双梭孢虫草无性型的鉴定

从贵州省贵阳市黔灵山采集分别寄生于不同刺蛾茧上,宏观特征呈简单和分枝的双棱孢虫草(Cordyceps bifusispora Eriksson)。经对子囊孢子诱发微循环产孢研究确证,双梭孢虫草的无性型为隔梭孢属(Septofusidium)一新种,双梭隔梭孢(Septofusidiumbifusisporum Liu,Liang & Liu Sp.nov.)。     

安徽的虫草及其相关真菌Ⅰ.

报道疣孢虫草Cordyceps phymatospora为新种;球孢虫草C.bassiana及其无性型Beauveria bassiana,长座虫草C.longissima及其无性型Hirsutella longissima,台湾虫草C.formosana及其无性型Hirsutella so.,拟细虫草C.gracilioides和丝虫草C.filiformis等19种虫草及其部分相关真菌。模式标本保存在安徽农业大学虫生菌研究中心（RCEFAAU)。     

宽阔水自然保护区的虫草及其相关真菌Ⅰ.

本文报道采自贵州省宽阔水自然保护区的9种虫草,它们是多壳虫草新种(Cordyceps polycarpica Liang & Liu Sp.nov.),鼠尾虫草新种(Cordyceps musicaudata Liang et Liu sp.nov.),针孢虫草(Cordyceps acicularis Rev.ex Berk.),罗伯茨虫草(Cordyceps robertsii(Hook.)Gray),下垂虫草(Cordyceps nutans Pat.),沫蝉虫草(Cordyceps tricentri Yasuda),丝虫草(Cordyceps filiformis Moureau),泽地虫草(Cordyceps paludosa Mains)和球头虫草[Cordyceps sphecocephala(K1.)Sacc.]。     

宽阔水自然保护区的虫草及其相关真菌Ⅱ．

采自贵州省宽阔水自然保护区的另6种虫草,它们是娄山虫草新种（CordycepsloushanensisLiang&Liusp.nov.）,绿核虫草新种（CordycepsaeruginosclerotaLiang&Liusp.nov.）,拟暗绿虫草（cordycepspseudoatrovirensKob.&Shim.）,布氏虫草（CordycepsbrongniartiiShimazu）,金针虫虫草（CordycepsagriotaKawam）,和幼虫虫草［Cordycepslarvarum（Westwood）Olliff］。还报道了多颈被毛孢（HirsutellapolycollutaLiang）,云南被毛孢丝梗新变种（HirsutellayunnanensisvartenuisynnemiLiangetLiuvar.nov.）,巨人被毛孢（HirsutellgiganteaPetch）和枝多头霉［Polycephalomycesramosum（Peck）Mains］等几种束梗孢科的虫生真菌,及娄山拟青霉新种（PaecilomycesloushanensisLiang&Liusp.nov.）。     

人工栽培蛹虫草的病原真菌

蛹虫草规模化栽培过程中,真菌病害普遍发生且危害严重。本研究对人工栽培蛹虫草中真菌病害进行调研,对病原真菌进行分离、纯化、鉴定及致病性检验,并分析病害发生的特点。结果发现引起蛹虫草病害的病原真菌主要有虫草生齿梗孢、产扁虫菌素单端孢、镰刀菌、裂褶菌、哈茨木霉、淡紫拟青霉、稻绿核菌、粉红枝穗霉、卵孢单端孢、扩展青霉、黄曲霉和黑曲霉。其中虫草生齿梗孢为引起蛹虫草侵染性病害的主要病原真菌。虫草生齿梗孢、产扁虫菌素单端孢、镰刀菌、裂褶菌和哈茨木霉主要为害蛹虫草子实体;淡紫拟青霉、稻绿核菌、粉红枝穗霉、卵孢单端孢、扩展青霉、黄曲霉和黑曲霉主要为害栽培料与蛹虫草菌丝体。镰刀菌、裂褶菌、哈茨木霉、淡紫拟青霉、稻绿核菌和粉红枝穗霉为引起蛹虫草病害的首次报道。本研究为蛹虫草病害防控奠定基础,以促进产业健康发展。     

安徽的虫草及其相关真菌I.

报道疣孢虫草Cordyceps phymatospora为新种;球孢虫草C. bassiana 及其无性型Beauveria bassiana, 长座虫草C. longissima 及其无性型 Hirsutella longissima, 台湾虫草C. formosana 及其无性型 Hirsutella sp., 拟细虫草C. gracilioides和丝虫草C. filiformis 等19种虫草及其部分相关真菌。模式标本保存在安徽农业大学虫生菌研究中心(RCEFAAU)。     

峨眉山自然保护区的虫草及其它昆虫病原真菌Ⅰ.

采自四川省峨眉山自然保护区的虫草及其相关昆虫病原真菌,其中除有常见的蛹虫草Cordycepsmilitaris（Vuill．）Fr,粉被虫草（CordycepspruinosaPetch）,蝉拟青霉Paecilomycescicadae（Miquel）Samson,球孢白僵菌Beauveriabassiana（Bals．）Vuill等昆虫病原真菌外,将主要描述峨眉虫草新种（CordycepsemeiensisA.Y.LiuetLiangsp.nov.）,龙洞虫草新种（CordycepslongdongensisA.Y.LiuetLiangspnov．）,暗绿虫草新记录种（CordycepsatrovirensKob．etShim．）和蛹虫草球头变种新记录种Cordycepsmilitarisvar.sphaerocephala（Schw）Fr．等几种虫草菌。     

高雄山虫草及其细脚拟青霉无性型

报道采自安徽省天堂寨自然保护区的高雄山虫草Cordyceps takaomontana及其无性型细脚拟青霉Paecilomyces tenuipes ,应用单子囊孢子分离鉴定和微循环产孢的方法确证了两者的对应关系,并修订了高雄山虫草的原始描述。双梭孢虫草C．bifusispora可能为高雄山虫草的同物异名。同时采集的具数个红色子座且有双梭形子囊孢子的虫草不是同一个种。     

下垂虫草的重寄生现象及重寄生菌的鉴定

在安徽省岳西县鹞落坪自然保护区,发现了1种寄生于下垂虫草(Ophiocordyceps nutans)的重寄生菌。通过形态特征观察和ITS序列分子生物学分析,将其鉴定为枝多头霉(Polycephalomyces ramosus)。其孢梗束着生于下垂虫草子实体的可孕部,顶部膨大呈球形。本种具有产生单个卵形的A型分生孢子的顶侧生排列的A型瓶梗和能形成分生孢子链的B型瓶梗,并在培养基上的气生菌丝和孢梗束的柄部都观察到梭形、链生的B型分生孢子。GenBank中相关种的ITS序列与拉丁名可能有误。     

宽阔水自然保护区的虫革及其相关真菌I.

本文报道采自贵州省宽阔水自然保护区的9种虫革,它们是多壳虫革新种(Cordyceps polycarpica Liang ＆ Liu sp．nov．),鼠尾虫革新种(Cordyceps musicaudata Liang et Liu sp．nov．),针孢虫草(Cordyceps acicularis Rev．Ex Berk．),罗伯茨虫草(Cordyceps robermii (Hook．)Gray),下垂虫草(Cordyceps Bugans Pat．),沫蝉虫草(Cordyceps tricentri Yasuda),丝虫草 (Cordyceps filiformisMoureau), 泽地虫草 (Cordyceps paludosa Mains)和球头虫草[Cordyceps sphecocephala (Kl.) Sacc.]。     

滇西北地区冬虫夏草和阔孢虫草的遗传分化研究

应用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对来自云南西北部高黎贡山和丽江玉龙雪山的6个冬虫夏草Cordycepssinensis（Berk．）Sacc．,来自德钦地区三个地方的8个阔孢虫草C.crassisporaZang,YangetLi以及来自云南昆明的一个蛹虫草C.militaris（Vuill）Fr．进行分析。18个随机引物获得的RAPD谱带清晰并呈现多态。遗传距离分析表明,冬虫夏草／阔孢虫草与蛹虫草之间存在显著的遗传差异。冬虫夏草与阔孢虫草之间的遗传差异较为明显。在同种虫草个体中,来自同一地方的样本间遗传差异较小,不同地方的样本间遗传差异较大。说明云南虫草的不同地理群体间存在遗传分化。应用UPGMA和NJ法构建的分子系统树将来自不同地方的冬虫夏草及阔孢虫草分别聚在一起,提示RAPD标记在虫草群体中有显著的地区特异性。RAPD作为有效的遗传标记,可在分子水平上研究虫草属的遗传分化、起源和系统演化等。     

两种虫草无性型的微循环产孢确证

从贵阳地区采得两种虫草,古厄虫草Cordycepsgunnii（Bark．）Berk．和布氏虫草CordycepsbrongniartiiShimazu。经诱发它们子囊孢子的微循环产孢再次确证了古尼虫草的无性型是古尼拟青霉PaecilomycesgunniiLiang,布氏虫草的无性型是布氏白僵菌Beauveriabrongniartii（Sacc．）Peteh。     

宽阔水自然保护区的虫草及其相关真菌I.

本文报道采用贵州省宽阔水自然保护区的９种虫草,它们是多壳虫草新咱（ＣｏｒｄｙｃｅｐｓｐｏｌｙｃａｒｐｉｃａＬｉａｎｇ＆Ｌｉｕｓｐ．ｎｏｖ）,鼠尾虫草新种（ＣｏｒｄｙｃｅｐｓｍｕｓｉｃａｕｄａｔａＬｉａｎｇｅｔＬｉｕｓｐ．ｎｏｖ）针孢虫草（ＣｏｒｄｙｃｅｐｓａｃｉｃｕｌａｒｉｓＲｅｖ．ｅｘＢｅｒｋ．）罗伯茨虫草（Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｒｏｂｅｒｔｓｉｉ（Ｈｏｏｋ）,Ｇｒａｙ）下垂虫草（Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ     

两种虫草无性型的微循环产孢确证

从贵阳地区采得两种虫草,古尼虫划Ｂｅｒｋ．和布氏虫草Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｂｒｏｎｇｎｉａｒｔｉｉ Ｓｈｉｍａｚｕ。经诱发它们子囊孢子的微循环产孢再次确证了古尼虫草无性型是经拟青霉Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｇｕｎｎｉｉ Ｌｉａｎｇ,布氏虫草的无性型是布氏白僵菌ＢｅａｕｖｅｒｉａｂｒｏｎｇｎｉａｒｔｉｉＰｅｔｃｈ。     

蛹虫草病原真菌虫草生齿梗孢Calcarisporium cordycipiticola的生物学特性研究

蛹虫草已经成为我国乃至东南亚地区极其重要的食药用真菌,虽然其子实体已经实现规模化生产,但在产业发展中遇到许多问题,真菌病害为其中之一,如引起蛹虫草“白毛病”病害的虫草生齿梗孢Calcarisporium cordycipiticola。本研究以虫草生齿梗孢为对象,研究了其生物学特性、发病特性及侵染特点。结果表明：该病原菌菌丝分枝较多,短时间内产生大量分生孢子;最适生长温度为25℃,此温度有利于该病害快速传播;其分生孢子比蛹虫草分生孢子耐紫外能力强。栽培过程中该病害多发生在蛹虫草生长发育后期,可以侵染培养基表面、子实体底部、中部和顶端等各个部位。人工接种发现该病原菌可以侵染蛹虫草生长发育的任意阶段,后期子实体被白毛覆盖。对峙实验发现虫草生齿梗孢菌丝逐渐生长到蛹虫草菌丝上,但未发现两菌丝互相缠绕的现象。对该病原菌基本生物学研究,将为建立该病害的早期检测及预防方法提供依据。     

滇西北地区冬虫夏草和阔孢虫草的遗传分化研究*

应用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对来自云南西北部高黎贡山和丽江玉龙雪山的6个冬虫夏草Cordycepssinensis（Berk．）Sacc．,来自德钦地区三个地方的8个阔孢虫草C.crassisporaZang,YangetLi以及来自云南昆明的一个蛹虫草C.militaris（Vuill）Fr．进行分析。18个随机引物获得的RAPD谱带清晰并呈现多态。遗传距离分析表明,冬虫夏草／阔孢虫草与蛹虫草之间存在显著的遗传差异。冬虫夏草与阔孢虫草之间的遗传差异较为明显。在同种虫草个体中,来自同一地方的样本间遗传差异较小,不同地方的样本间遗传差异较大。说明云南虫草的不同地理群体间存在遗传分化。应用UPGMA和NJ法构建的分子系统树将来自不同地方的冬虫夏草及阔孢虫草分别聚在一起,提示RAPD标记在虫草群体中有显著的地区特异性。RAPD作为有效的遗传标记,可在分子水平上研究虫草属的遗传分化、起源和系统演化等。     

4种虫草相关真菌菌丝体粗多糖的生物活性评价

本研究以细脚棒束孢、蛹虫草、蝉棒束孢和球孢白僵菌的菌丝体粗多糖为对象,分析4种虫草相关真菌菌丝体粗多糖含量与生物量的相关性,并进一步对其抗氧化能力和抗肿瘤活力进行评价。液体发酵结果表明,蝉棒束孢MF12、MF13和蛹虫草MF27、MF1的菌丝体粗多糖含量（>40mg/g）显著高于其他菌株,蝉棒束孢MF11、MF13和蛹虫草MF27菌丝体生物量（>12g/L）显著高于其他菌株,但相关性分析表明,4种虫草相关真菌10个菌株菌丝体的多糖含量与生物量之间没有显著相关性;抗氧化活性表明,蛹虫草MF27、MF1和球孢白僵菌MF10菌丝体粗多糖具有良好的体外抗氧化活性,其EC₅₀均小于0.9mg/mL;抗肿瘤活性表明,蛹虫草MF1、MF28、MF27和球孢白僵菌MF10菌丝体粗多糖在体外能有效抑制HepG-2细胞增殖,其IC₅₀均小于1.5mg/mL。综上,蛹虫草MF27、MF1和球孢白僵菌MF10虫草菌株具有良好的开发和应用潜力。     

高雄山虫草及其细脚拟青霉无性型

报道采自安徽省天堂寨自然保护区的高雄山虫草Cordyceps takaomontana及其无性型细脚拟青霉Paecilomyces tenuipes,应用单子囊孢子分离鉴定和微循环产孢的方法确证了两者的对应关系,并修订了高雄山虫草的原始描述。双梭孢虫草C．Bifusispora可能为高雄山虫草的同物异名。同时采集的具数个红色子座且有双梭形子囊孢子的虫草不是同一个种。     

丝虫草及其无性型关系的分子确证

目的对丝虫草（Ophiocordyceps filiform is）及从子囊孢子分离所得的无性型进行测序和比较分析,确证二者之间的对应关系。方法采用PCR技术,以rDNA-ITS区为分子指标。结果系统进化树显示丝虫草的无性型归为被毛孢属较为合理,同时通过形态特征比较的结果表明,其无性型为荔波被毛孢（Hirsutella liboensis）。结论本研究首次确立了丝虫草的有性型与无性型的对应关系,并且成功培育出了与天然丝虫草相同的虫草子实体。     

蛹虫草表型多态性对子实体产生及虫草菌素的影响

为选育高产子实体和虫草菌素的蛹虫草菌株,从野生蛹虫草中分离单孢子并进行分型,之后进行产子实体实验;同时对蛹虫草子实体进行了产孢结构的观察,并用高效液相色谱仪检测了子实体和培养基中的虫草菌素。结果表明,菌落背面颜色为橙铬色的菌株容易产生子实体;出发(原代)菌株所产子实体在形态上更接近野生蛹虫草,而角变株的子实体畸形;出发菌株产子实体能力要比该菌株未发生角变部分分离株和角变部分分离株都强。在虫草菌素的产量上也以出发菌株为高,表明表型多态性对蛹虫草产子实体和虫草菌素有很大的影响。这对于优势菌种的筛选和生产实践有借鉴意义。