髓芯减压联合自体骨髓间充质干细胞治疗45例股骨头无菌性坏死的临床疗效分析

目的：观察髓芯减压联合自体骨髓间充质干细胞治疗45例股骨头无菌性坏死的的临床效果及安全性。方法：采取随机原则对2011年11月至2012年3月期间在我院骨科住院治疗的54例患者分成两组,对照组接受髓芯减压治疗,治疗组接受髓芯减压联合自体骨髓间充质干细胞移植治疗治疗。结果：术后随访一年,治疗组的Harris评分为（86．78±9．48）分,对照组为（71．18±8．36）分,两组相互比较差异有统计学意义（P〈0．05）;治疗组的优良率为84．38％,对照组的优良率为55．17％,治疗组的优良率明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：髓芯减压联合自体骨髓间充质干细胞移植治疗股骨头无菌性坏死效果显著,优于单纯髓芯减压治疗。     

自体外周血干细胞移植联合髓芯减压治疗早中期股骨头缺血性坏死的临床研究

目的对比研究单纯股骨头髓芯减压与联合自体外周血干细胞移植治疗早中期股骨头缺血性坏死（ANFH）的临床疗效。方法 2004年10月至2012年3月期间就诊于福建省龙岩市第一医院,经影像学检查及术后病理检查确诊为ANFH的患者90例。A组采用单纯髓芯减压共34例,男22例,女12例,年龄22~62岁（中位年龄41.5岁）。B组采用髓芯减压联合自体外周血干细胞移植（用rhG-CSF皮下注射4 d进行外周血干细胞动员,第5天分离外周造血干细胞混悬液。在髓芯减压基础上沿减压隧道注入自体外周血干细胞10~15 ml）56例,男35例,女21例,年龄21~62岁（中位年龄39岁）。按世界骨髓循环研究学会（ARCO）国际骨坏死标准：A组：Ⅰ期7髋,Ⅱ期26髋,Ⅲ期17髋;B组：Ⅰ期10髋,Ⅱ期50髋,Ⅲ期29髋。术后及随访期间进行Harris评分和疼痛视觉模拟（VAS）评分,对X线片、CT及MRI检查结果进行评估。两组Harris评分和VAS评分比较用成组t检验。结果 A组34例,B组49例随访13~89个月,平均38.5个月。术后3、6、12个月与术前的Harris评分比较有明显提高,VAS评分有明显的下降;术前、术后3个月两时间点的A、B组Harris评分比较差异无统计学意义（t=0.342、0.628,P=0.781、0.516）;术后6、12个月的B组评分优于A组（t=2.991、7.753,P=0.009、0.001）。术后12个月A、B两组T1相低信号区所占股骨头体积的比例分别为（17.24±3.71）﹪和（12.11±3.14）﹪,差异有统计学意义（t=4.360,P=0.001）。结论髓芯减压联合自体外周血干细胞移植治疗早中期ANFH,可显著减轻关节疼痛,改善股骨头血液供应,明显恢复关节功能,加速病灶区骨组织修复,有效防止股骨头进一步塌陷。     

阿司匹林对骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性脑卒中的影响研究进展

阿司匹林是缺血性脑卒中患者急性期治疗药物及卒中再发的二级预防常用药物,骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植是治疗缺血性脑血管疾病的新的新兴技术。已证实阿司匹林可抑制骨髓间充质干细胞的增殖及影响骨髓间充质干细胞的分化。本文就阿司匹林对骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性脑卒中的影响等进行综述。     

骨髓基质干细胞向成骨细胞的定向诱导分化

骨髓基质干细胞具有间充质干细胞的特性,表现为较强的增殖能力和向多种间充质细胞分化的潜能。目前已经建立了体外培养骨髓基质干细胞的方法,可定向诱导为成骨细胞。成骨细胞是骨组织形成过程中的一种重要细胞,在骨缺损的修复过程中起关键作用,特别对构建用于修复骨缺损的组织工程化骨组织来说尤其重要,但成骨分化的调控机制和应用值得进一步研究。     

CXCL12过表达促进骨髓基质干细胞整合素αv／β3介导的黏附和增殖

研究利用骨髓基质干细胞移植治疗急性心肌梗死时趋化因子CXCL12过表达对由整合素介导αv/β3的干细胞黏附和增殖过程的影响.采用重组DNA技术使得骨髓基质干细胞过表达趋化因子CXCL12,采用western blot法检测CXCL12过表达后骨髓基质干细胞整合素αv/β3表达量的变化.在体外通过黏附实验观察趋化因子CXCL12过表达对整合素介导的细胞与细胞外基质黏附过程的影响,并在心肌梗死大鼠模型中通过检测报告基因观测CXCL12对移植后整合素介导骨髓基质干细胞增殖的作用.基因重组后骨髓基质干细胞过表达了具有生物活性的趋化因子CXC12,趋化因子CXCL12过表达使骨髓基质干细胞整合素αv/β3表达明显增多,并促进了整合素介导的细胞与细胞外基质黏附.CXCL12还使细胞移植后位于梗死区的细胞数量增多.且这一作用也与整合素αv/β3有关.CXCL12过表达通过促进骨髓基质干细胞整合素αv/β3表达提高了移植干细胞黏附和增殖能力,有利于骨髓基质干细胞移植后在心肌梗死区域的生长和分化.     

骨髓间充质干细胞移植与肾脏病

骨髓间充质干细胞是目前广受关注的一群成体干细胞,具有取材容易,增殖能力强,生物学特性稳定,可以跨胚层分化,低免疫源性,参与受损组织修复等优点,随着组织工程的兴起和发展以及其自身所特有的生物学特性,人们逐渐认识到将骨髓间充质干细胞作为肾脏病移植治疗的种子细胞具有良好的应用前景。本文就骨髓间充质干细胞的生物学特性及其在肾脏病移植治疗中的进展做一综述。     

骨髓间充质干细胞移植与肾脏病

骨髓间充质干细胞是目前广受关注的一群成体干细胞,具有取材容易,增殖能力强,生物学特性稳定,可以跨胚层分化,低免疫源性,参与受损组织修复等优点,随着组织工程的兴起和发展以及其自身所特有的生物学特性,人们逐渐认识到将骨髓间充质干细胞作为肾脏病移植治疗的种子细胞具有良好的应用前景。本文就骨髓间充质干细胞的生物学特性及其在肾脏病移植治疗中的进展做一综述。     

人骨髓间充质干细胞培养方法

骨髓间充质干细胞(BMMSCs)是一种多潜能的成体干细胞,在细胞治疗和组织工程上具有广阔的应用前景。对供体年龄、分离方法、培养密度、培养基和培养基质表面性质对细胞增殖的影响进行了比较,重点阐述了用人自体血清结合多种细胞因子,替代胎牛血清培养BMMSCs的效果,转染端粒酶基因的BMMSCs的增殖能力和分化潜能,以及灌注培养反应器用于大规模培养的技术进展。     

CXCL12过表达促进骨髓基质干细胞整合素 /介导的黏附和增殖

目的 研究利用骨髓基质干细胞移植治疗急性心肌梗死时趋化因子CXCL12过表达对由整合素介导αV/β3的干细胞黏附和增殖过程的影响。方法 采用重组DNA技术使得骨髓基质干细胞过表达趋化因子CXCL12,采用Western-blot法检测CXCL12过表达后骨髓基质干细胞整合素αV/β3表达量的变化。在体外通过黏附实验观察趋化因子CXCL12过表达对整合素介导的细胞与细胞外基质黏附过程的影响,并在心肌梗死大鼠模型中通过检测报告基因观测CXCL12对移植后整合素介导骨髓基质干细胞增殖的作用。结果 基因重组后骨髓基质干细胞过表达了具有生物活性的趋化因子CXCL12,趋化因子CXCL12过表达使骨髓基质干细胞整合素αV/β3表达明显增多,并促进了整合素介导的细胞与细胞外基质黏附。CXCL12还使细胞移植后位于梗死区的细胞数量增多,且这一作用也与整合素αV/β3有关。结论CXCL12过表达通过促进骨髓基质干细胞整合素αV/β3表达提高了移植干细胞黏附和增殖能力,有利于骨髓基质干细胞移植后在心肌梗死区域的生长和分化。     

髓芯减压联合干细胞移植治疗股骨头坏死患者的临床疗效及机制研究

目的:探讨采用髓芯减压与干细胞移植联合治疗股骨头坏死患者的临床疗效及可能机制。方法:选择我院确诊并治疗的股骨头患者76例作受试者,按随机数字表法分为两组,对照组38例采用干细胞移植治疗,治疗组38例在对照组基础上联合髓芯减压疗法。观察和比较两组患者的临床疗效、髋关节Harris评分及治疗前后血清PINP(Ⅰ型前胶原氨基端前肽)、CTX(Ⅰ型胶原C端肽)、OST(骨钙素)水平的变化情况。结果:治疗组总有效率及Harris评分均显著高于对照组(P0.05);治疗组患者血清PINP、CTX、OST水平较治疗前明显下降,并显著低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:髓芯减压与干细胞移植的联合应用可提高股骨头坏死患者的临床疗效和髋关节功能,可能与其降低患者血清PINP、CTX、OST水平有关。     

非创伤性股骨头坏死的机制及早期治疗的研究进展

非创伤性股骨头坏死(NONFH)是临床常见的骨科难治性疾病之一,本文就其发病机制和临床治疗研究的相关进展和问题展开综述,旨在进一步提高对NONFH的临床认识和治疗水平。股骨头坏死的机制仍然没有统一的定论,但各种机制最终归于股骨头供血区域血液瘀滞,导致股骨头发生缺血坏死虽然目前还没有一种治疗方法达到理想的治疗效果,髓心减压仍然是应用最为广泛的早期治疗手段,各种改进手术如骨移植、钽棒移植、骨髓干细胞移植和生长因子移植是今后的主要趋势。     

骨髓干细胞移植治疗肝硬化的基础与临床研究现状

肝硬化是一种临床常见的肝病良性终末期表现。目前临床上尚缺乏有效的治疗措施。肝脏移植是最理想的治疗方法,但受供体肝脏来源限制,且费用昂贵。近年来开展的自体骨髓干细胞(BMSCs)移植治疗,为肝硬化的治疗带来了新的希望。BMSCs主要包括造型血干细胞和间充质干细胞,其具有可塑性,体外通过生长因子,体内利用特定微环境均可诱导BMSCs分化为肝前体细胞和成熟肝细胞,并明显改善肝功能。从动物实验到临床研究亦表明,BMSCs具有来源丰富、费用低廉、损伤小、自体移植不栓塞、无排斥反应等优点,为治疗肝病带来了新思路,有望成为生物人工肝的细胞来源。本文就BMSCs移植治疗肝硬化的研究现状,尤其是移植途径以及在肝脏内定居、迁移和分化机制的示踪观察方法和存在的问题作一综述,以期为从事肝病研究的同仁提供参考依据。通过对BMSCs移植从基础研究及临床应用的最新进展的描述,展示BMSCs在肝硬化治疗方面良好的治疗前景。     

Biomaterial-loaded allograft threaded cage for the treatment of femoral head osteonecrosis in a goat model

The purpose of this study was to evaluate the efficacy of core decompression with a biomaterial-loaded allograft threaded cage (ATC) for the treatment of femoral head osteonecrosis in an established goat model. First, bilateral early-stage osteonecrosis was induced. After core decompression, the remaining goats were randomly divided into three groups: Group A, the goats were left without any treatment; Group B, the goats were treated with implanting a composite of autologous bone and decalcified bone matrix (DBM); Group C, the goats were treated using insertion of ATC loaded with DBM and autogenous bone graft. Then radiographic, histological and biomechanical analysis were taken in each group at 5, 10, and 20 weeks postoperation. In Group A, the classical signs of osteonecrosis of the femoral head were identified 10 weeks after the induction. Twenty weeks later, the density, surface and biomechanical stability of the femoral head were normal in Group C, while an irregular surface and an inhomogeneous microstructure or variation of density/hardness were identified in Group B. The specimens revealed a continuous trabaecular bone structure throughout the cage and extensive bone ingrowth and remodeling in Group C, while fibrous tissue was evident in Group B. Core decompression with a biomaterial loaded ATC almost uniformly delays or arrests the progression of the disease before articular collapse, and it could help to get the balance between bone resorption and new bone formation, strengthen structural mechanics of the femoral head, provide structure support of articular cartilage.     

Human CD133-derived bone marrow stromal cells establish ectopic hematopoietic microenvironments in immunodeficient mice

Cultured adherent bone marrow stromal cells (BMSCs) are capable of forming ectopic hematopoietic microenvironments (HMEs) in immunodeficient mice. However, the cell surface phenotype of the native bone marrow stem/progenitor cell that gives rise to BMSCs that support hematopoiesis remains poorly defined. We recently reported the derivation of human BMSC-like cells (CD133BMSCs) by magnetic cell sorting against Prominin-1 (CD133), an epitope expressed by embryonic, fetal, and adult stem cells. Here we demonstrate that CD133BMSCs are capable of forming ectopic HMEs. Cultured adherent CD133BMSCs derived from sorted CD133-positive cells lacked CD133 expression, but were uniformly positive for CD146, an epitope recently described to identify self-renewing osteoprogenitor cells that could transfer the HME. CD133BMSCs were genetically-tagged by lentivirus, expanded, and seeded into HA/TCP/fibrin constructs that were implanted subcutaneously. After 60 days, CD133BMSCs produced human osteocytes, osteoblasts, adipocytes, and reticular cells that supported murine hematopoiesis. CD133BMSCs that were not transduced with lentivirus also formed HMEs. Control constructs seeded with human dermal fibroblasts formed connective tissue, but failed to form HMEs. Our data indicate that CD133 expression identifies a native human bone marrow stem/progenitor cell that gives rise to BMSCs capable of forming the HME.     

骨髓间充质干细胞在组织工程研究中的应用新进展

骨髓间充质干细胞又称为骨髓源性间充质干细胞,是指存在于骨髓基质细胞系统中的一类干细胞,具有高度稳定的体外扩增能力和多向分化潜能等特点。骨髓间充质干细胞因其取材方便,易于分离和培养,以及在适当条件下可诱导分化为皮肤、骨骼、内脏、血液、神经等多种组织细胞的独特优势,目前被广泛应用于药物开发、免疫调节、组织修复、器官重建等多个研究领域。近年来,骨髓间充质干细胞作为种子细胞在组织工程领域有着非常诱人的潜在应用前景。本文就骨髓间充质干细胞在组织工程学研究中应用的最新进展作一综述。     

SD大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及鉴定的实验研究

摘要 目的：探讨应用全骨髓贴壁法体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs)的可行性,研究其生物学特性,为骨组织工程提供种子细胞。方法：取SPF级5周龄健康SD大鼠2只,脱颈处死,分离双下肢股骨、胫骨,全骨髓贴壁法分离培养、纯化BMSCs;通过倒置显微镜观察原代、传代细胞生长情况、绘制生长、贴壁率曲线,研究其生物学特性;流式细胞仪检测表面标志物、诱导成成骨等方法进行鉴定。结果：应用全骨髓贴壁法可在体外分离出活性好、纯度高的BMSCs。倒置显微镜下可见原代细胞呈梭形、多角形,传代细胞形态均一呈纤维样;P3代BMSCs经流式细胞鉴定：CD44、CD90高表达,CD31、CD45低表达;定向诱导向成骨细胞分化,可见明显矿化结节。结论：证实应用全骨髓贴壁培养法体外可成功分离BMSCs,所分离培养、纯化的细胞生物学稳定,纯度高、活性好,具有多向分化潜能,能为骨组织工程、骨质疏松症和骨折不愈合疾病的研究提供种子细胞。     

M-CSF诱导人骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞的分子机制

本研究主要目的是明确M-CSF诱导骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞的分子机制,为临床中的肝移植和治疗肝病提供新思路。对取自于本院骨科治疗的患者的股骨骨髓间充质干细胞进行提取、分离、传代培养及鉴定。流式细胞仪检测BMSCs的表面表型。为了诱导BMSCs的肝分化,本研究将BMSCs加入到培养基中。骨髓间充质干细胞诱导21 d后,BMSCs表达了肝细胞特异性标志物a-蛋白(AFP)和细胞角蛋白18(CK18),通过免疫荧光染色证实了分化与为分化的BMSCs表达的差异性。分化的BMSCs还显示了肝细胞的体外功能特征,包括白蛋白产生、尿素分泌和糖原储存。本研究结果表明,BMSCs在M-CSF诱导下可分化为功能性肝细胞样细胞,可作为肝病治疗的细胞来源。     

Bone marrow–derived mesenchymal stem cells–derived exosomes prevent oligodendrocyte apoptosis through exosomal miR-134 by targeting caspase-8

Ischemic stroke causes severe brain damage and remains one of the leading causes of morbidity and mortality worldwide. The microRNA-134 (miR-134) is involved in regulating the process of ischemia injury in neural cells and brain with ischemia stroke. The role of miR-134 in ischemic stroke remains poorly understood. The purpose of the current study was to investigate the effect of bone marrow–derived mesenchymal stem cells (BMSCs)-derived exosomal miR-134 on rat oligodendrocytes (OLs) apoptosis and its underlying mechanism of action. The results demonstrated that levels of miR-134 in BMSCs-exosome decreased but increased incaspase-8 after oxygen-glucose deprivation (OGD) treatment. Exosomal miR-134 significantly inhibited apoptosis by decreasing caspase-8 expression and activity in OGD-treated group cultured with BMSCs-exosome and OLs. In addition, the miR-134 mimics decreased caspase-8 expression in OGD-treated OLs, whereas miR-134 inhibitors exacerbated the changes in the expression of the procaspase-8 and caspase-8 cleaved product proteins caused by OGD. The caspase-8 knockdown using caspase-8 small interfering RNA decreased OLs apoptosis, reversing the improvements that the miR-134 inhibited cells apoptosis by targeting caspase-8. Taken together, these results demonstrated that BMSCs-derived exosomes suppressed OLs apoptosis through exosomal miR-134 by negatively regulating the caspase-8-dependent apoptosis pathway and may, therefore, be a novel potential therapeutic target for ischemic stroke treatment.     

去分化脂肪细胞的研究进展

去分化脂肪(Dedifferentiated fat,DFAT)细胞是由人体内含量最丰富的成熟脂肪细胞经体外天花板法培养去分化而来。研究发现:DFAT细胞具有均一性高、对供者年龄要求较低等脂肪来源干细胞(Adipose-derived stem cells,ASCs)和骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)所不具有的优势。此外,它还具有体内外成脂、成软骨、成骨、成肌、成神经等多向分化能力以及免疫调节能力。作为具有潜力的组织工程及同种异体干细胞移植的优秀种子细胞,DFAT细胞在治疗骨缺损、神经性疾病、局部缺血性心脏病及肾脏疾病等方面均具有较好的应用前景,对其开展深入的研究具有重要的理论和实践意义。文中从免疫学性质、多向分化能力及临床应用潜力等方面对DFAT细胞的研究进展作一综述。