不同剂量甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠早期肺损伤干预研究

目的:探讨不同剂量的甲泼尼龙(Methylprednisolone,MPS)对急性百草枯(paraquat,PQ)中毒大鼠早期肺损伤的疗效。方法:采用腹腔注射20%的PQ溶液制作大鼠急性PQ中毒的模型,随机均分为五组,正常对照组(A组)、染毒组(B组)、5mg/kg甲泼尼龙干预组(C组)、15mg/kg甲泼尼龙干预组(D组)、30mg/kg甲泼尼龙干预组(E组)。分三个不同时间点(24、72、168h)处死大鼠(每组每时间点6只)。观察各时间点大体标本,组织病理、肺系数和氧合指数。结果:光镜下肺组织病理学观察,与B组比较C、D、E组大鼠肺的病理学改变,肺泡腔内出血、渗出,炎性细胞浸润、肺泡隔炎性细胞浸润相对较轻,其中以C、E组减轻最为明显。在各组相同时间点肺系数:在三个时间点的值均比B组低(P<0.05),其中E组在24h、72h时间点上与C、D组有显著差异(P<0.05)。C、D、E组与B组的氧合指数的比较各个时间点上均与B组有差异(P<0.05),三组之间相互无明显差异。结论:本实验结果显示甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠的肺损伤具有保护作用,且30mg/kg甲泼尼龙组要优于5mg/kg、15mg/kg甲泼尼龙组。     

不同剂量甲泼尼龙对大鼠急性百草枯中毒肾脏的影响

目的:观察不同剂量甲泼尼龙治疗大鼠百草枯中毒肾脏损伤的疗效。方法:将120只Wistar大鼠随机分为五组,空白组,染毒组和干预组(根据甲泼尼龙剂量不同分为三组),除空白组外,均予百草枯(22mg/kg)稀释后腹腔注射,2h后依照组别、体重注射甲泼尼龙,在第1、3、7天共3个时间点,按抽签法处死实验对象6只获取标本,观察肾功能和病理变化。结果:各组血尿素氮(P=0.001<0.05)和肌酐(P=0.01<0.05)差异有统计学意义,干预组中5mg/kg甲泼尼龙组同染毒组比较差异有统计学意义。不同时间点血尿素氮(P=0.007<0.05)和肌酐(P=0.016<0.05)差异有统计学意义,其中第七天明显低于第一、三天。病理评分各组(P=0.21>0.05)差异无统计学意义。讨论:早期应用糖皮质激素治疗PQ中毒大鼠,可以显著减轻PQ中毒所致的肾损伤程度,改善肾功能,尤其小剂量改善显著,传统的大剂量糖皮质激素冲击治疗不值的推崇。     

甘草酸二铵对百草枯致急性肾损伤大鼠IL-17表达的影响

目的探讨甘草酸二铵(DG)对百草枯(PQ)中毒致急性肾损伤大鼠的保护作用及其可能机制。方法将50只SD大鼠按随机数字表法分为模型组(PQ组,n=20)、空白对照组(NS组,n=10)和干预组(DG组,n=20),PQ组和DG组大鼠给予PQ 100mg/kg一次性灌胃,NS组大鼠则给予等量生理盐水灌胃。DG组大鼠灌胃后立即给予甘草酸二铵50mg/kg于腹腔注射,每24h重复给药1次,直至72h后处死大鼠。取大鼠腹主动脉血,评估肾功能;病理学观察大鼠肾组织形态学改变情况,ELISA检测血清和肾组织IL-17及IL-16的含量。结果 HE染色结果显示,NS组大鼠肾组织结构正常;PQ染毒组大鼠可见肾小管管腔狭窄,甚至管腔闭锁,间质充血,细胞核固缩,细胞结构消失,肾小球结构紊乱;DG干预组大鼠肾组织病理改变较PQ染毒组大鼠明显减轻。肾功能结果显示,DG组大鼠血清Cr、BUN的水平明显低于PQ组(P0.01),但显著高于NS组(P0.01)。Elisa结果显示,DG组大鼠血清和肾组织中IL-6和IL-17的含量明显低于PQ组(P0.05),但显著高于NS组(P0.05)。结论甘草酸二铵可以减轻百草枯中毒大鼠的急性肾损伤,其机制可能与降低血清和肾组织中IL-6和IL-17的表达水平相关。     

不同剂量甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠早期肺损伤干预研究

目的：探讨不同剂量的甲泼尼龙（Methylprednisolone,MPS）对急性百草枯（paraquat,PQ）中毒大鼠早期肺损伤的疗效。方法：采用腹腔注射20％的PQ溶液制作大鼠急性PQ中毒的模型,随机均分为五组,正常对照组（A组）、染毒组（B组）、5mg／kg甲泼尼龙干预组（C组）、15mg／kg甲泼尼龙干预组（D组）、30mg／kg甲泼尼龙干预组（E组）。分三个不同时间点（24、72、168h）处死大鼠（每组每时间点6只）。观察各时间点大体标本,组织病理、肺系数和氧合指数。结果：光镜下肺组织病理学观察,与B组比较C、D、E组大鼠肺的病理学改变,肺泡腔内出血、渗出,炎性细胞浸润、肺泡隔炎性细胞浸润相对较轻,其中以C、E组减轻最为明显。在各组相同时间点肺系数：在三个时间点的值均比B组低（P〈0．05）,其中E组在24h、72h时间点上与C、D组有显著差异（P〈0．05）。C、D、E组与B组的氧合指数的比较各个时间点上均与B组有差异（P〈0．05）,三组之间相互无明显差异。结论：本实验结果显示甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠的肺损伤具有保护作用,且30mg／kg甲泼尼龙组要优于5mg／kg、15mg／kg甲泼尼龙组。     

不同剂量甲泼尼龙对大鼠急性百草枯中毒肾脏的影响

目的：观察不同剂量甲泼尼龙治疗大鼠百草枯中毒肾脏损伤的疗效。方法：将120只Wistar大鼠随机分为五组,空白组,染毒组和干预组（根据甲泼尼龙剂量不同分为三组）,除空白组外,均予百草枯（22mg／kg）稀释后腹腔注射,2h后依照组别、体重注射甲泼尼龙,在第1、3、7天共3个时间点,按抽签法处死实验对象6只获取标本,观察肾功能和病理变化。结果：各组血尿素氮（P=0．001〈0．05）和肌酐（P=0．01〈0．05）差异有统计学意义,干预组中5mg／kg甲泼尼龙组同染毒组比较差异有统计学意义。不同时间点血尿素氮（P=0．007〈0．05）和肌酐（P=0．016〈0．05）差异有统计学意义,其中第七天明显低于第一、三天。病理评分各组（P=O．21〉0．05）差异无统计学意义。讨论：早期应用糖皮质激素治疗PQ中毒大鼠,可以显著减轻PQ中毒所致的肾损伤程度,改善肾功能,尤其小剂量改善显著,传统的大剂量糖皮质激素冲击治疗不值的推崇。     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-表达和炎症细胞浸润的影响

目的观察霉酚酸酯(MMF)对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1表达和炎症细胞浸润的影响,并探讨其对肾脏的保护作用及机制。方法SD大鼠随机分为三组:对照组(C组)、糖尿病组(D组)和糖尿病治疗组(M组,20mg.kg-1.d-1)。大鼠单侧肾脏切除后,腹腔注射链脲菌素(STZ)成糖尿病模型,对照组仅注射等量缓冲液。观察12周后,检测大鼠血糖(BG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、肾脏肥大指数(肾重KW/体重BW)、肌酐清除率(Ccr)和24小时尿蛋白(24Upro)。肾组织做常规光镜和电镜检查,观察组织的形态结构。用免疫组织化学方法检测肾组织中巨噬细胞抗原(CD68)和增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达。用半定量RT-PCR的方法检测肾组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的mRNA的表达。结果与对照组相比,糖尿病组大鼠BG、KW/BW、24Upro、BUN、Scr、Ccr均显著上升(P<0.05或0.01);肾小球系膜区相对面积和肾小球基底膜厚度均显著增加(P<0.01);肾组织内CD68和PCNA的蛋白质表达和MCP-1的mRNA表达均显著上调(P<0.05或0.01)。在糖尿病治疗组,上述指标除血糖外都被显著抑制(P<0.05或0.01)。结论在糖尿病大鼠模型中,MMF能减少尿蛋白,对糖尿病肾病有保护作用,其机制可能与其抑制炎症因子-MCP-1的表达,下调CD68和PCNA的水平,减少肾组织单核/巨噬细胞的聚集有关。     

TLR2促进大鼠肾缺血再灌注损伤中的炎症反应和氧化应激

目的:探究肾缺血再灌注损伤对Toll样受体2(Toll-like receptors 2, TLR2)信号路径的影响,以及TLR2在肾缺血灌注中的作用。方法:将21只Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham)、肾缺血再灌注模型组(I/R)和T2.5处理组(T2.5)。缺血再灌注24小时后,采集心脏血和左肾组织。对肾组织进行病理学分析,采用试剂盒检测血清肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN)水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹分析(Western blot)检测肾组织炎症和氧化应激变化。结果:与假手术组相比,模型组大鼠肾组织出现明显损伤,T2.5处理能有效改善肾组织损伤,差异具有统计学意义(P0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠血清Cr、BUN水平显著上升,而T2.5能显著抑制血清Cr、BUN升高、减轻肾损伤(P0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠肾组织TLR2、TLR4相对表达量显著上升,T2.5能显著抑制肾组织TLR2、TLR4的升高,调节TLR信号通路(P0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠的NF-k B表达及磷酸化水平显著上升(P0.05),T2.5能够显著下调I/R大鼠的NF-kB磷酸化水平(P0.05),对NF-kB的表达则无明显影响(P0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠肾组织中促炎因子IL-6、IL-1β和TNF-α的浓度均显著上升(P0.05),T2.5能通过显著下调IL-6和IL-1β水平来改善I/R大鼠的炎症水平(P0.05),但对TNF-α的水平无明显影响(P0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠的SOD活力显著下降,T2.5能显著逆转该下降趋势(P0.05);而模型组大鼠的MDA活力显著上升(P0.05),T2.5处理对I/R大鼠的MDA活力无明显影响(P0.05)。结论:TLR2在缺血再灌注损伤中促进了炎症反应和氧化应激,其机制与激活TLR信号路径,促进NF-kB磷酸化,进一步调节促炎因子的释放和抗氧化酶的活性有关。     

大黄治疗急性百草枯中毒的作用研究

目的:通过观察PQ中毒患者SOD、TNF-α、IL-6、PaO2、PaCO2、BUN和Cr水平,及血浆PQ浓度的变化,旨在探讨大黄在治疗PQ中毒中的作用。方法:36例急性百草枯中毒患者随机分为对照组(n=15)和治疗组(n=21),所有患者均给予常规治疗,对照组应用甘露醇导泻,治疗组应用生大黄混悬液导泻,采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测所有患者血清SOD、TNF-α、IL-6水平,高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定患者血浆PQ浓度,并测定PaO2、PaCO2、BUN和Cr。结果:治疗组患者第1、3、7天PaO2、SOD水平显著高于对照组,PaCO2、BUN、Cr、TNF-α、IL-6水平和PQ浓度亦较对照组均显著降低(P0.05)。结论:大黄可降低PQ中毒患者血中PQ浓度,抑制TNF-α、IL-6的表达,明显升高SOD的水平,改善PQ中毒患者肺、肾功能。     

热习服对大鼠肾脏促红细胞生成素的影响

目的:探讨热习服对大鼠肾脏促红细胞生成素的影响.方法:雄性SD大鼠21只,按体重配对随机分为对照组、单次高温暴露组(高温组)和热习服组,每组7只,各组在各自的实验条件下进行10天,对照组大鼠第11天留取肾脏组织标本;高温组和热习服组第11天进行相同条件的标准热负荷实验后留取肾脏组织标本.采用用酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定肾脏组织中促红细胞生成素(Epo)含量,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测肾脏促红细胞生成素mRNA的表达,Western blot技术检测肾脏组织中促红细胞生成素蛋白表达水平的变化.结果:高温组与热习服大鼠肾脏促红细胞生成素水平明显高于对照大鼠(p＜0.05).热习服与高温组大鼠肾脏促红细胞生成素水平无明显差别.经RT-PCR检测,与对照组相比,高温组肾组织Epo mRNA表达显著增强(P＜0.05),而热习服组较高温组明显降低(P＜0.05),但仍然明显高于对照组的水平.Western blot实验中对照大鼠、高温组与热习服大鼠肾脏组织均有明显的Epo蛋白表达.与对照组相比,高温组Epo表达显著增强(P＜0.01),而热习服组较高温组明显降低(P＜0.05),但高于对照组的水平.结论:热习服后大鼠肾脏组织中促红细胞生成素含量明显升高,大鼠肾脏组织中促红细胞生成素mRNA与蛋白的表达均明显增强.提示热习服能显著提高肾脏Epo的表达水平,热习服后红细胞代谢变化可能与Epo水平提高有关.     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1表达和炎症细胞浸润的影响

目的观察霉酚酸酯(MMF)对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1表达和炎症细胞浸润的影响,并探讨其对肾脏的保护作用及机制。方法SD大鼠随机分为三组:对照组(C组)、糖尿病组(D组)和糖尿病治疗组(M组,20mg.kg-1.d-1)。大鼠单侧肾脏切除后,腹腔注射链脲菌素(STZ)成糖尿病模型,对照组仅注射等量缓冲液。观察12周后,检测大鼠血糖(BG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、肾脏肥大指数(肾重KW/体重BW)、肌酐清除率(Ccr)和24小时尿蛋白(24Upro)。肾组织做常规光镜和电镜检查,观察组织的形态结构。用免疫组织化学方法检测肾组织中巨噬细胞抗原(CD68)和增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达。用半定量RT-PCR的方法检测肾组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的mRNA的表达。结果与对照组相比,糖尿病组大鼠BG、KW/BW、24Upro、BUN、Scr、Ccr均显著上升(P<0.05或0.01);肾小球系膜区相对面积和肾小球基底膜厚度均显著增加(P<0.01);肾组织内CD68和PCNA的蛋白质表达和MCP-1的mRNA表达均显著上调(P<0.05或0.01)。在糖尿病治疗组,上述指标除血糖外都被显著抑制(P<0.05或0.01)。结论在糖尿病大鼠模型中,MMF能减少尿蛋白,对糖尿病肾病有保护作用,其机制可能与其抑制炎症因子-MCP-1的表达,下调CD68和PCNA的水平,减少肾组织单核/巨噬细胞的聚集有关。