不同诱导培养基对糙皮侧耳液体发酵产漆酶活性的影响

利用1株糙皮侧耳Pleurotus ostreatus栽培菌株为材料,研究添加碱性木质素或者配合简单碳源或氮源后对其液体发酵产漆酶活性的影响。结果表明,不同诱导培养基对糙皮侧耳漆酶活性具有极显著的影响（P<0.001）,而且不同诱导培养基对糙皮侧耳菌丝生物量也产生了极显著的影响（P<0.001）。此外,只利用碱性木质素或者是再添加碳源葡萄糖均有利于糙皮侧耳产漆酶,既包括产漆酶酶活性的提升,同时也包括产漆酶时间的提前,但只利用碱性木质素诱导不利于菌丝生物量的积累;而富含简单碳/氮源的诱导培养基,无论是否含碱性木质素,均有利于菌丝生物量的积累,其中,富含简单碳/氮源的培养基中再添加碱性木质素后的菌丝生物量和漆酶活性均高于不添加碱性木质素时的菌丝生物量和漆酶活性。相比而言,含碱性木质素的培养基中测得的漆酶活性大部分时间下都要高于不含木质素的简单碳/氮源培养基,含碱性木质素的培养基对糙皮侧耳菌株产漆酶的诱导作用更强。     

不同碳氮源对花脸香蘑胞外酶活性的影响

以花脸香蘑Lepista sordida为材料,研究其分别在9种碳源和11种氮源液体培养条件下不同阶段pH值和葡萄糖浓度的变化,以及不同碳氮源对其所分泌的木质素过氧化物酶、羧甲基纤维素酶、锰过氧化物酶和漆酶活性的影响。结果表明,pH值在不同碳源培养后期变化显著（P<0.05）,而在不同氮源培养阶段无明显变化（P>0.05）,葡萄糖浓度和菌丝量在不同碳氮源中也无显著差异（P<0.05）。不同碳源和氮源培养基对花脸香蘑木质素过氧化物酶、羧甲基纤维素酶、锰过氧化物酶和漆酶活性均具有影响（P<0.05）。木糖和米糠有利于花脸香蘑分泌羧甲基纤维素酶（P<0.05）,红糖和牛肉浸膏有利于其分泌漆酶（P<0.05）,白砂糖和豆粉有利于其分泌锰过氧化物酶（P<0.05）,木糖和尿素有利于其分泌木质素过氧化物酶（P<0.05）。本研究为选择合适培养基以提高花脸香蘑生物转化效率提供了理论基础。     

不同碳氮源对糙皮侧耳木质纤维素酶活性的影响

以糙皮侧耳Pleurotus ostreatus为材料,研究简单碳氮源及木质素纯品诱导条件对其木质纤维素酶活性的影响。结果表明,不同的碳源培养基和氮源培养基对糙皮侧耳漆酶活性、羧甲基纤维素酶活性和木聚糖酶活性均具有极显著的影响（P<0.001）,且对糙皮侧耳菌丝生物量也有极显著的影响（P<0.001）。以蔗糖作主要碳源诱导物时,有利于提高糙皮侧耳漆酶活性;以果糖作主要碳源诱导物时,有利于提高糙皮侧耳羧甲基纤维素酶活性和菌丝生物量的积累;以葡萄糖作主要碳源诱导物时,有利于提高糙皮侧耳木聚糖酶活性。以酵母浸粉作主要氮源诱导物时,有利于提高糙皮侧耳漆酶活性和菌丝生物量的积累;以硝酸钾作为主要氮源诱导物时,有利于提高糙皮侧耳羧甲基纤维素酶活性;以硫酸铵作为主要氮源诱导物时,有利于提高糙皮侧耳木聚糖酶活性。碱性木素的存在,有利于提高糙皮侧耳漆酶活性,但不利于菌丝生物量的积累。与此同时,碱性木素的存在对糙皮侧耳羧甲基纤维素酶和木聚糖酶活性并没有促进作用。     

不同栽培基质对糙皮侧耳不同发酵方式下产漆酶活性的影响

为了比较糙皮侧耳栽培种在不同常规栽培基质上的漆酶活性,分析更适合糙皮侧耳生长的栽培基质,以1株糙皮侧耳Pleurotus ostreatus栽培菌株为研究材料,研究在固态和液态发酵条件下添加木屑、玉米芯和棉籽壳这3种栽培基质后,对其产漆酶活性的影响。结果表明,不同栽培基质对糙皮侧耳漆酶活性具有极显著的影响（P<0.001）;不同发酵方法对糙皮侧耳漆酶活性也具有极显著的影响（P<0.001）,仅第2天差异不显著。固体发酵与液体发酵条件下,糙皮侧耳在棉籽壳培养基上所检测到的漆酶活性均高于在木屑或者玉米芯培养基上,表明棉籽壳对提高糙皮侧耳漆酶活性的诱导能力更强。此外,糙皮侧耳在棉籽壳培养基上能够快速分泌漆酶,表明棉籽壳对缩短糙皮侧耳漆酶分泌时间的诱导能力更强。     

香栓菌提取物的止咳化痰作用及耐缺氧药理活性研究

本文分别采用浓氨水引咳法、酚红排秘法、常压耐缺氧法、对抗亚硝酸钠中毒性缺氧法,心肌缺血性缺氧法,探讨香栓菌子实体不同极性提取物的止咳化痰及其耐缺氧药理活性。将雄性小鼠随机分组（每组10只）,分别为阴性对照组（NCG）、阳性对照组、香栓菌石油醚提取物低TSPEE(L) 0.025g/kg、中TSPEE(M) 0.05g/kg、高TSPEE(H) 0.1g/kg剂量组、香栓菌水提物低TSWE(L) 0.5g/kg、中TSWE(M) 1.0g/kg、高TSWE(H) 2.0g/kg剂量组。小鼠的检测指标包括咳嗽潜伏期、咳嗽次数、咳嗽抑制率、止咳活性（%）、酚红排泌量、化痰率（%）、常压条件下耐缺氧存活时间、亚硝酸钠中毒存活时间、急性脑缺血性存活时间及血清中SOD、MDA、IL-2、IL-4、IgG含量。结果表明,TSPEE(L)无明显效果;TSPEE(M)具有显著化痰作用（P<0.05）;TSPEE(H)可延长急性脑缺氧存活时间（P<0.05）,并提高SOD、IL-2、IL-4、IgG含量,降低MDA含量（P<0.05）;TSWE(L)可增强咳嗽抑制率并增强止咳活性,同时延长常压条件下缺氧存活时间（P<0.05）;TSWE(M)除中毒性脑缺氧试验外均具有显著性作用（P<0.05）;TSWE(H)可增强咳嗽抑制率、提高止咳活性、增加亚硝酸钠中毒存活时间（P<0.05）,同时增加常压条件和急性脑缺血条件下缺氧存活时间（P<0.01）并且提高SOD、IL-2、IL-4、IgG含量,降低MDA含量（P<0.01）。综上所述,香栓菌子实体石油醚提取物和水提取物具有止咳化痰及耐缺氧作用。     

光照和培养基对内生真菌棘豆链格孢Alternaria oxytropis苦马豆素含量的影响

以小花棘豆内生真菌棘豆链格孢Alternaria oxytropis野生株OW7.8及其酵母氨酸还原酶基因缺失突变株M1为材料,研究它们在不同培养基上和不同光照下菌落生长速率与苦马豆素含量。结果表明：OW7.8在胡萝卜葡萄糖琼脂培养基上暗培养时生长速度最快,为(2.57±0.17)mm/d,而M1则在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上暗培养时生长速度最快,为(4.93±0.10mm)/d。不同培养基和光照条件下,相同菌株苦马豆素的含量差异不显著（P>0.05）;不同菌株在相同培养条件下其苦马豆素含量差异显著（P<0.05）。     

灰树花孔菌超微粉体内抗肿瘤作用研究

通过研究肿瘤抑制率、脏器指数、肿瘤切片的观察以及血清中影响因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）和超氧化物歧化酶（SOD）等指标的变化对比分析灰树花孔菌 Grifola frondosa子实体粗粉及灰树花孔菌子实体超微粉对Hep-A-22荷瘤小鼠体内抗肿瘤和免疫调节作用。结果表明,各剂量组分均具有抑制肿瘤生长作用,其中灰树花孔菌超微粉高剂量组（1 500mg/kg）抑瘤效果最佳,与模型组比较有极显著性差异（ P<0.01）。通过HE染色后的肿瘤细胞可观察到坏死面积增大,同时该组血清中IFN-γ、IL-2、VEGF、GSH-PX和SOD含量显著增加（ P<0.01或 P<0.05）,并与抑制肿瘤具有一定相关性。     

碳源和氮源对彩绒革盖菌Coriolus versicolor木质纤维素酶和木质素酶分泌的影响

研究了彩绒草盖菌在不同碳源和氮源培养基中生长时,对纤维素酶、半纤维素酶、木质素酶（漆酶、多酚氧化酶、愈创木酚氧化酶）分泌的影响。结果表明不同碳源和氮源对酶类的分泌影响很大,富含淀粉的物质能明显促进木质素酶的分泌,而专一性底物（纤维素和半纤维素）对纤维素酶和半纤维素酶有诱导作用,麸皮也能诱导半纤维素酶的产生。     

利用农业废弃物生产嗜热真菌(T.lanuginosus)耐热木聚糖酶的固体发酵研究

研究了嗜热真菌(Thermomyces lanuginosus CBS288.54-M18)生产木聚糖酶的碳氮源组成、料水比、培养基初始pH值、发酵温度及接种量等的影响.结果表明,以麦麸和玉米芯粉(8:2)作为复合碳源,酵母膏和胰蛋白胨(1:1)作为复合氮源时,菌株所产的木聚糖酶量相比未优化碳氮源的培养基提高幅度高达200%.其最佳产酶的料水比为1:3,培养基初始pH 7.0为最适.菌株在50℃条件下发酵5 d,能够得到活力高达15023 U/g干基碳源的木聚糖酶制剂,且该酶制剂不合纤维素酶和蛋白酶活性.     

层孔菌产漆酶的摇瓶最适培养条件研究*

筛选到一株高产漆酶的层孔菌W-1 ,对其液体产漆酶的培养条件进行了优化 ,确定了最适的碳源、氮源 ,并用正交试验确定了培养基中碳源和氮源的浓度。在最优化的培养条件下 ,培养 7d后 ,W-1产生的漆酶活力可以达到 7.1U/mL。采用补料的方法 ,可以得到大量的漆酶粗酶液。     

金针菇HMG-box转录因子鉴定及一个候选基因的差异表达分析

食用菌的原基形成受到环境因子和内源基因的共同调控,转录因子在其生长发育过程中能够起到关键作用。本研究在已测序金针菇单核菌株L11全基因组中鉴定到29个高速泳动蛋白（high-mobility-group box,HMG-box）转录因子编码基因。基于金针菇双核菌株H1123各发育时期转录组数据,筛选到一个与金针菇原基形成相关的HMG-box转录因子基因Fv-hmg。通过同源比对发现Fv-hmg的DNA序列在6个不同金针菇菌株中十分保守,一致性为98.38%,有92个SNP位点。克隆分析表明,该基因长度为1 517bp,含有一个内含子。该基因编码489个氨基酸残基的蛋白序列,含有一个HMG-box结构域。通过实时荧光定量PCR和转录组测序共同分析表明,该基因在金针菇原基时期的表达量比双核菌丝时期高达4倍以上,具有显著性差异（P<0.01）,由此推测该转录因子参与调控金针菇的原基形成。HMG-box转录因子Fv-Hmg在金针菇原基形成过程中的作用仍需进一步研究。     

土壤和植物对冬虫夏草寄主昆虫规模化饲养的影响

冬虫夏草大量人工培植的关键之一是寄主昆虫的规模化饲养,本文对西藏林芝地区冬虫夏草生境中不同土壤基质在室内对蝙蝠蛾幼虫生长的影响以及寄主幼虫对5种植物的取食行为、嗅觉反应进行了系统研究。结果表明蝙蝠蛾幼虫偏好土质疏松、渗透性好的土壤,土壤因子中湿度和有机质含量与蝙蝠蛾幼虫存活率成正相关。蝙蝠蛾3龄幼虫对适生地植物的取食选择性与嗅觉反应趋性顺序为鹅绒委陵菜>珠芽蓼>小大黄>圆穗蓼>羊角天麻;进一步Spearman相关分析显示,幼虫对各植物的选择系数与可溶性糖（R=0.850,P<0.05）和粗蛋白（R=0.898,P<0.05）都存在显著的正相关关系,而与粗纤维（R=-0.952,P<0.05）有着显著的负相关关系,与粗灰分（R=-0.391,P=0.516）之间没有显著的相关关系;取食鹅绒委陵菜、珠芽蓼后的幼虫单头虫重显著大于取食其他植物的幼虫。这一研究结果为冬虫夏草寄主昆虫规模化饲养提供了理论依据。     

Influence of cultivation conditions on production of lignocellulolytic enzymes by Ceriporiopsis subvermispora

The aim of this work was to make a survey describing factors that influence the production of extracellular enzymes by white-rot fungus Ceriporiopsis subvermispora responsible for the degradation of lignocellulolytic materials. These factors were: carbon sources (glucose, cellulose, hemicellulose, lignin, maltose and starch), nitrogen sources (ammonium sulphate, potassium nitrate, urea, albumin and peptone), pH, temperature and addition of three different concentrations of Cu²⁺ and Mn²⁺. The cellulase and xylanase activities were similar in medium with different carbon sources and the highest cellulase and xylanase activities were measured in medium with urea and potassium nitrate as nitrogen sources, respectively. The highest laccase activity was observed in medium with lignin and peptone as carbon and nitrogen sources. In other experiments, time course of production of lignocellulolytic enzymes by white-rot fungus C. subvermispora in medium with lignin or glucose as carbon sources was observed.     

Use of Pleurotus dryinus for lignocellulolytic enzymes production in submerged fermentation of mandarin peels and tree leaves

It has been shown that the wood-rotting mushroom Pleurotus dryinus IBB 903 is able to effectively produce cellulases, xylanase, laccase, and manganese peroxidase in submerged fermentation of mandarin peels and tree leaves. Gradual increasing of lignocellulosic substrates concentration from 1 to 4–6% enhanced enzyme accumulation in culture liquid. A simple and inexpensive medium containing mandarin peels and yeast extract as sole carbon and nitrogen sources allowed simultaneous production of high levels of both hydrolases and oxidases by P. dryinus IBB 903. Supplementation of this medium by copper and manganese caused earlier and faster accumulation of laccase and manganese peroxidase increasing their yield by 1.5 and 7.5 times, respectively. In addition, by adding manganese to the medium it is possible to regulate the ratio of laccase and MnP in enzyme preparation. The presence of lignocellulosic substrate is the requisite for MnP production by P. dryinus IBB 903 since there was no production of MnP when mushroom has been cultivated in the synthetic medium with different carbon source. Among carbon source tested only utilization of glucose resulted to 21-fold increase of fungus laccase specific activity compared to control medium without carbon source. Carboxymethyl cellulase and xylanase appeared to be inducible enzymes.     

绍兴黄酒酒药中酵母菌的物种资源

酒药是绍兴黄酒酿造中使用的重要糖化发酵剂。2013年绍兴黄酒冬酿期间,从绍兴地区5个主要黄酒生产企业,采集古越龙山、会稽山、塔牌、沈永和、女儿红及鉴湖等6个品牌酒药样本,在数量、种类和分布规律等方面对黄酒酒药内酵母菌物种资源进行了系统研究。研究发现,会稽山酒药和沈永和酒药蕴含酵母菌数量较多而且与其他样本相比差异显著（P<0.01）,而塔牌酒药中酵母菌数量显著少于其他5个品牌（P<0.05）。遵循酵母菌分类原则,从绍兴黄酒酒药中分离鉴定出3种酵母菌,扣囊复膜孢酵母Saccharomycopsis fibuligera、酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae和隐球酵母Cryptococcus sp.。其中,扣囊复膜孢酵母Saccharomycopsis fibuligera在6个品牌黄酒酒药内的分布占有绝对优势,该种酵母菌可能对绍兴黄酒酒药的生产性能来说至关重要。比较分析酒药中酵母菌物种资源,可以为阐明绍兴黄酒的发酵机制提供基础数据和理论基础。