东湖螅状独缩虫(纤毛门：寡膜纲)的异质性

以螅状独缩虫（Carchesium polypinum Linne,1785）为研究对象,利用RAPD技术对武汉市南湖、沙湖和东湖3个湖区的螅状独缩虫样本进行了DNA多态性比较分析,以确认种群并期望促进微型生物种群生态学研究.结果如下：（1）从120条随机引物中筛选到31条有清晰扩增条带的,其中20条引物扩增出172条条带清晰、多态性高的条带,片段大小为100～1600bp,而其余11个引物扩增出59条相对多态性差的清晰条带,片段大小为100～1500bp;（2）扩增产物经SPSS12.0与RAPDistance 1.04分析显示,东湖世纪钟（Z）、水果湖（H）和南湖（N）3个样点构成一个分支,而东湖风光村样点（F）或独自形成一支,或与沙湖样点（S）构成相对的姊妹分支.东湖3个样点样本被其它湖泊样本所分隔,表明：东湖水体中螅状独缩虫个体集合为多个种群.这一发现不仅将推动同一水体中微型生物种群生态学研究,更有意义的是可启动关于水体微型生物种群间过渡区本质及物种扩散行为的研究,以期为阐明种群分化和物种形成的机制积累基础资料.     

缢蛏遗传多样性的RAPD分析

用RAPD(Random amplified polymorphic DNA)技术对大连的养殖缢蛏(Sinonovaeula constrict)群体35个个体的遗传多样性进行了分析。结果表明,14个随机引物,平均每个引物扩增出6条带;共检测到的86个位点,其中多态位点数为43个(占50.0%);个体间遗传距离在0.1503～0.3768之间,平均遗传距离为0.2107;16号和25号缢蛏个体聚类成一大类,另33个缢蛏个体聚成一大类。     

利用RAPD分子标记快速鉴定3个奇楠种质

利用随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)分子标记技术,分析3个奇楠种质(ChiNan germplasm)亲缘关系,并快速鉴定。通过提取基因组DNA,筛选适用于奇楠种质分析的RAPD引物,PCR扩增获得扩增条带,分析奇楠种质的遗传多样性,并利用人工绘制品种鉴别示意图方法(manual cultivar identification diagram,MCID)将奇楠种质区分开来。从120条RAPD分子标记引物中筛选到10条适合于奇楠种质分析的引物,利用这10条引物发现奇楠种质在物种水平上遗传多样性高,3个奇楠种质不同居群间的遗传一致性高、遗传距离小,在聚类图上各自聚为一支;根据引物S63、S18和S100扩增的多态性谱带构建奇楠种质的MCID,很好地区分了3个奇楠种质。3个奇楠种质均具有特异性强、一致性好、稳定性高的特点,RAPD分子标记技术的MCID可以有效快速地鉴定区分3个奇楠种质。     

用RAPD技术探讨中国枣的种下划分

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对14个枣Ziziphus jujuba 品种和1个野生种——泰山酸枣Z．spinosus的遗传变异进行了研究。从120个10-碱基随机引物中筛选出37个多态性引物用于正式扩增,共扩增出429条DNA带,其中多态性带214条,占49．88％。根据DNA扩增结果计算了品种及类型间遗传距离,并用UPGMA构建了聚类树状图。分析结果表明：龙爪枣 Z．jujuba var．tortuosa、葫芦枣 Z. jujuba var．lageniformis、无核枣 Z.jujuba var．anucleatus 等几个变种内的遗传距离大于变种间遗传距离,认为枣的变种划分是不自然的,宜并入其原变种;枣种下不宜设变种,对枣种下的众多品种,应根据品种间的遗传关系,直接划分品种群。     

中国主要黑芝麻品种的遗传多样性分析

利用SRAP和SSR各23对引物对20个中国主要黑芝麻品种进行了遗传多样性分析。结果显示,23对SRAP引物共扩增出DNA带672条,其中多态性带152条,比率为22.62%,平均每对引物扩增总带数和多态性条带分别为29.22条和6.61条。23对SSR多态性引物共扩增出DNA带92条,每对引物扩增出3~6条,平均4.00条;每对引物扩增出多态性带1~5条,平均3.09条,多态性带比率平均为77.17%。20个黑芝麻品种间的遗传相似系数为0.8547~0.9804,遗传距离为0.0159~0.0921,遗传多样性匮乏,遗传基础狭窄。聚类结果表明,来自主产区江西的11个品种明显聚在一起,且江西黑芝麻品种的遗传相似系数高于其他省份品种,遗传距离低于其他省份品种,与其他省份品种的差异均达到极显著水平。加强资源引进和利用是拓宽中国黑芝麻品种遗传基础的迫切要求。     

贵州3种车前草的随机扩增多态性DNA(RAPD)亲缘关系分析

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对贵州车前草的3个种进行了分析,建立了它们的指纹图谱.从60个随机引物中筛选出的9个引物共产生94条DNA片段,大小分布在0.1～0.2kb之间,其中71个条带具有遗传多态性,约占总数的75.53％.平均每个引物扩增的DNA带数为10.44条.应用NTSYSpc软件进行聚类,将聚类结果转化为3种车前草之间的遗传关系树形图.结果显示,车前和平车前首先聚类,其Dice相似性系数为0.76,在三者中它们的亲缘关系较近;而大车前与它们的遗传相似性系数为0.56,亲缘关系较远.     

乌龟遗传多样性的RAPD分析

运用RAPD技术对乌龟的遗传多样性进行了分析。用20个随机引物对24个个体的基因组DNA进行了PCR扩增,一共扩增出3288条DNA片段,平均每个个体扩增出137条带。在检测到的137个位点中,多态位点数为119个,占869%,标记的分子量在0.2kb-3kb之间。个体间最大的遗传距离为0467,个体间最小的遗传距离为0168。24个个体的平均遗传距离为0324+00631。表明乌龟的遗传多样性水平较高。采用类平均聚类法(NJTREE)构建了24个个体相互关系的分支图。24个个体被分为几个类群,显示种内遗传差异较大,可能存在不同种群。本研究为乌龟的种质保护、合理开发利用以及选择育种提供了新的分析参数。       

苎麻疫霉群体的RAPD分析

利用从126个RAPD(Random Amplifled Polymorphic DNAs)随机引物中筛选到的可扩增出清晰条带、主带明显、稳定的8条引物,对采集自江苏、安徽和江西不同寄主的45个Phytophthora boehmeriae菌株进行全基因组DNA RAPD标记遗传多样性分析。选用引物共标出DNA指纹图带68条,其中多态性条带20条,多态性检测率为29．4％,表明该种内不同地区和寄主来源的菌株间变异较小。利用Popgene软件计算供试菌株间的遗传距离并绘制聚类树状图,供试菌株被划分为2个遗传聚类组。菌株间的遗传相似性与菌株的寄主来源有一定的相关性,来自江苏、江西和安徽棉花上的27个菌株被划分在同一遗传聚类组内,而分离自构树、枫杨和苎麻的18个菌株被划分在另一个遗传聚类组。结果还表明菌株间遗传相似性与其地区来源无直接相关性。     

苎麻疫霉群体的RAPD分析*

利用从126个RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNAs)随机引物中筛选到的可扩增出清晰条带、主带明显、稳定的8条引物,对采集自江苏、安徽和江西不同寄主的45个Phytophthoraboehmeriae菌株进行全基因组DNARAPD标记遗传多样性分析。选用引物共标出DNA指纹图带68条,其中多态性条带20条,多态性检测率为29.4%,表明该种内不同地区和寄主来源的菌株间变异较小。利用Popgene软件计算供试菌株间的遗传距离并绘制聚类树状图,供试菌株被划分为2个遗传聚类组。菌株间的遗传相似性与菌株的寄主来源有一定的相关性,来自江苏、江西和安徽棉花上的27个菌株被划分在同一遗传聚类组内,而分离自构树、枫杨和苎麻的18个菌株被划分在另一个遗传聚类组。结果还表明菌株间遗传相似性与其地区来源无直接相关性。     

苎麻疫霉群体的RAPD分析

利用从126个RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNAs)随机引物中筛选到的可扩增出清晰条带、主带明显、稳定的8条引物,对采集自江苏、安徽和江西不同寄主的45个Phytophthoraboehmeriae菌株进行全基因组DNARAPD标记遗传多样性分析。选用引物共标出DNA指纹图带68条,其中多态性条带20条,多态性检测率为29.4%,表明该种内不同地区和寄主来源的菌株间变异较小。利用Popgene软件计算供试菌株间的遗传距离并绘制聚类树状图,供试菌株被划分为2个遗传聚类组。菌株间的遗传相似性与菌株的寄主来源有一定的相关性,来自江苏、江西和安徽棉花上的27个菌株被划分在同一遗传聚类组内,而分离自构树、枫杨和苎麻的18个菌株被划分在另一个遗传聚类组。结果还表明菌株间遗传相似性与其地区来源无直接相关性。     

Genetic diversity and variance of Stentor coeruleus (Ciliophora: Heterotrichea) inferred from inter-simple sequence repeat (ISSR) fingerprinting

We used inter-simple sequence repeat fingerprinting to analyze the genetic structure of 16 populations of Stentor coeruleus from three lakes and three ponds in China. Using 14 polymorphic primers, a total of 99 discernible DNA fragments were detected, among which 76 (76.77%) were polymorphic, indicating median genetic diversity in these populations. Further, both Nei's gene diversity (h) and Shannon's information index (I) between the different populations revealed a median genetic diversity. At the same time, gene flow was interpreted to be low. The main factors responsible for the median level of diversity and low gene flow within populations are probably due to a low frequency of sexual recombinations. Analysis of molecular variance showed that there was high genetic differentiation among the five water bodies. Both cluster analysis and a nonmetric multidimensional scaling analysis suggested that genotypes isolated from the same locations displayed a higher genetic similarity than those from different ones, separating populations into subgroups according to their geographical locations. However, there is a weak positive correlation between the genetic distance and geographical distance.     

Molecular phylogeny of Stentor (Ciliophora: Heterotrichea) based on small subunit ribosomal RNA sequences

To determine the phylogenetic position of Stentor within the Class Heterotrichea, the complete small subunit rRNA genes of three Stentor species, namely Stentor polymorphus, Stentor coeruleus, and Stentor roeseli, were sequenced and used to construct phylogenetic trees using the maximum parsimony, neighbor joining, and Bayesian analysis. With all phylogenetic methods, the genus Stentor was monophyletic, with S. roeseli branching basally.     

Coastal and freshwater pikeperch (Sander lucioperca) populations differ genetically in the Baltic Sea basin

Microsatellite DNA based analysis of the pattern of genetic diversity among three coastal and five freshwater populations of pikeperch Sander lucioperca in the northern part of the Baltic Sea drainage basin indicated marked genetic differentiation between the coastal and lake populations. The F(st) between these population groups was as high as 0.25 and R(st) =0.32. In general, the lake populations showed higher genetic diversity than the coastal ones. In terms of genetic distance, the three coastal populations (Vanhankaupunginlahti, V?stanfj?rd and Taivassalo) grouped tightly together. The freshwater samples formed a looser group, in which the northern Lake Kemij?rvi showed greater distance from the southern lakes than these did from each other. The two lake populations originally established through stockings (Lakes Painio and Averia) grouped near to their source population of Lake Lohjanj?rvi and their diversity level was nearly the same. Safeguarding the unique Baltic coastal populations of S. lucioperca against gene flow from increasing hatchery releases using freshwater S. lucioperca should be a high management priority.     

三种紫球藻亲缘关系RAPD分析

利用RAPD技术对铜绿紫球藻（Porphyridium aerugineum 755）,淡色紫球藻（Porphyridium purpureum 806）和紫球藻（Porphyridium cruentum）的亲缘关系进行分析。从50个随机引物中筛选出25个种间多态性较强,重复性较好的引物。检测到233个位点。在233个条带中有186个多态性位点。多态位点比率为79.73%,平均每个引物扩增9个条带,多态性条带7个。聚类分析结果表明：铜绿紫球藻、淡色紫球藻和紫球藻之间的平均遗传距离为0.455,其中铜绿紫球藻和淡色紫球藻之间的遗传距离为0.413,铜绿紫球藻和紫球藻之间的遗传距离为0.556,淡色紫球藻和紫球藻之间的遗传距离最小为0.396。所以由RAPD试验的分析结果可以得出:三种紫球藻为独立的种, 其中淡色紫球藻和紫球藻是亲缘关系较近的两个不同种。紫球藻属种间个体DNA多态性比较丰富,因此利用RAPD技术可以从DNA水平上检测紫球藻属种间差异。     

濒危植物夏蜡梅花的形态变异

研究了不同地理位置的3个夏蜡梅自然种群间以及种群内花部形态变异,并对3个种群进行聚类分析。结果表明：夏蜡梅花部表型性状在种群间和种群内都存在一定程度的变异;各性状总的平均变异系数在6.293（内瓣长）~46.90（花柄长）之间,种群间总的平均变异系数在13.430（DMS）~15.720 8（DLS）,因此认为夏蜡梅花的表型性状无论是在物种水平还是在种群水平都具有较丰富的表型多样性,其中又以大雷山种群最高;单因素方差分析显示：部分指标分化显著或极显著,13个指标在种群内的变异占了总变异的82.9%,这说明夏蜡梅种群内变异是表型变异的主要来源,由此可以推测遗传上的多样性是形成夏蜡梅花部形态变异的主导因素;种群间平均变异组分占了17.1%,表明花部形态在种群间存在一定程度的表型分化;聚类分析显示距离较近的大明山种群和龙须山种群先聚在一起,表型差异与地理距离之间存在显著正相关,经分析认为微生境的异质性和种群隔离以及遗传漂变均可能导致夏蜡梅种群间的表型分化;相关性分析显示部分性状之间存在显著的相关性。     

Genetic diversity of the tropical tree Terminalia amazonia (Combretaceae) in naturally fragmented populations

The effect of long-term fragmentation on the genetic diversity of populations of the neotropical tree species, Terminalia amazonia, was studied using random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis. Leaf material from 104 trees was collected from three naturally fragmented gallery forest patches and three plots in nearby continuous forest in the Mountain Pine Ridge, Belize. In total, 30 RAPD bands generated by five decamer primers were used to compare the genetic diversity of the six populations in the two groups. Genetic variation within the populations (H0), as estimated by the Shannon diversity index, ranged from 0.32 to 0.38, with an overall diversity of 0.38 (Hspecies). Analysis of molecular variation revealed that most (94.4%, P<0.001) of the variation was attributable to differences among individuals within populations. Population differentiation was significantly (P=0.038) lower among the fragmented populations than among continuous forest populations. On average, the fragmented populations also had slightly, but statistically significant (P=0.046) lower levels of genetic diversity. However, one gallery forest site had a higher level of genetic diversity than two of the continuous forest sites. We suggest that the long-term effect of fragmentation on the genetic diversity of tropical trees will depend upon the amount of local forest cover in proximity to the fragmented populations.     

木荷种群在演替系列群落中的遗传多样性

利用ISSR分子标记对木荷种群在3个演替系列群落中的遗传多样性进行了研究。12个随机引物共检测到203个可重复的位点,其中多态位点183个,总多态位点百分率（P）为90.15%,平均多态位点百分率为82.27%。Shannon信息指数（I）估算的总遗传多样性为0.524 4,平均为0.477 8。Nei指数（h）计算的总基因多样性为0.358 7,平均为0.326 5。3个种群的P、I、h大小顺序均为针叶林>针阔混交林>常绿阔叶林。AMOVA分子变异显示91.56%变异来源于种群内,8.44%变异来源于种群间。种群间的遗传分化系数（G_ST）为0.089 7,基因流（N_m）为5.073 1。种群间的遗传相似度平均为0.928 4,遗传距离平均为0.074 4,针叶林种群与针阔混交林种群遗传相似度最高。     

濒危植物南方红豆杉遗传多样性的RAPD分析

采用RAPD技术检测了山西南部南方红豆杉8个种群的遗传多样性。利用21个10聚寡核苷酸引物共检测出134个位点,其中多态性位点123个,占91.79%,8个种群的遗传多态位点百分率分别为67.16%(红豆峡)、67.91%(凤凰谷)、66.42%(小梯河)、66.42%(蟒河)、50.75%(历山西峡)、43.28%(云蒙山)、78.36%(长治宾馆)、50.75%(磨河)。南方红豆杉的遗传多样性分析结果显示：Shannon指数为2.180,其中31.7%的遗传多样性来自种群间,68.3%来自种群内;Nei指数为0.571,种群间的遗传分化系数(Gst)为0.181。8个种群间的遗传相似性分析结果显示：壶关红豆峡和陵川凤凰谷种群间的遗传距离最小(0.109 2),壶关红豆峡和陵川蟒河种群间遗传距离最大(0.55)。本研究结果揭示,南方红豆杉自然种群具有较高的遗传多样性,其遗传多样性不是导致该种群濒危的主要原因,导致南方红豆杉种群濒危的原因可能与南方红豆杉自然种群及群落所在生境的直接破坏及其本身生物学和生态学特性所导致的自然更新不良有着密切的联系。     

鄱阳湖区泥鳅遗传多样性研究

采用同工酶电泳、RAPD引物PCR扩增和线粒体DNA细胞色素b基因全序列3种方法,对鄱阳湖3种斑纹泥鳅的遗传结构进行分析。同工酶电泳显示3种斑纹泥鳅在LDH、MDH和EST这3种同工酶之间存在群体和组织差异;RAPD试验结果显示6条RAPD引物在18尾鄱阳湖泥鳅个体中共扩增出了169条不同分子量的RAPD标记,其中多态性带101条,多态性带的比例为59.56%,平均每个引物产生9.39条带和5.61条多态性带,不同斑纹泥鳅的遗传多样性指数显示3种斑纹泥鳅的遗传水平处于较高水平。以特异性引物进行PCR扩增,获得了1140bp的细胞色素b基因全序列。结果显示,3种不同斑纹泥鳅中检测出了1个共有单倍型和3个特有单倍型。与共有单倍型相比,大花斑泥鳅特有单倍型有91个变异位点,而小花斑泥鳅与无花斑泥鳅特有单倍型的变异位点为20和24个。基于单倍型构建的NJ树和MP树,显示大花斑泥鳅的特有单倍型EU145023处于独立的分支上,这反映出鄱阳湖地区不同斑纹的泥鳅之间在线粒体DNACytb基因中出现了一定距离的分化。