机制。方法:在高温致金黄地鼠神经管畸形的动物模型上,利用免疫组织化学(SABC法)方法,检测高温致神经管畸形中,热休克蛋白(HSP70和HSP90)在神经上皮细胞及周围间充质细胞中的表达状况;同时利用地高辛标记的寡核苷酸探针进行原位杂交,检测HSP70 mRNA和HSP90 mRNA在神经上皮细胞及周围间充质细胞中的转录状况。结果:高温处理后2h,鼠胚神经上皮细胞及周围间充质细胞HSP70、HSP90的表达与正常对照组相比明显增强,8h和16h的表达达到高峰,24h后与对照组水平一致。原位杂交结果显示,高温处理后2h神经上皮细胞及周围间充质细胞中出现HSP70 mRNA及HSP90mRNA杂交阳性信号,8h阳性信号最强,16h后阳性信号减弱,至24h后未见阳性信号。结论:高温可引起神经上皮细胞及其周围间充质细胞HSP70和HSP90应激性表达,这可能是胚胎受到高温作用后发生的一种保护性反应。    

20.  无脊椎动物的神经元中也发现有胺肽递质共存现象  
   李继尧《古脊椎动物学报》,1983年第2期
   过去人们一直认为,一种神经元只能释放一种神经递质。但近年来的一些研究证明,脊椎动物脑内的某些神经元除含有一种经典的神经递质外,尚含有某种脑肠肽。例如,在去甲肾上腺素能神经元内发现有生长抑素;在5-羟色胺能神经元中发现有P物质;在人和鼠脑的某些神经元中胆囊收缩素和多巴胺共存等。这表明脊椎动物的某些神经元可以释放一种以上的神经递质。    

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