杂交稻核酮糖二磷酸羧化酶的动力学性质

在ｐＨ８．０和３０℃的条件下测定了杂交稻ＲｕＢＰ羧化酶的动力学常数,纯化酶测定值与粗酶快速测定值无明显差异。１２种不同组合的三系杂交稻（Ｆ１）其ＲｕＢＰ羧化酶动力学常数差异不大,Ｋｍ（ＣＯ２）和Ｖｍａｘ的平均值与普通栽培品种也无显著差异。杂交稻汕优６３号ＲｕＢＰ羧化酶的动力学常数和酶蛋白含量与父本恢复系相类似,而母本不育系的Ｖｍａｘ和酶蛋白含量均较高。     

河西走廊芦苇在不同盐渍生境中RuBP羧化酶的比较研究

对不同盐渍生境中芦苇的ＲｕＢＰ羧化酶结构的研究表明,不同类型芦苇的ＲｕＢＰ羧化酶大、小亚基分子量相同,但盐化草甸芦苇和过渡地带芦苇与沼泽芦苇相比,ＲｕＢＰ羧化酶的亲水氨基酸相对含量增加,疏水氨基酸相对含量降低,酶分子被ＰＣＭＢ滴定的ＳＨ基数亦显著减少．表明芦苇的ＲｕＢＰ羧化酶结构发生了变化,反映出该酶有基因表达的环境适应．     

光和暗条件培养的眼虫藻内RuBP羧化酶的免疫定位

应用免疫金标记技术证明,在眼虫藻和其它藻类中ＲｕＢＰ羧化酶主要分布在蛋白核部位,这与高等植物中ＲｕＢＰ羧化酶分布不同,在眼虫藻叶绿体间质中有少量ＲｕＢＰ羧化酶存在,这与高等植物中ＲｕＢＰ羧化酶的分布也有相似之处。暗中培养的眼虫藻不能形成类囊体,无ＲｕＢＰ羧化酶,无光合能力,只能进行异养代谢。     

杂种小麦及亲本旗叶老化过程中RubisCO特性的研究

小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）旗叶的ＲｕＢＰｃａｓｅ活性、含量及ＲｕＢＰｏａｓｅ活性在旗叶全展或全展后１０ｄ达最大值,以后逐渐下降。与亲本相比,供试杂种小麦“麦优４号”在旗叶一生中尤其老化后期上述参数皆表现明显的杂种优势。旗叶ＲｕＢＰｃａｓｅ比活性在叶绿素缓降期保持平稳,在叶绿素速降期逐渐下降。供试杂种小麦较亲本具有较高的ＲｕＢＰ羧化酶和加氧酶活性,表明杂种小麦不仅具有较强的光合羧化作用,而且叶片光合作用过程中的光呼吸也较强。结果与旗叶ＲｕｂｉｓＣＯ亲合ＣＯ２和Ｏ２的动力学常数的测定结果相符。     

水稻叶片生育过程中RubisCO活性与光合,光呼吸的关系

水稻生育过程中，ＲｕＢＰ羧化酶活性与光合速率，ＲｕＢＰ加氧酶活性与光呼吸速率、ＲｕＢＰ羧化酶活性与加氧酶活性以及光合速率与光呼吸速率之间是相关的。籼型品种与粳型品种间酶活性的高低及光合、光呼吸速率的高低基本一致，籼型三系杂交稻无明显的光合优势。酶的羧化活性搞低只在一定范围内与光合速率的高低平行，在正常生育条件下，酶蛋白的数量不是水稻光合速率的限制因子。     

水稻叶片生育过程中RubisCO活性与光合、光呼吸的关系

水稻生育过程中,ＲｕＢＰ羧化酶活性与光合速率、ＲｕＢＰ加氧酶活性与光呼吸速率、ＲｕＢＰ羧化酶活性与加氢酶活性以及光合速率与光呼吸速率之间是相关的。籼型品种与粳型品种间酶活性的高低及光合、光呼吸速率的高低基本一致,籼型三系杂交稻（Ｆ１）无明显的光合优势。酶的羧化活性的高低只在一定范围内与光合速率的高低平行。在正常生育条件下,酶蛋白的数量不是水稻光合速率的限制因子。     

气相色谱法测定RuBp羧化酶活性的研究

ＲｕＢｐ羧化酶作用后反应体系中能为加入的ＨＣｌ释放出的剩余,作为ＲｕＢｐ羧化酶活性指示。所释放的ＣＯ＿２以气相色谱法检测,用黄瓜叶片中ＲｕＢｐ羧化酶的反应时间曲线和酶量曲线验征,并与现行的分光光度,￣（１４）Ｃ标记测试方法比较分析,认为本方法具有应用简便、快速、准确、重复性好等优点。所以,可被认为是一种有效的测定ＲｕＢｐ羧化酶活性的方法。     

表油菜素内酯对黄瓜子叶过氧化物酶活性和可溶性蛋白含量的影响

０．５ｍｇ／Ｌ的表油菜素内酯（ｅｐｉ－ＢＲ）能显著地促进黄瓜子叶叶绿素ａ、叶绿素ｂ的含量和叶绿素ａ／叶绿素ｂ比值的下降,表明ｅｎｉ－ＢＲ能促进子叶的衰老。从过氧化物酶（ＰＯＤ）的活性测定及同工酶谱发现ｅｐｉ－ＢＲ可提高其活性,暗示它可能通过提高子叶ＰＯＤ的活性而加速子叶叶绿素的降解。另一方面,ｅｐｉ－ＢＲ促进子时可溶性蛋白含量的下降,其中主要是ＲｕＢＰ羧化酶含量的下降,同时,ｅｐｉ－ＢＲ引起子叶游离氨基酸的累积。     

光抑制条件下水稻籼粳亚种及其正反交F_1杂种的PSⅡ光化学效率和CO_2交换特点

测定了水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）不同正反交组合的ＰＳⅡ电子传递活性、Ｄ１蛋白量、叶绿素ａ荧光、净光合速率（ＰＮ）、光呼吸速率（ＰＲ）、ＲｕＢＰＣａｓｅ／Ｏａｓｅ活性,并对ＲｕＢＰＣａｓｅ进行了动力学分析。结果表明：光抑制条件下粳（ｊａｐｏｎｉｃａ）亚种中Ｄ１蛋白净降解少,ＰＳⅡ电子传递活性和光化学效率高,表现耐光抑制,而籼（ｉｎｄｉｃａ）亚种则相反,籼、粳正反交Ｆ１的上述指标介于双亲值之间且偏向其母本。进一步观察它们的ＣＯ２交换特点,所有基因型水稻ＰＲ保持稳定、ＰＮ降低,因而ＰＲ／ＰＮ增加。与耐光抑制的粳亚种相比,对光抑制敏感的籼亚种中ＰＮ降低较多、ＰＲ／ＰＮ增加较多。正反交Ｆ１杂种的ＰＲ／ＰＮ介于双亲值之间且偏向其母本。ＣＯ２交换的关键酶ＲｕＢＰＣａｓｅ／Ｏａｓｅ活性和ＲｕＢＰＣａｓｅ动力学参数没有变化且在基因型间无差异。相关分析表明,Ｄ１蛋白量与Ｆｖ／Ｆｍ、ＰＲ／ＰＮ的相关系数分别为０．９５０１和－０．９７６８。看来,质基因编码的Ｄ１蛋白是籼粳杂种稻光抑制特性及其生理遗传的分子基础。     

Rht3基因及带有Rht3基因的4B染色体对普通小麦光合碳同化特性的影响

本文系统地研究了带有Ｒｈｔ３基因的４Ｂ染色体二体（宁矮１号）、单体（宁矮１号Ｍ４Ｂ）、缺体（宁矮１号Ｎ４Ｂ）材料的光合特性,发现带有Ｒｈｔ３基因的４Ｂ染色体对光合速率、叶绿素含量、ＲｕＢＰ羧化酶含量及活性、叶片导度均有正效应,并有累加作用,而且对叶绿素含量缓降期和光合速率高值持续期也有正效应,因此带有Ｒｈｔ３基因的４Ｂ染色体具有促进光合作用的效应。对具有不同Ｒｈｔ３基因剂量的矮秆系（宁矮１号,即苏麦３号的Ｒｈｔ３矮秆等基因系）、半矮秆系（ＭＤ苏麦３号）及其苏麦３号的光合碳同化特性的研究,发现Ｒｈｔ３基因对光合速率、叶绿素含量、叶片导度具有正效应,但对于ＲｕＢＰ羧化酶含量和活性、叶绿素含量缓降期、光合速率高值持续期有负效应。     

光抑制条件下水稻籼粳亚种及其正反交F1杂种的PSⅡ光化学效率和CO2？…

测定了水稻不同正反交组合的ＰＳⅡ电子传递活性、Ｄ１蛋白量、叶绿素ａ荧光、净光合速率（ＰＮ）、光呼吸速率（ＰＲ）、ＲｕＢＰＣａｓｅ／Ｏａｓｅ活性,并对ＲｕＢＰＣａｓｅ进行了动力学分析。结果表明：光抑制条件下粳亚种中Ｄ１蛋白净降解少,ＰＳⅡ电子传递活性和光化学效率高,表现耐光抑制,而籼亚种则相反,籼、粳正反交Ｆ１的上述指标介于双亲值之间且偏向其母本。进一步观察它们的ＣＯ２交换特点,所有基因型水稻ＰＲ保     

稀土离子对烟草RuBPcase的激活作用及EXFAS研究

研究了稀土离子（Ｌｎ３ ＋） 对烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ）１ ,５ － 二磷酸核酮糖羧化酶（ＲｕＢＰｃａｓｅ）活力的影响。结果表明,在该酶的反应体系中,用Ｌｎ３ ＋ 替代Ｍｇ２ ＋ ,烟草ＲｕＢＰｃａｓｅ 的活力随Ｌｎ３ ＋ 浓度的变化曲线呈双相效应, 即在高浓度时, Ｌｎ３ ＋ 抑制该酶活性; 低浓度的Ｌｎ３ ＋ 提高ＲｕＢＰｃａｓｅ 活性。其活化效应为轻稀土离子大于重稀土离子,但Ｌｎ３ ＋ 的活化效应低于Ｍｇ２ ＋ 。在有Ｍｇ２ ＋ 的反应体系中,Ｌｎ３ ＋ 在低浓度时也有提高ＲｕＢＰｃａｓｅ 活性的能力,提高幅度较低;而高浓度的Ｌｎ３ ＋ 显著地抑制酶活性。进一步对ＲｕＢＰｃａｓｅ － Ｌａ 二元复合物的ＥＸＦＡＳ 研究,证实Ｌａ３ ＋ 与ＲｕＢＰｃａｓｅ 氨基酸残基的Ｏ 原子键合,键长为２ ．５１?;Ｌａ３ ＋ 还与Ｓ 原子结合。最后对Ｌｎ３ ＋ 和ＲｕＢＰｃａｓｅ 相互作用的分子机制进行讨论     

糖基化3－磷酸甘油醛脱氢酶的含糖量及其构象变化

通过对ＧＡＰＤＨ及ｇＧＡＰＤＨ含糖量、ＣＤ、荧光及ＤＴＮＢ的修饰表明：用间氨基苯硼酸琼脂糖（ｍ－ＡＰＢＡ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ６Ｂ）亲和层析法分离的兔肌ｇＧＡＰＤＨ每分子含有１．８９个糖基。ｇＧＡＰＤＨ及ＧＡＰＤＨ的远紫外ＣＤ谱差别较小,但近紫外差别较明显。两者内源荧光在不同浓度的ＧｕＨＣｌ溶液中的变化亦有一定差异。ＤＴＮＢ对酶活性部位巯基的修饰表明,ｇＧＡＰＤＨ的ＤＴＮＢ修饰的快相一级动力学常数大于ＧＡＰＤＨ动力学常数一个数量级。以上结果提示：糖基化导致酶分子及活性部位的空间结构改变,糖基化位点可能发生在酶活性部位附近。     

糖基化3－磷酸甘油醛脱氢酶的含糖量及其构象变化

通过对ＧＡＰＤＨ及ｇＧＡＰＤＨ含糖量、ＣＤ、荧光及ＤＴＮＢ的修饰表明：用间氨基苯硼酸琼脂糖（ｍ－ＡＰＢＡ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ６Ｂ）亲和层析法分离的兔肌ｇＧＡＰＤＨ每分子含有１．８９个糖基。ｇＧＡＰＤＨ及ＧＡＰＤＨ的远紫外ＣＤ谱差别较小,但近紫外差别较明显。两者内源荧光在不同浓度的ＧｕＨＣｌ溶液中的变化亦有一定差异。ＤＴＮＢ对酶活性部位巯基的修饰表明,ｇＧＡＰＤＨ的ＤＴＮＢ修饰的快相一级动力学常数大于ＧＡＰＤＨ动力学常数一个数量级。以上结果提示：糖基化导致酶分子及活性部位的空间结构改变,糖基化位点可能发生在酶活性部位附近。     

水分胁迫对露花磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶表达水平及特性的影响

水分胁迫能引进露花叶片ＰＥＰ羧化酶的活力,酶蛋白和ｍＲＮＡ水平的提高。复水后,叶片ＰＥＰ羧化酶表达量降低,茎中的ＰＥＰ羧化酶在水分胁迫和恢复水分供应过程中变化情况与叶片相似,兼性ＣＡＭ植物的碳代谢类型转变发生在植物的绿色组织中。     

中国东北草原植物中的C3和C4光合作用途径

以光合作用关键羧化酶ＰＥＰＣ和ＲｕＢＰＣ活性化,并且参照叶片ＣＯ补偿浓度,δ＾１３Ｃ值和叶片解剖结构特点来鉴定东北草原区２３３种植物的Ｃ３,或Ｃ４光全作用途径,这些植物隶属于１４４属７３科,其中１３７种为首次鉴定。８９种具有Ｃ４光合作用途径,隶属于５５属１７科;１４４种人有Ｃ３光俣作用途径;隶属于９４属２８在多数Ｃ４种分布在禾本科、莎草科、苋科和藜科。苋属、地肤属、狗昌属和虎尾草属中的均为Ｃ４植物     

兔阑尾中一种新的21kD的钙结合蛋白的纯化与鉴定

纯化与鉴定了Ｂ淋巴细胞中一种新的分子量为２１ｋＤ的钙结合蛋白（ＣａＢＰ２１）。兔阑尾淋巴细胞匀浆经热变性,Ｐｈｅｎｙｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ与ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱层析,自每１ｋｇ细胞沉积物中获得ＳＤＳ－ＰＡＧＥ均一的ＣａＢＰ２１５．３ｍｇ。ＨＣｌ水解后的酸性氨基酸（Ａｓｐ＋Ｇｌｕ）含量为２６％。如同大多数钙结合蛋白一样,Ｎ末端封闭阻止其进行Ｅｄｍａｎ降解。ＣａＢＰ２１中疏水性氨基酸（计Ｇｌｙ,不计Ｔｒｐ）约占４６％,碱性氨基酸１０％,酸性氨基酸与极性氨基酸约４４％。ＣａＢＰ２１有较高的Ｓｅｒ、Ｔｙｒ含量。肽谱分析等确证ＣａＢＰ２１为２个相同或相似亚基二聚体。以ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ作Ｃａ２＋结合分析表明每分子ＣａＢＰ２１可结合４分子Ｃａ２＋,对Ｃａ２＋的结合常数约为１０－５ｍｏｌ／Ｌ。各种性质表明ＣａＢＰ２１是一种不同于其他已知钙结合蛋白的新钙结合蛋白。     

菠萝叶片的稳定碳同位素比与PEP羧化酶及PEP羧激酶活性

专性景天酸代谢（ＣＡＭ）植物菠萝（Ａｎａｎａｓｃｏｍ ｏｓｕｓ （Ｌ．） Ｍｅｒｒ．）的下数第５ 到第３５ 位叶为材料,研究稳定性碳素同位素（δ１３Ｃ）值,磷酸稀醇式丙酮酸（ＰＥＰ）羧化酶和ＰＥＰ羧激酶活性的变化。１１ 个不同叶位叶片的δ１３Ｃ值平均为－ １２．９４‰,最大变幅相差－ ２．０６‰。两个酶的活性呈单峰形变化,第８—１１ 位叶的活性最高,低位叶的酶活下降。本试验条件下,ＰＥＰ羧激酶平均活性比ＰＥＰ羧化酶高３．４ 倍。结果表明,ＣＡＭ 植物的暗下羧化与光下脱羧之间具有一定的协调性。老叶虽然酶活较低,但总的看来,ＣＡＭ 水平变化不大     

蚯蚓新钙结合蛋白(NCBP)的二级结构及Ca~(2+)、Tb~(3+)离子的影响

应用红外光谱技术定量测定了水化膜中蚯蚓新钙结合蛋白（ＮＣＢＰ）的二级结构及在不同比例Ｃａ２＋、Ｔｂ３＋离子的作用下其二级结构的变化。结果表明,ＮＣＢＰ中α－ｈｅｌｉｘ含量较低而β－ｓｈｅｅｔ的含量较高,且随不同比例金属离子的加入,１６２９ｃｍ－１处β－ｓｈｅｅｔ峰的变化较明显。同时发现,ＮＣＢＰ具有钙结合蛋白家族特征的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ现象,但不具有激活ＰＤＥ靶酶的活性,初步认为,ＮＣＢＰ含有与Ｃａ２＋浓度相关的特殊的结构和功能。另外,高浓度下Ｔｂ３＋的结合引发ＮＣＢＰ的分子间聚合,提示对稀土元素的使用要慎重     

Ti质粒介导的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶cDNA转化烟草植株

将玉米Ｃ４－磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（ＰＥＰ羧化酶）ｃＤＮＡ亚克隆至穿梭质粒ｐＢｉｎ１９,通过在杆菌Ｔｉ质粒（ＬＢＡ４４０４）介导的时圆片共培养法将其转入Ｃ３植物烟草中。在获得的抗性转化植株中,８０％具有较强的ＮＰＴⅡ报道基因表达。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交表明Ｃ４－ＰＥＰ羧化酶ｃＤＮＡ已被整合到了烟草核基因组中。