酪氨酸对大鼠离体颗粒细胞孕酮、雌激素和cAMP生成的影响

本实验应用培养细胞悬浮液的方法,研究了酪氨酸对经 PMSG 处理的未成熟大鼠颗粒细胞孕酮、雌激素和 cAMP 生成的影响。给30天龄未成熟雌鼠皮下注射 PMSG 100单位/只48小时后,取出卵巢,分离出排卵前卵泡中的颗粒细胞,制成细胞悬浮液。按实验要求,在细胞悬浮液中加入(1)培养液空白,(2)hCG(101U),(3)酪氨酸(20μg)和(4)α-MT(20μg)。培养45分钟后,取出一部分样品用蛋白竞争结合法测各管 cAMP 含量。培养4小时后,用放射免疫分析法测各管孕酮和雌激素含量。结果表明,hCG 和酪氨酸均可促进颗粒细胞孕酮、雌激素和 cAMP 的生成,当两者共同作用时,孕酮、雌激素和 cAMP 的生成量进一步增加。α-MT 与酪氨酸的作用相同,在α-MT 与酪氨酸共同作用时,不但未阻断酪氨酸的作用,而且α-MT 本身也表现酪氨酸样的作用,使孕酮、雌激素和 cAMP 的生成量进一步增加。本实验结果提示,酪氨酸而非其衍生物,可促进大鼠离体排卵前卵泡的颗粒细胞生成孕酮和雌激素。酪氨酸的这一作用可能是通过 cAMP 完成的。     

酪氨酸对未成年大鼠卵巢Δ~5-3β-羟类固醇脱氢酶活性的影响

利用PMSG(妊娠母马血清促性腺激素)及HCG(人羢膜促性腺激素)处理的未成年大鼠卵巢匀浆,通过测定Δ~5-3β-羟类固醇脱氢酶(HSD)活性,研究了酪氨酸影响孕酮的代谢机理。结果表明,同一浓度的酪氨酸(60微克/毫升)加到排卵后不同时间(12—72小时)的卵巢匀浆中,Δ~5-3β-HSD活性增加,并随着时间延长有逐渐增加的趋势。酪氨酸组同对照组间差异非常显著(P<0.001),不同浓度的酪氨酸(30—160微克/毫升)加到排卵后同一时间(24小时)的卵巢匀浆,也能提高Δ~5-3β-HSD活性,酪氨酸组与对照组间差异非常显著(P<0.001)。     

酪氨酸对未成年小鼠和大鼠诱发排卵和孕酮含量的影响

本实验室曾证明酪氨酸有抗hCG致孕酮生成作用,同时也发现酪氨酸对大鼠排卵前的颗粒细胞有促进cAMP和甾体激素合成作用,表明酪氨酸对卵巢有逆向的双重作用。本文观察酪氨酸对未成年小鼠和大鼠诱发排卵和血清孕酮含量的影响。结果显示酪氨酸有促进未成年小鼠和大鼠诱发排卵和提高孕酮的作用。苯丙氨酸和色氨酸无此作用。在甲状腺素、去甲肾上腺素和多巴胺等酪氨酸衍生物中,仅多巴胺与酪氨酸的作用相似。     

~3H-酪氨酸与大鼠离体黄体细胞的结合

用孕马血清促性腺激素和hCG处理25—28d龄未成年雌性大鼠,造成超排卵并形成黄体,取hCG处理后7d的黄体制备黄体细胞。将黄体细胞与~3H-酪氨酸一起孵育(24℃,45min)后,~3H-酪氨酸能与黄体细胞特异结合,~3H-酪氨酸浓度为7.5μmol/L时达到饱和,在4℃孵育10min条件下仍有~3H-酪氨酸的结合。用哇巴因抑制酪氨酸向细胞内的转运后,~3H-酪氨酸的特异结合依然存在,放线菌酮也不能影响~3H-酪氨酸结合。这些结果证明,酪氨酸能与黄体细胞特异结合,并提示酪氨酸的结合位点存在于细胞膜上。     

酪氨酸对大鼠生殖内分泌功能的影响

在假妊大鼠,口服酪氨酸可使卵巢静脉血中孕酮含量减少,子宫静脉血中前列腺素含量增加,卵巢对~(125)I-hCG 的结合力降低。在切除一侧卵巢的大鼠,口服酪氨酸可使对侧卵巢代偿性增生及子宫重量增加受抑制。同时也明显地抑制卵巢 hCG 受体功能,使卵巢对~(125)I-hCG 的结合力,hCG 受体数目和亲和力降低。本实验结果提示,酪氨酸可直接或间接作用于卵巢,抑制黄体功能,使孕酮分泌减少,从而可能具有抗生育作用。     

酪氨酸对人离体滋养层细胞孕酮与hCG分泌的影响

本文观察三种剂量(2×10~(-5)mol/L,2×10~(-4)mol/L和2×10~(-3)mol/L)的酪氮酸对离体培养的滋养层细胞孕酮及hCG分泌的影响,并对其抑制效应的机理作了初步探讨。实验结果表明,三种剂量的酪氨酸均可抑制滋养层细胞孕酮分泌(P<0.01),但是,在孕酮分泌受酪氨酸抑制的同时,未见对hCG分泌发生影响(P>0.05),进一步观察了酪氨酸对滋养层细胞3β-羟甾脱氢酶活性的影响,结果表明,酪氨酸能显著抑制3β-羟甾脱氢酶活性,提示酪氨酸对滋养层细胞孕酮生成的抑制作用与抑制3β-羟甾脱氢酶活性有关。     

大鼠黄体细胞酪氨酸含量及hCG,cAMP和孕酮对含量的影响

经PMSG-hCG处理的未成年雌性大鼠卵巢,用胶原酶-DNA酶溶液消化,制成黄体细胞悬浮液。预培育1h后,加入不同浓度的hCG、cAMP及孕酮;并在加入hCG(10mIU/ml)、cAMP(2.5mmol/L)或孕酮(1nmol/L)的同时分别加入苯丙氨酸或放线菌酮,再培育1.5h,取细胞悬浮液400μl,用薄层层析扫描技术测其酪氨酸含量。结果:黄体细胞内有一定量内源酪氨酸,hCG,cAMP和孕酮均可明显促进酪氨酸的释放(P<0.05).苯丙氨酸对酪氨酸的含量无影响。酪氨酸释放也不依赖蛋白质合成过程。     

幼年大鼠诱发排卵过程中卵巢PGS的变化及其生理作用

本实验用未年大白鼠经PMSG/hCG诱发排卵,观察了卵巢PGE_2,PGF_(2a),6-KetoPGF_(1a)和TXB_2在排卵过程中的变化,以及PGS合成抑制剂——消炎痛对大鼠排卵的抑制效应。实验结果表明:消炎痛在1mg/只的剂量下,对于大鼠体内排卵有显著的抑制作用。在hCG注射后19小时,正常组动物排卵数为14.4±4.3个/卵巢;消炎痛组排卵数为2.33±2.7个/卵巢。RIA结     

酪氨酸对hCG诱导兔离体卵泡蛋白质及RNA合成的影响

为了深入探讨酪氨酸抗hCG致孕酮生成作用的机制,本文利用~3H-亮氨酸和~3H-尿嘧啶掺和入兔离体卵泡的方法,观察了酪氨酸对蛋白质及RNA合成的影响。结果显示,酪氨酸对hCG诱导的蛋白质、RNA合成具有明显的抑制作用,但同剂量的多巴胺或苯丙氨酸却无效。酪氨酸还抑制cAMP的生成,并可拮抗外源cAMP诱导蛋白质及RNA的合成。上述结果表明,酪氨酸可通过使cAMP生成减少和进入细胞内直接发挥作用两种方式抑制hCG诱导的兔卵泡蛋白质及RNA的合成。酪氨酸的这一作用可能与其抑制孕酮生成有密切的关系。     

小鼠排卵前后卵巢纤蛋白溶酶原激活因子活性的变化

给幼龄小鼠注射PMSG刺激滤泡生长,随后注射hCG以诱发排卵。在激素处理的不同时间取出卵巢,制备卵巢匀浆液或从卵巢中分离颗粒细胞和卵丘-卵母细胞复合体,并做离体培养。样品中组织型(tPA)和尿激酶型(uPA)纤蛋白溶酶原激活因子经SDS-凝胶电泳分离,用纤蛋白铺盖技术测定。实验结果表明,注射hCG 8h后15％的受试动物排卵,而卵巢匀浆液和颗粒细胞中tPA和uPA活性分别也在hCG注射后4和8h达到高峰。排卵后酶活性下降。卵丘-卵母细胞复合体主要含tPA,注射hCG 12—24h达到高峰。上述资料证明,tPA和uPA都参入小鼠排卵过程。因为排出的卵子中仍含有大量tPA,卵细胞的tPA除参与排卵外,可能对排卵后的一些生理过程也起重要作用。     

THE KINETICS OF THE DECOMPOSITION OF PEROXIDE BY CATALASE

It has been shown that the experimental results obtained by Morgulis in a study of the decomposition of hydrogen peroxide by liver catalase at 20°C. and in the presence of an excess of a relatively high concentration of peroxide are quantitatively accounted for by the following mechanisms. 1. The rate of formation of oxygen is independent of the peroxide concentration provided this is greater than about 0.10 M. 2. The rate of decomposition of the peroxide is proportional at any time to the concentration of catalase present. 3. The catalase undergoes spontaneous monomolecular decomposition during the reaction. This inactivation is independent of the concentration of catalase and inversely proportional to the original concentration of peroxide up to 0.4 M. In very high concentrations of peroxide the inactivation rate increases. 4. The following equation can be derived from the above assumptions and has been found to fit the experiments accurately. See PDF for Equation in which x is the amount of oxygen liberated at the time t, A is the total amount of oxygen liberated (not the total amount available), and K is the inactivation constant of the enzyme.