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一个高效表达,快速纯化大肠杆菌精氨酰—tRNA合成酶的 … 总被引:1,自引:0,他引:1
编码大肠杆菌精氨酸-tRNA合成酶的基因argS被克隆到pMFT7-5载体上。将此质粒转化的大肠 力JM109(DE3)中,该转化子粗抽液的比活是宿主菌的2500倍。通过DEAE-Sepharose CL-6B FastFlow和BlueSepharose CL-6B两步柱层析在一天内即可将精氨酰-tRNA合成酶纯化至电泳一条带,比活为36000u/mg,总收率可达69%。 相似文献
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用中国药品生物品检定所检定合格的国内外HBsAgEIA试剂及ABBOTT抗-HBs、抗-HBcEIA试剂,对所收集的13份HBsAg疑难判定血清进行检测,并用PCR方法检测血清中HBVDNA,结果显示国内外HBsAg试剂对部分HBVDNA阳性样品的检出率差异较大,提示这些样品可能为S基因突变株或HBsAg含量较低,因此,HBsAgEIA试剂的敏感度仍有待进一步提高,并应进一步研制检测S基因突变株的 相似文献
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地衣芽孢杆菌1Baciuus Licheniformis)BL-306产生的胞外β-甘露聚糖酶经硫酸铵分级盐析,DEAE-纤维素柱层析。Sephadex-G100柱凝胶过滤和DEAE-纤维素柱再层析分离纯化,得到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)均一样品。用SDS-PAGE测得纯化后β-甘露聚糖酶分子量为26000道尔顿。用凝胶等电聚焦电泳(PAGEIEF)测得等电点PI为5.0。该酶 相似文献
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离子对反相HPLC测定小鼠骨髓BFU—E,CFU—E中PRPP合成酶活性 总被引:2,自引:2,他引:0
采用离子对反相高效液相色谱法(IPrHPLC)的单液等度洗脱,测定了小鼠骨髓红系爆增性集落形成单位(BFU-Es)与红系集落形成单位(CFU-Es)的PRPP合成酶活性。方法学研究表明,加入离子对试剂硫酸氢四丁基铵(TBAHS)后,ADP谱峰分离完全,其反应增加量易于计算。本法的批内变异系数平均值为-2.30% ̄-1.06%与1.06% ̄2.30%,平均相对偏差为0.81% ̄1.74%,回收率为9 相似文献
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以Epstein-Barr病毒(EBV)DNA聚合酶为抗原,建立了简便、快速、敏感和特异的鼻咽癌诊断方法。构建原表达载体pRSET-DNA聚合酶及其亚克隆PRSET-A1和BL21(DE3)中表达的产物,经Western-blot检测其抗原性并用于检测鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)病人血清中的抗体。在DPC病人血清中存在抗EB病毒DNA聚合酶的IgG抗体,并证明 相似文献
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鸡减蛋综合征病毒(EDSV—76)基因组E1区结构特点分析 总被引:1,自引:0,他引:1
EDSV-76病毒中国株AA-2经常规方法提取其病毒DNA后,建立了限制性内切酶PstI水解片段的全基因文库。对其中PstI-G片段和PstI-A片段的正反链进行序列测定,获得EDSV E1区(0-8.8m.u)的核苷酸序列。经分析,EDSV E1区具有与其他腺病毒E1区类似的结构。以大于60个氨基酸残基为标准,EDSV E1区共有7个开放读码框架(ORF),其中R1、R2、ElbsT和E1b1T 相似文献