婴幼儿粪便中双歧杆菌的分离及其菌株特性研究

为筛选具有潜在益生功能的双歧杆菌,本研究采用改良MRS培养基,从婴幼儿粪便中分离到5株菌株:AR499,AR667,AR668,AR669和AR610。通过16S r DNA测序分别鉴定为两歧双歧杆菌,短双歧杆菌,动物双歧杆菌,长双歧杆菌和假小链双歧杆菌。对其耐酸耐胆盐能力和黏附性能进行测试,结果表明,菌株AR499耐酸性较好,菌株AR610有较强的耐胆盐能力,菌株AR499的自动聚集能力和细胞表面疏水性都较高。实验表明,菌株AR499可作为一株耐受性和黏附性能较好的益生菌进一步深入研究,以期应用于优良双歧杆菌产品的开发。     

猪源乳酸菌的分离、鉴定及其生物学特性

【目的】将分离自猪肠道粘膜、食糜和粪便的乳酸菌,通过产乳酸能力、生长性能、耐酸和耐胆盐性能及抑菌能力评价,筛选适应养猪生产的潜在益生特性的菌株。【方法】共分离获得155株乳酸菌纯菌株,从中筛选出4株产酸能力较强的乳酸菌,结合生理生化试验及细菌16S rRNA测序鉴定其种属,评价候选乳酸菌的生长情况、耐酸、耐胆盐及抑菌特性。【结果】综合变色时间(8 h)、pH值(3.9)和乳酸含量(100 mmol/L),筛选出4株(L45、L47、L63和L79)候选菌株,经鉴定依次为罗伊氏乳杆菌、植物乳杆菌、约氏乳杆菌和粪肠球菌。该4株乳酸菌均可在体外快速生长;L47和L79能够耐受pH 2.5的酸性环境,L47能够耐受0.5%胆盐环境;各乳酸菌上清液与指示菌共培养,发现对E coli K88和沙门氏菌均产生了抑制作用,其中L47上清液对指示菌的抑制作用较强。【结论】L47具有较好的产酸性能与生长性能、可耐受猪胃酸和肠道胆盐环境,对E.coli K88和沙门氏菌具有较好的抑制作用,说明该乳酸菌具有潜在的益生特性。     

金针菇源降胆固醇土著乳酸菌的筛选与鉴定

以金针菇子实体为材料,通过添加溴甲酚紫的MRS培养基分离得到98株土著乳酸菌。以降胆固醇的效率和模拟肠道环境的耐酸和耐胆盐的耐受力为指标进行复筛,获得了2株降胆固醇以及耐酸耐胆盐综合能力都较强的菌株4J1和4J17,经16S r DNA鉴定及生理生化试验鉴定,结果表明该两株乳酸菌均为假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides)。本研究结果扩宽了降胆固醇的益生乳酸菌的种质资源,同时为金针菇的发酵加工产品提供良好的益生发酵菌株。     

具有降胆固醇功能益生菌的筛选研究

目的通过体外实验从发酵制品及人体肠道内分离筛选出安全高效的降胆固醇乳酸菌,并研究其生理生化特性,为今后功能性乳制品的开发提供优良菌种。方法应用MRS．胆固醇培养基液体发酵法进行目的菌株筛选,并测定其耐酸及耐胆盐等能力。结果筛选出4株具有降胆固醇能力的乳酸菌,其降解率分别为DM8403163．1％、DM8403470．3％、DM850381．1％、DM8605663．1％;同时4株乳酸菌均表现出不同程度的耐酸及耐胆盐能力,其中DM86056能力最强,其他3株乳酸菌次之;经鉴定,DM84031为保加利亚乳杆菌、DM84034为嗜热链球菌、DM8503为詹氏乳杆菌、DN86056为屎肠球菌。结论经上述实验综合比较,DM86056降胆固醇能力比较强且耐酸及耐胆盐等能力也较强,因此有待于将其应用于动物体内进行深入研究。     

光合细菌2c菌株益生特性的实验研究

目的研究沼泽红假单胞菌2c菌株益生特性。方法利用耐酸、耐胆盐、体外黏附、平板抑菌试验及大鼠摄入2c菌株后在其体内的存活和持续时间实验研究其益生特性。结果pH2.5条件下处理30min及0.5%或0.9%牛胆盐处理对2c菌株活菌数无显著影响(P0.05);2c菌株体外对4株临床致病菌无抑制作用,体外黏附性能一般。2c菌株在大鼠体内存活和持续时间与摄入剂量有关,停止摄入3d后便不能富集出。结论2c菌株具有较好益生特性。     

侗族酸肉中抗氧化乳酸菌的耐受性及功能特性

对7株分离自侗族发酵酸肉中具有高抗氧化活性乳酸菌的耐受性、产胞外多糖特性及降胆固醇能力进行测定及分析。结果表明:7株乳酸菌均具有良好的酸耐受性、较高的耐渗透压和产酸能力;对胆盐耐受能力差异明显,胆盐质量分数达0.1%时,SR9-3、SR13-1、SR6和SR4-2仍生长良好;SR13-1、SR4-2和SR9-3产胞外多糖能力均达15.0 mg/L以上;受试菌株均对胆固醇有清除能力,其中SR10-1、SR13-1以及优化后的SR6对胆固醇清除能力均达16.0%以上。     

商品鸡盲肠内容物乳酸菌的分离与鉴定

实验以健康商品鸡盲肠为菌源,对附着其上的乳酸菌进行分离与鉴定,就所获得的菌株的耐酸耐胆汁、黏附特性、抑菌性进行初步研究。实验结果表明,从商品鸡盲肠中分离出6株乳酸菌,根据耐酸耐胆汁试验,病原菌生长抑制试验以及肠道黏膜粘附试验,筛选出2株优势菌株CX001和CX005,经乳杆菌属的生化鉴定,初步确定为短乳杆菌。     

北疆传统发酵生奶酪中乳酸菌的耐受性及益生特性测定

【背景】北疆乳制品中生奶酪作为发酵乳制品,其中有多种微生物的参与,是优质食品级微生物的宝贵来源,然而其中蕴含的丰富的微生物资源也面临着流失。【目的】研究已筛选出的41株乳酸菌的生长曲线变化规律,并对其在低pH环境的耐酸特性及益生特性进行分析。【方法】通过人工模拟胃肠液和含0.3%、0.5%、1.0%浓度牛胆盐溶液培养,对从生奶酪中分离鉴定的41株乳酸菌菌株进行人工胃肠液、牛胆盐耐受性试验。【结果】41株乳酸菌中有6株乳酸菌(编号为QM-5、QM-27、UM-12、UM-18、NM-11和NM-14)均能在pH值分别为2.0、2.5、3.0、3.5、4.0时生长较好,在pH 2.0的环境下也保持一定程度的生长。菌株存活率大于50%,乳酸菌含量为108 CFU/mL以上。从生奶酪分离的乳酸菌有极强的耐酸、耐胆盐特性,可以预测在胃肠道环境生存。41株菌对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)均有抑制作用。【结论】通过比较耐酸性、胃肠道模拟、胆盐耐受性和抑菌特性等实验结果,初...     

耐受微酸性次氯酸水乳酸菌的分离鉴定、耐受特性及益生特性

【背景】次氯酸水具有杀菌性，当其作为饮用水可能会对畜禽肠道内有益菌造成负面影响。【目的】筛选出具有耐受微酸性次氯酸水(slightly acidic hypochlorous acid water, SAHW)能力的乳酸菌并研究其益生特性。【方法】从内蒙古地区传统自然发酵制品中分离筛选出8株乳酸菌菌株，经16SrRNA基因测序进行鉴定。进一步通过耐受SAHW、耐酸、耐胆盐、疏水性及自凝聚能力试验进行耐受特性和益生特性研究。【结果】菌株MBH3-2为副干酪乳杆菌，其经过质量浓度为20mg/L的SAHW处理2h，菌落对数值仅下降0.3lg(CFU/mL)，存活率为50.10%；而且在酸性(pH 2.0、2.5和3.0)、胆盐环境下均可存活；疏水率达62.12%，属于高度疏水性；自凝聚能力在2 h达到97.29%。【结论】最终确定一株具有优良耐受SAHW及基本满足作为微生态制剂要求的菌株，MBH3-2具有作为新型微生态制剂菌株的潜力。     

屎肠球菌降胆固醇作用的初步研究

血液中胆固醇含量增加会严重威胁人类健康。利用皂化-比色法检测了22株屎肠菌株体外降胆固醇的能力,结果显示屎肠菌株的胆固醇去除率在85.93%~21.25%之间。选取3株胆盐耐受能力较好的菌进行后续研究,其中,屎肠球菌SP5-6L的耐酸能力较差;JS2和ML13-5菌株具有一定的耐酸和耐胆盐能力;3株菌株的胆盐水解酶活性都很高。在0.3%胆盐培养基中,屎肠球菌的胆固醇去除率不同,其中ML13-5菌株的去除率由52.71%增加到68.01%。此外,屎肠球菌无溶血性,但其抗药性各有不同。本文对屎肠球菌降低胆固醇的机制进行了初步研究,为进一步利用其开发相关功能性食品和药物提供了依据。     

胆盐水解酶产生菌的筛选及其益生潜力研究

目的从健康仔猪肠道及粪便中筛选具有胆盐水解酶活性的优良益生乳杆菌菌株,并对筛选菌株的体外、体内益生潜力进行初步探讨。方法用MRS培养基分别从仔猪新鲜粪便和小肠黏膜分离培养乳酸菌,用筛选鉴别培养基筛选阳性菌株,研究菌株的抗逆能力、黏附特性以及体内益生活性。结果从粪便和小肠黏膜共得到乳酸菌388株和97株,其中胆盐水解酶阳性菌株分别为291株(75%)和86株(89%)。选择5株胆盐水解酶活性最强、能水解游离胆酸的菌株,研究菌株的抗逆能力、黏附特性以及体内益生活性,并对最终选育得到的菌株进行生理生化及16S rRNA分子鉴定,发现菌株罗伊乳杆菌G22-2能耐受pH 3.0的酸度、1.0%的胆盐浓度,在小肠上皮细胞上的黏附效率超过15个以上;通过大鼠体内实验,筛选出的菌株G22-2对大鼠无毒无害,并能显著改善血脂水平。结论罗伊乳杆菌G22-2符合益生菌的要求,可以作为产胆盐水解酶的益生乳杆菌优良的候选菌株。     

新疆传统发酵乳品中乳酸菌与 酵母菌的益生特性

目的观察新疆传统发酵乳品中分离的14种菌株的生长特点及产酸能力,筛选出具有较强耐胆盐能力,并能在人工胃肠液中存活的菌株。方法对10株乳酸菌和4株酵母菌进行生长曲线、pH、耐胆盐能力和耐人工胃肠液检测。结果 10株乳酸菌和4株酵母菌具有良好的生长曲线和产酸能力;马乳酒样乳杆菌具有较强的耐胆盐能力;希氏乳杆菌、马乳酒样乳杆菌、乙醇假丝酵母和东方伊萨酵母具有较强的耐人工胃液能力;乳酸乳球菌、哈尔滨乳杆菌、瑞士乳杆菌、马乳酒样乳杆菌、乙醇假丝酵母和东方伊萨酵母具有较强的耐人工肠液能力。结论 10株乳酸菌和4株酵母菌具有优良的益生特性,有望成为益生菌制剂的备用菌株。     

两株乳酸杆菌益生菌特性的研究

对两株乳酸杆菌作为益生菌的特性进行分析。采用人工胃液、人工肠液,及体外培养人结肠癌细胞株HT-29,模拟 上消化道环境,检测候选菌株L.acidophilus1.1878和L.rhamnosus1.120对上消化道环境的耐受性和粘附性;以琼脂扩散打孔 法,检测候选菌株SCS对4种常见肠道致病菌的抑菌能力。结果表明,两株候选菌株可耐受pH>3.0的人工胃液,及0.2%的 胆盐浓度;光镜观察L.acidophilus1.1878、L.rhamnosus1.120粘附于HT-29细胞边缘,平均4.5～7个/细胞,扫描电镜观察 L.acidophilus1.1878、L.rhamnosus1.120粘附于HT-29细胞表面的刷状缘,且细胞表面结构完整;对4种肠道致病菌的抑菌 圈直径均在12mm以上。证明实验观察的两株乳酸杆菌具有较好的耐酸、耐胆盐及粘附、抑菌特性,符合益生菌的标准。     

具有降血压功能的益生菌的筛选

体外ACE抑制活性实验表明,实验室保存的40株乳酸菌菌株中有27株具抑制ACE的活性,其中尤以L·salivariusLa5、L·salivariusLma1、L·plantarumLP529、L·plantarumLS12、L·plantarumLS31、L·helveticusZL51最为明显。按照益生菌标准对上述6株菌的耐酸、耐胆盐、抗药性、抑菌等性能进行评价,结果表明,L·plantarumLP529、L·plantarumLS12、L·plantarumLS31、L·helveticusZL51可作为益生菌用于降血压产品。     

长寿老人源双歧杆菌优良菌株的筛选*

以人结肠腺癌细胞系HT-29细胞为试材,对来源于广西巴马百岁以上长寿老人肠道的24株双歧杆菌进行了体外黏附试验。结果发现,双歧杆菌均具有一定的黏附能力,其中TTF、Z2、TZ5和J-1菌株具有较高的黏附能力。进一步对4株初筛双歧杆菌耐胃酸、胆汁酸和合成B族维生素能力的试验发现,双歧杆菌TTF菌株不仅能合成较高的B1、B2、B6、B12等多种B族维生素,而且在pH 3.0的条件下处理120m in存活率达93.11%,同时在2%胆盐浓度下处理24h有较好的存活,具有显著的综合优势。     

从人胃肠道源乳杆菌株中初步筛选耐酸耐胆盐优良株

目的筛选对酸和胆盐耐受性均较强的优良乳杆菌株。方法模拟人体胃酸环境（pH=3）和十二指肠高胆盐环境（胆盐含量=3‰）测定104株人胃肠道源乳杆菌在酸性及高胆盐环境下作用4h后的存活菌数,并与对照相比较。对结果进行统计学分析。结果16株菌在酸性环境及高胆盐环境下4h后的活菌下降对数值均小于2。筛选出3株具有较强耐酸耐胆盐能力的乳杆菌株。结论大多数人胃肠道源乳杆菌对酸和胆盐的耐受能力均不强,对酸的耐受性普遍强于对胆盐的耐受性。     

解脂亚罗酵母菌体外降甘油三酯降胆固醇效果研究

筛选出高效降三酰甘油降胆固醇菌株,为新型药物、食品的制备提供优良菌株。从样品中筛选分离出酵母菌株,并测定菌株降三酰甘油能力,采用磷硫铁比色法测定菌株降胆固醇能力,通过耐酸、耐胆盐及毒性实验研究菌株各项性能,通过生理生化及26S rDNA法对菌株进行鉴定。结果显示,试验筛选出1株高效降脂降胆固醇酵母菌EAM-ZT003T,降三酰甘油能力高达80.2%,菌株具有很好的耐酸、耐胆盐能力,为期42 d的小鼠毒性试验发现,小鼠未出现异常体征,未发现异常死亡,且解剖观察各器官一切正常,菌株经26S rDNA鉴定为解脂亚罗酵母菌(Yarrowia lipolytica)。     

乳酸菌对微囊藻毒素的清除

【目的】研究唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius BBE09-18)、发酵乳杆菌(L.fermentum BBE09-29)以及干酪乳杆菌(L.casei Zhang)对藻毒素的清除能力以及影响乳酸菌清除藻毒素的主要因素,以期为进一步解析乳酸菌清除藻毒素的作用机制提供理论基础,并为去除食品体系中的藻毒素提供新的思路。【方法】研究乳酸菌细胞的不同生理状态(活细胞与死细胞)对藻毒素清除能力的影响,考察菌浓差异、起始藻毒素浓度差异、葡萄糖的供给等对乳酸菌清除藻毒素效能的影响。【结果】3株实验乳酸菌均具有清除藻毒素的能力,其中,L.casei Zhang的藻毒素清除能力最强,当藻毒素初始浓度为150μg/L时,24h后残留藻毒素浓度为85.5μg/L,清除率可达43%。此外,研究还发现乳酸菌活细胞的清除能力显著高于热失活后的死细胞。添加外源物质葡萄糖能显著提高实验菌株清除藻毒素的效率,在初始浓度为1800μg/L的藻毒素溶液中,当添加5%(w/v)葡萄糖后,L.casei Zhang经24h可清除92%的藻毒素。【结论】3株乳酸菌均具有藻毒素清除能力;同时,菌体浓度以及菌体自身的生理状态对藻毒素的清除效率具有重要影响,乳酸菌对藻毒素的清除可能与菌体的代谢活性相关。     

降胆固醇嗜酸乳杆菌的诱变选育

通过诱变获得具有降胆固醇功能的优良嗜酸乳杆菌新菌株。利用亚硝基胍(作用浓度为1 g/L)对嗜酸乳杆菌进行诱变。突变菌株测定其耐渗透压和抗胆盐能力后,在含有0.3 g/L胆固醇的培养基中培养48 h,测定降胆固醇率。挑选优良突变菌株制成酸奶并喂养高脂大鼠模型,28 d后测定血清及粪便胆固醇指标。嗜酸乳杆菌突变后获得的60个突变菌株中有8株具有良好的耐渗透压和抗胆盐能力,其中突变株Y48的清除胆固醇能力最高,清除率达到(61.44±1.8)%。Y48发酵酸奶喂养高脂大鼠模型28 d后与对照大鼠模型相比,血清中TC、TG明显减少(P<0.05),粪便TC明显增加。通过诱变获得了优良的嗜酸乳杆菌突变菌株,为今后获得优质降胆固醇乳酸制品提供良好的候选菌种。     

降胆固醇乳酸菌的筛选和分析比较

目的比较7株乳酸菌各项生理特性,筛选高效、安全降解胆固醇的益生菌株,为后期开发应用奠定基础。方法对选定菌株依次进行体外降胆固醇、胆盐水解酶(BSH)活力、人工胃肠液及胆盐耐受性、细胞粘附性能的测定和比较,并分析抗生素耐药性和抑制病原菌活性,最后利用16S rRNA基因测序确定细菌种属。结果不同菌株各项生理指标存在差异。其中菌株ZL-2、JQI-7和PC-26的BSH酶活分别为0.010、0.015和0.030 U,可高效清除体外胆固醇,3株菌体外降解胆固醇率在58%以上;并且耐酸、耐胆盐,具备较好的HT--29细胞粘附性,不存在抗生素耐药性,可有效抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌生长。结论菌株ZL-2、JQI-7和PC-26满足降胆固醇益生菌株的生物学特性,可用于进一步研究和开发。