人胚胎干细胞对A549、HepG2细胞增殖与凋亡的影响

本研究以探讨人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,h ESCs)对肿瘤细胞A549、Hep G2增殖与凋亡的影响为目的,以h ESCs、A549细胞、Hep G2细胞作为研究对象,采用transwell小室在体外分别建立h ESCs与A549、Hep G2细胞的非接触式共培养的方法,设置Co-A549、Co-Hep G2作为实验组,单独培养的A549、Hep G2细胞作为对照组,采用CCK-8法检测细胞增殖水平,Hochest33258染色和流式细胞术检测细胞的凋亡,q RT-p CR和Western blotting检测Bcl2、Bax及Caspase-3的m RNA转录水平和蛋白表达水平。CCK-8检测显示,实验组细胞的增殖受到显著抑制(p0.05),Hochest33258染色观察到实验组细胞出现核固缩、变形,流式细胞术检测到实验组细胞的凋亡率显著高于对照组(p0.05),q RT-p CR和Western blotting显示h ESCs可上调实验组细胞Bax、Caspase-3的表达,下调Bcl2的表达(p0.05)。由此我们得到人胚胎干细胞对肿瘤细胞A549、Hep G2有明显的增殖抑制作用并可诱导A549、Hep G2肿瘤细胞的凋亡的结论,为干细胞治疗肿瘤的研究奠定了实验基础。     

葛根素对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用

目的：观察葛根素对人非小细胞肺癌A549细胞生长的抑制作用及其机制。方法：体外培养人非小细胞肺癌细胞（A549）,不同浓度（60 μg/ml,120 μg/ml,240 μg/ml）葛根素处理24 h后;采用CCK-8法观察葛根素对细胞的增值抑制作用;吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）双染法及AnnexinⅤ-PI双染流式细胞术检测药物作用前后A549细胞的形态学变化及凋亡状况;Western blot法检测Apelin/APJ蛋白水平的变化。结果：CCK-8法检测结果说明葛根素能抑制A549细胞的增值,具有浓度和时间依赖关系;流式细胞术进一步证实葛根素具有诱导细胞凋亡的作用,与A549细胞组比较,葛根素各处理组Apelin/APJ蛋白水平均有不同程度下调。结论：葛根素可能通过调节Apelin/APJ蛋白的表达诱导A549细胞凋亡。     

细胞周期蛋白依赖激酶Roscovitine诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡及其机制的研究

目的：探讨细胞周期蛋白依赖激酶（CDK）抑制剂Roseovitine（Ros）诱导非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞凋亡及其作用机制。方法：以不同浓度Ros（101．1M、20yM、40μM）处理细胞24h,采用AnnexinV-PI染色以流式细胞仪检测细胞凋亡,Westernblot法检测胞浆中和线粒体促凋亡蛋白Bax和Bad的表达,流式细胞仪检测线粒体膜电位（脚）变化。结果：Ros以剂量依赖的方式诱导A549细胞凋亡,同时Bad和Bax在胞浆的含量随着Ros剂量的增加而减少,而在线粒体中却出现相反的结果,线粒体膜电位随Ros剂量的增大而降低。结论：Ros可通过促进Bax和Bad由胞浆向线粒体易位,诱导NSCLCA549细胞由线粒体途径发生凋亡。     

香鳞毛蕨苷提取物E对人肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究香鳞毛蕨苷提取物E(Fragranoside E)对人肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法:将体外培养的人肺癌A549细胞分为对照组(0.1%DMSO、100 nM紫杉醇)和实验组,通过CCK-8实验、克隆形成实验检测细胞增殖情况;检测乳酸脱氢酶(LDH)水平以探讨Fragranoside E的细胞毒性;透射电镜及流式细胞术检测A549细胞的凋亡情况。进一步采用5mM N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)预处理A549细胞2 h后,采用荧光显微镜观察细胞内ROS的释放情况。结果:CCK8及克隆形成实验结果提示Fragranoside E呈浓度和时间依赖性抑制A549细胞增殖(P0.05);≤40μM Fragranoside E处理A549细胞对其LDH的释放无显著影响(P0.05);而40μM Fragranoside E可诱导A549细胞凋亡,细胞内ROS升高,NAC(5 m M)预处理2 h后,细胞内ROS(112.6%±12.3%)较Fragranoside E处理组显著降低(P0.05)。结论:Fragranoside E能够抑制A549细胞增殖,诱导其凋亡,其抗肿瘤活性可能与细胞内ROS释放有关。     

齐墩果酸诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用机制研究

齐墩果酸(oleanolic acid,OA)是一种广泛存在于自然界中的五环三萜类天然化合物,已有研究表明OA具有抗肺癌活性,但是具体机制尚未完全阐释清楚。本研究旨在证实OA是否能够诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡,并探索该效应是否与线粒体凋亡通路相关。我们将不同浓度的OA作用于细胞后,使用MTT法检测A549细胞的生长情况。采用AV/PI法进行染色后,经流式细胞仪检测其凋亡率,同时使用Hoechst 33342染色并使用荧光显微镜观察并拍照;Westen-blotting检测OA对A549细胞的线粒体凋亡通路相关蛋白相对表达水平的影响。MTT结果显示OA能够抑制A549细胞的生长,并呈时间剂量依赖性。AV/PI法染色结果显示OA能够诱导A549细胞凋亡,亦呈时间剂量依赖性。Hoechst 33342法染色结果相似。Westen-blotting结果表明OA能够上调A549细胞线粒体凋亡通路相关蛋白Bax,t Bid,Cleaved caspase 3的相对表达水平,同时下调该通路Bcl-xl,Bcl-2的相对表达水平。以上所有的结果表明OA能够显著抑制肺癌A549细胞的生长并通过调节线粒体凋亡通路相关蛋白的表达水平而诱导其凋亡。     

华蟾素对子宫内膜癌HEC-1-B细胞株凋亡和增殖的影响

目的：探讨华蟾素对体外培养子宫内膜癌HEC-1-B细胞凋亡、增殖以及侵袭能力的影响。方法：体外培养HEC-1-B细胞,经不同浓度华蟾素（0．2mg／ml、2mg／ml和20mg／m1）干预24h后,采用MTT法观察细胞生长情况,流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell小室检测细胞体外侵袭能力。结果：华蟾素能有效抑制HEC．1．B细胞生长,诱导细胞凋亡。未经华蟾素处理的细胞凋亡率仅为2．5％,经0．2mg／ml、2mg／ml、20mg／ml的华蟾素作用24h后,细胞凋亡率分别为7．4％、44．3％和78．5％。趋势卡方检验x^2=165．4983,P〈0．0001。HEC-1-B细胞经华蟾素作用后,细胞侵袭能力降低。在高浓度时,华蟾素有可能存在细胞毒作用。结论：华蟾素能通过诱导HEC-1-B细胞凋亡,从而抑制HEC-1-B细胞生长,并且降低细胞的侵袭能力。     

内皮抑素对人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 及体外微血管 模型的作用及其可能的机制

目的：探讨内皮抑素对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）及体外微血管模型的作用及其可能的机制。方法：1．MTT法检测不同浓度（10～50μg／ml）内皮抑素作用72h和30μg／ml内皮抑素作用不同时间（24～72h）对HUVEC细胞的影响;2、电镜观察HUVEC细胞超微结构的变化;3．光镜下观察内皮抑素（30μg／ml）对体外人造血管模型的影响。结果：1．MTT检测显示,内皮抑素（20～50μg／ml）能抑制HUVEC细胞的增殖（P〈0．05,P〈0．01）,具有剂量-时间依赖性。2．电镜观察,HUVEC细胞内皮抑素作用组均出现凋亡改变。3．光镜观察,内皮抑素能抑制新生血管的形成,并能破坏新生的血管网。结论：内皮抑素能抑制人脐静脉血管内皮细胞HUVEC的增殖,并具有时间一剂量依赖性,机制可能为诱导细胞凋亡。提示,内皮抑素可能通过诱导HUVEC的凋亡抑制其增殖,并能破坏新生的血管。内皮抑素可能以此抑制机体肿瘤的生长与转移。     

川楝素诱导人肺癌A549细胞凋亡

该研究旨在探讨川楝素诱导人肺癌A549细胞凋亡作用及其作用机制。通过不同浓度的川楝素作用于A549细胞48 h后,采用MTT法检测细胞活性;光学显微镜及荧光显微镜下观察细胞形态结构;流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位(ΔΨm)和细胞周期;实时定量RTPCR和Western blot分别检测Bax、Bcl-2、Fas、Cycs(细胞色素C)和Caspase-3基因m RNA和蛋白质水平。结果显示,在一定浓度范围内,川楝素能抑制A549细胞增殖,诱导细胞凋亡,且呈剂量依赖性。川楝素作用48 h的最佳药物浓度是40μmol/L,增殖抑制率为46.73%±1.47%,细胞凋亡率为13.18%±0.41%,线粒体膜电位(ΔΨm)显著下降(P0.01),细胞阻滞于G2期和S期;Bcl-2的表达显著降低,Bax、Fas、Cycs和Caspase-3的表达显著增加(P0.01),提示川楝素可能通过上调Bax、Fas、Cycs和Caspase-3基因和下调Bcl-2基因诱导人肺癌A549细胞凋亡。     

柯里拉京对人肺癌细胞A549的抑制作用及其机制研究

该研究旨在探讨柯里拉京对人肺癌A549细胞凋亡的影响及其潜在作用机制。采用CCK-8细胞活性检测试剂盒检测柯里拉京对A549细胞活性的影响;通过流式细胞术检测细胞凋亡;JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位;免疫印迹法检测凋亡相关蛋白(bax、bcl-2、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP)的表达量;通过DCFH-DA探针标记检测细胞内ROS水平。研究结果显示,柯里拉京处理能够剂量依赖性地抑制A549细胞的活性,并通过上调bax的表达、下调bcl-2的表达,破坏线粒体膜电位,促进有活性的cleaved-caspase-3以及cleaved-PARP的形成,诱导A549细胞凋亡。活性氧清除剂NAC能够明显逆转柯里拉京诱导的细胞凋亡。因此,柯里拉京可能通过调节胞内ROS水平诱导人肺癌细胞A549发生凋亡。     

细胞周期蛋白依赖激酶Roscovitine 诱导非小细胞肺癌A549 细胞凋亡及 其机制的研究

目的:探讨细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)抑制剂Roscovitine(Ros)诱导非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞凋亡及其作用机制。方法:以不同浓度Ros(10μM、20μM、40μM)处理细胞24h,采用Annexin V-PI染色以流式细胞仪检测细胞凋亡,Westernblot法检测胞浆中和线粒体促凋亡蛋白Bax和Bad的表达,流式细胞仪检测线粒体膜电位(MMP)变化。结果:Ros以剂量依赖的方式诱导A549细胞凋亡,同时Bad和Bax在胞浆的含量随着Ros剂量的增加而减少,而在线粒体中却出现相反的结果,线粒体膜电位随Ros剂量的增大而降低。结论:Ros可通过促进Bax和Bad由胞浆向线粒体易位,诱导NSCLC A549细胞由线粒体途径发生凋亡。     

花椒挥发油对离体豚鼠气管平滑肌作用的实验研究

目的研究花椒挥发油对组胺(Histamine,His)、乙酰胆碱(Acetylcholine,Ach)诱发的豚鼠离体气管条收缩作用的影响,以及作用的量效关系,为研发平喘类中药奠定基础。方法采用Medlab生物信号采集处理系统利用定量药理分析方法分别测定:(1)His的量效曲线;(2)Ach的量效曲线;(3)不同浓度的花椒挥发油对His诱发的豚鼠离体气管条收缩的影响;(4)不同浓度花椒挥发油对Ach诱发的豚鼠离体气管条收缩的影响。结果His、Ach在体外引起了豚鼠离体气管条的浓度依赖性的收缩,其中His与Ach在10-2mol/L时均可以使气管条收缩达到最大值,花椒挥发油对His、Ach诱发的支气管收缩均有抑制作用,在花椒挥发油浓度达0.48 g/L时抑制率为49%;但对Ach诱发的支气管收缩在剂量为0.48 g/L时抑制率仅达到26%,抑制作用明显弱于His;结论花椒挥发油在体外浓度为0.08~0.48 g/L时均能有效地抑制His、Ach诱发的支气管收缩,对His诱导的豚鼠气管平滑肌收缩的抑制作用强于Ach,提示花椒挥发油对过敏性刺激诱发的哮喘有较好的抑制作用,将为开发抗过敏性哮喘疾病的中药研发奠定基础。     

星叶草

一年生小草本,高3～9cm。根直伸,支根纤细。宿存的2子叶和叶簇生于植物顶部。子叶条形或披针状条形,长4～11mm,宽0．6～2mm,无毛。叶菱状倒卵形、匙形或楔形。长0．35～2．3cm,宽0．6～2mm,具牙齿．牙齿顶端有刺状短尖,无毛,脉二叉状分枝。     

风箱果腋芽组织培养

1植物名称风箱果[Physocarpusamurensis(Maxim.)Maxim.]。2材料类别休眠期腋芽。3培养条件(1)诱导培养基:WPM+TDZ0.01mg·L-1(单位下同)+IBA1.0;(2)增殖培养基:MS+6-BA1.1+NAA1.0;(3)壮苗培养基:MS+6-BA0.6+NAA2.0;(4)生根培养基:MS+IBA0.1。以上培养基均添加0.65%琼脂和2.5%蔗糖,在高温灭菌前pH值调至5.8。培养温度为25℃,光照时间16h·d-1,光强为30￣40μmol·m-2·s-1。4生长与分化情况4.1无菌材料的获得风箱果的枝条采自黑龙江省尚志市东北林业大学帽儿山实验林场境内。在室内水培3周后,取饱满的腋芽作外植体。腋芽用70%…     

四合木的化学成分研究

从我国蒺藜科特有属植物四合木（Taraena mongolica Maxim）的全株中首次得到了五种化合物。应用光谱等检测方法,对其结构进行了鉴定。分别鉴定为：十四碳酸月桂醇酯（1）、羽扇豆醇（2）、β-谷甾醇（3）、5,7,3＇,4＇-四羟基-3-甲氧基黄酮（4）、5,7,4’-三羟基-3,3’-二甲氧基黄酮（5）。上述成分均为首次从四合木中得到。其中5,7,3’,4＇-四羟基-3-甲氧基黄酮表现出较高的抗氧化活性。     

The Xanthones of Swertia erythtrosticta Maxim

Swertia erythrosticta Maxim. (Gentianaceae) is a herb used for curing some diseases in Tibetan traditional medicine system. Eight xanthones were isolated from this species. Their structures were identified as 1,8-dihydroxy-3,7-dimethoxyxanthone(Ⅰ), 1,5,8-trihydroxy-3-methoxyxanthone (Ⅱ), 1,3,8-trihydroxy-5-methoxyxanthone (Ⅲ), 1,7,8-trihydroxy-3-methoxyxanthone (Ⅳ), 1,3,5,8-tetrahydroxyxanthone (Ⅴ), 1,3,7,8-tetrahydroxyxanthone(Ⅵ), as well as 8-O-β-D-glucopyranosyl-1, 5-dihydroxy-3 -metho xy xanthone(Ⅶ), 8-O-β-D-gl ucopyr anosyl- 1,3,5- trihydroxyxanthone(Ⅷ) by means of chemical methodes and spectral analyses.     

甘西鼠尾草一新变型

2004年8月份,我们在巴颜喀拉山南坡考察时,在四川省的壤塘县发现了甘西鼠尾草的个白花变型,生境为海拔3350m的沟谷林缘灌丛,现报道如下。     

五角枫种群表型多样性

为揭示五角枫种群的表型分化程度、变异模式及地理变异规律,以山西19个种群为研究对象,采用巢式方差分析、相关分析、聚类分析等方法从形态学角度对五角枫种群的叶片、果实、种子等23个表型性状进行了系统分析。结果表明:(1)五角枫23个表型性状中除果柄长、着生痕、种子长/宽以外,其余20个表型性状在种群间和种群内均存在显著和极显著差异。(2)19个种群的平均变异系数为18.07。叶片、果实、种子的平均表型变异系数依次为:果实19.78%叶片18.77%种子10.25%。(3)五角枫种群间表型分化系数(VST)均值为48.82%,种群内变异(51.18%)与种群间变异(48.82%)基本相当。叶片、果实、种子表型分化系数的平均值为:叶片58.08%果实41.24%种子25.87%。(4)五角枫叶片、果实和种子的信息多样性指数(H)为:叶片6.1079果实5.9118种子5.2855;多样性指数平均值(D)分别为:果实0.9967叶片0.9961种子0.9948。(5)主成分分析结果显示:五角枫种群表型多样性基本来源为:叶片贡献率果实贡献率种子贡献率。(6)五角枫表型变异呈现出以经度和纬度变异并存的趋势,少数表型性状与经度和纬度呈现显著或极显著相关。(7)利用欧氏距离对五角枫种群进行UPGMA聚类分析,将五角枫19个种群划分为两大类群。五角枫种群具有较高的表型多样性,种群间和种群内均存在丰富的表型变异,与其遗传特点和分布生境等密切相关,研究结果为今后五角枫种质资源的保护和利用奠定了基础。     

延龄草中微量元素研究

目的:通过测定延龄草中微量元素的含量,发挥延龄草的药用和食用价值.方法:采用干法灰化处理样品,用石墨炉原子吸收光谱法测定延龄草中微量元素的含量.结果:延龄草中9种微量元素含量分别是:Zn 20.00 mg/kg,Fe 95.5 mg/kg,Cu 7.5 mg/kg,Mn 11.75 mg/kg,Cd 0.02 mg/kg,Cr 0.0955 mg/kg,Co 0.0075 mg/kg,Pb 0.01175 mg/kg,Ni 0.07275mg/kg.结论:延龄草中人体必需的微量元素Zn、Fe、Mn的含量较高,有害元素Pb、Cd等的含量很低.     

蓝花侧金盏化学成分的研究

从藏药蓝花侧金盏的乙醇溶液中分离得到8个化合物,通过波谱学方法分别鉴定为三十一烷醇(1)、对甲酰基肉桂酸(2)、芹菜素(3)、木犀草素(4)、荭草苷(5)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)、异荭草苷(7)及侧金盏醇(8)。化合物1、2、4、6、7均首次从该种植物中分离得到。     

Sul Dioicismo Di Idesia Polycarpa Maxim

Summary

On the dioecism in idesia polycarpa maxim.

Idesia polycarpa Maxim. is a dioecious species, native of Japan and China. Two specimens have been studied for this research, a ♀ and a ♂ one, growing in the Botanical garden of Siena.

The female plant does not present anomalies in the sex behaviour; the male plant, on the contrary, bears occasionaly some flowers with ovaries, which exceptionally develop into fruits.

In the Botanical Garden of Pisa a case of complete sex inversion has been observed (male into female).

In both the ♀ and the ♂ the first development stage is identical and hermaphrodyte. The flower is tendentially proterandrous, unisexuality being attained only successively.

In the male flowers the pystil degenerates while the pollen mother cells undergo meiosis. The ovary ceases developing farther, at the ovule forming stage from the placentae. The only cellular line which degenerates is the epithelium, which lines the ovary inner surface and extends as far the upper surface of the stygma. The microspores tetrads form contemporarily. The tapetum is of the secretory type.

The stamens degenerates in female flowers at the moment corresponding to the passage from the vegetative to the reproductive stage; i. e. the stamens of the female flowers are not capable to carry out the meiosis. The first cellular layer to be reached by a degeneration process is the tapetum; the second is the archesporial tissue. During the degeneration of these two tissues ovules are developing. The female gamethophyte is of the monomegasporial, normal, eightnucleate type. The fruits born by the female plant are roundish, with 8–30 fertile seeds and 50–65 sterile ones. Thè fruits which are exceptionally born by the male plant are bigger, pear-shaped, and countain 20–40 fertile seeds and 65–85 sterile ones.

The epithelium lining the ovaries undergoes total degeneration in normal male flowers; a partial one in the occasional male flowers which have more or less developed pistils. When only the stygma epithelium degenerates, the ovary produces a higher number of ovules even through the whole style region, so that a style does not form and the ovary does not shut, giving a pear-haped fruit.

A higher number of seeds are therefore produced by such an ovary, not only because the placentae go on producing ovules for a longer period, but because also their stylar region is active in this process. It is evident then, that the stigma plays a very important role in the normal closing of the ovary.

In the cases of partial degeneration, ovules remain vital only where the corresponding epithelium is unaltered. This shows that the epithelium has a great importance in the ovule producing phase of the placentae.

Everything seems to point out that the anthers degeneration is autonomous, owing to its own incapacity to undergo meiosis. On the contrary the suppression of the ovary in the male flower is not autonomous and does not occur in a particular moment of the ovary development, but it coincides with microsporogenesis. The suppressor of the ♀ sex therefore acts through the opposite sex. In a male plant where the anthers happen to degenerate, pystils develop in various degree, even completely.

The flowers of the female plant reache the microsporogenesis stadium about 15 days later than those of the male. The author suggests that this delay may be responsible for the realization of the female sex, checking the normal development of the anthers, probably under the influence of environmental factors. On this base he has tried to explain anomalies in male flowers.