湿热预处理对刺芹侧耳蛋白质理化性质、结构和功能特性的影响

以刺芹侧耳Pleurotus eryngii蛋白为研究对象,分别将其在50℃、60℃和70℃下热处理0至30min,探讨了湿热处理对刺芹侧耳蛋白理化性质、结构和功能特性的影响.结果表明,湿热处理后刺芹侧耳蛋白的疏水性先升高后降低(P＜0.05),总巯基含量先降低后升高(P＜0.05),此外,刺芹侧耳蛋白二级结构受到影响...     

刺芹侧耳生长条件和栽培特性的研究

对刺芹侧耳[Pleurotus eryngii(DC.ex Fr.)Quel]生长条件与栽培特性进行了分析.结果表明:刺芹侧耳菌丝生长的适宜pH值为pH 5～pH 7,最适pH值为pH 6;黑暗环境有利于菌丝生长,光照对菌丝生长具有抑制作用;菌丝生长适宜的碳源为可溶性淀粉、葡萄糖和蔗糖,适宜的氮源为蛋白胨和钼酸铵,葡萄糖和蛋白胨的适宜浓度分别为50和1 g·L-1;在马铃薯黄豆粉培养基、黄豆粉玉米粉培养基和马铃薯蛋白胨培养基中可较好地形成菌丝球.采用液体菌种栽培,菌丝的生长速度比使用玉米固体菌种快,其中用马铃薯黄豆粉液体菌种栽培,菌丝生长最快;使用马铃薯蛋白胨液体菌种在木屑棉籽壳混合培养料中栽培,可获得菌柄长菌盖大的子实体,而且产量高.     

刺芹侧耳三个新品种的选育报告

刺芹侧耳新品种‘杏天农1号’是以‘日引1号’和‘Pl.e0209’为亲本,通过单单杂交获得。该品种菌盖颜色为浅灰色,形状为凹面型,菌柄洁白,形状是保龄球形。商品性状好,抗病性与对照相当,产量较高。刺芹侧耳新品种‘杏天农2号’是以‘日引1号’为亲本,通过多孢自交选育获得。该品种菌盖颜色为浅灰色,形状为凹面型,菌柄短、米白色、产量高且栽培周期较短。子实体直筒形,硬度大,菌柄结实。耐贮藏、耐运输,抗病性与对照相当。刺芹侧耳新品种‘农嘉杏1号’是以‘日引1号’为亲本,通过单单杂交获得。该品种菌盖颜色为浅灰色,形状为球面型,菌柄为白色、子实体形状是直筒形,商品性状好。     

刺芹侧耳谷氨酰胺合成酶编码基因克隆和表达分析

谷氨酰胺合成酶（GS）是真菌氮素同化代谢和谷氨酸合成中的关键酶,采用3’RACE和5’RACE实验技术,克隆获得刺芹侧耳（杏鲍菇）谷氨酰胺合成酶编码基因（PE-GS）全长序列,长度为1 271bp,具有4个内含子和5个外显子,编码353个氨基酸残基。系统进化树分析表明,刺芹侧耳PE-GS与糙皮侧耳GS在分子进化关系上相近。通过real time RT-PCR方法对PE-GS基因在刺芹侧耳基质菌丝体和子实体中的表达情况进行了分析,结果表明,刺芹侧耳PE-GS基因在子实体具有较高的表达水平,这暗示刺芹侧耳PE-GS基因在子实体的氮素代谢中可能承担重要功能。     

刺芹侧耳菌渣对肺形侧耳（秀珍菇）生长和营养成分的影响

以常规棉籽壳培养料为对照,用刺芹侧耳Pleurotus eryngii工厂化生产的废料（简称菌渣）代替部分棉籽壳进行格氏侧耳Pleurotus geesterani栽培试验,并测定格氏侧耳的营养成分。结果表明,供试培养料中菌丝长势均良好,随着菌渣替代比例的增加,菌丝满袋时间、原基出现时间和转潮期缩短,生长周期变短;菌渣代替比例增加,产量呈降低趋势,其中替代比例33%（1:2）和55%（1.2:1）时培养料的生物学效率与对照无显著差异,替代比例55%和78%（3.5:1）时培养料对第四潮和第五潮菇产量影响明显,显著低于对照;供试菌渣培养料栽培格氏侧耳的粗蛋白和总氨基酸含量略高于或显著高于对照,说明添加适量的菌渣栽培格氏侧耳可提高子实体的营养成分。     

刺芹侧耳产漆酶条件优化及对偶氮染料甲基橙的脱色

漆酶是一种含铜的单电子多酚氧化酶,能够催化氧化各种酚类及多种染料,在处理染料废水方面具有巨大的潜力。刺芹侧耳Pleurotus eryngii具有较强的产漆酶能力,但漆酶产量在较大程度上受环境条件限制。本文研究了氮源含量、pH、温度、金属离子等环境条件对刺芹侧耳产漆酶能力的影响,优化了其产漆酶条件,并用其粗酶液对典型偶氮类染料甲基橙进行脱色,结果表明,在氮源0.5%（W/W）、pH 5.5、温度28℃、添加5.0mmol/L Mg ²⁺的培养条件下,刺芹侧耳产漆酶能力最强,培养6d时,漆酶酶活可达78.0U/L。用优化培养的刺芹侧耳粗酶液对偶氮染料甲基橙进行脱色,28h后脱色率可达90%,脱色反应为准一级动力学反应,甲基橙并未完全矿化,而是生成小分子中间产物。     

富硒刺芹侧耳硒肽的提取工艺及其抗氧化活性

硒是人体必需的微量元素之一,可以通过硒蛋白或硒肽在人体内发挥生理功能。本研究以富硒刺芹侧耳子实体为原料,采用碱提酸沉法获得硒蛋白,进而通过单因素试验,筛选出最优的酶解条件,并在此基础上,进一步使用Box-Behnken设计试验组合,优化硒肽的提取工艺。再从1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2'-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)[2,2'-azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonicacid),ABTS]自由基、羟自由基(·OH)及铁还原/抗氧化能力(ferricionreducingantioxidantpower,FRAP)这4个指标,将其与普通多肽进行比较分析。结果表明：当酶添加量8 000 U/g,酶解温度60℃,酶解时间73 min,在此工艺条件下提取的硒肽硒含量达226.33 mg/mL。富硒刺芹侧耳子实体硒肽在DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、羟自由基清除率及FRAP总抗氧化能力均优于普通多肽的抗氧化特性,推测是由于硒含量与多肽具有协同增效作用,从而增强硒肽的抗氧化活性。研究结果为富硒刺芹侧耳子实体硒肽的制备及应用提供依据。     

刺芹侧耳芳基醇氧化酶的分离纯化及其酶学性质

分离纯化刺芹侧耳Pleurotus eryngii芳基醇氧化酶,并探究其酶学性质。通过硫酸铵盐沉、DEAE-Sepharose Fast Flow弱阴离子交换层析、Sephacryl S-200 High Resolution凝胶过滤层析和Source 15Q强阴离子交换层析,得到纯化的单一酶。经肽指纹图谱鉴定,确定其为芳基醇氧化酶,酶活回收率25.5%,纯化倍数38.2。结合SDS-PAGE和IEF-PAGE分析,确定其分子量和等电点分别为70kDa和4.2。以藜芦醇为底物,该酶最适反应pH为6.0,最适反应温度为70℃,金属离子Zn²⁺、Fe²⁺和Cu²⁺对芳基醇氧化酶的活性抑制作用明显,K_m和V_max分别为0.921mmol/L和80U/mg。     

木屑添加对刺芹侧耳菌丝共生细菌多样性和群落结构的影响

细菌作为许多真菌的共生菌,能够有效地促进真菌的代谢生长,而细菌多样性及群落结构能够反映真菌的生长和利用营养物质的状况。本研究利用基于细菌16S rRNA基因V3-V4区的高通量测序技术分析不同木屑用量对刺芹侧耳菌丝共生细菌群落结构和多样性的影响。结果表明:5组样品共检测细菌25门52纲114目199科406属,主要的优势菌门为变形菌门(35.0%～85.9%)和厚壁菌门(6.5%～38.4%),优势菌属为不动杆菌属(14.8%～71.6%)和假单胞菌属(1.7%～22.3%)。相较于完全培养基,添加木屑能够提高刺芹侧耳菌丝中的细菌多样性,并使其中优势细菌10个门类、9个属类结构发生显著变化。刺芹侧耳菌丝在5 g木屑培养基上的菌丝生长速度最快,菌丝浓密,边缘整齐,长势优于其他几类培养基;假单胞菌属和乳酸菌属丰度及物种多样性在5 g木屑培养基上都具有一定的优势,且假单胞菌属和乳酸菌属丰度与菌丝长势具有显著的正相关性。木屑作为重要碳源之一,对刺芹侧耳生长发育及其共生细菌群落结构和多样性都有显著影响,这为进一步探索木屑及共生细菌对刺芹侧耳生长发育影响的机理研究奠定了基础。     

刺芹侧耳菌丝体固体发酵多糖在斑马鱼模型上的降血脂活性

高脂血症是诱导脂肪肝、高血压、动脉粥样硬化和心脑血管疾病的一个关键风险因素。本课题组前期研究已经在细胞水平、小鼠和斑马鱼动物模型上证实,刺芹侧耳多糖具有抑制体内脂质积累的生物活性。本文利用农林废弃物玉米芯和麦麸作为主要培养原料,通过固体发酵获得刺芹侧耳菌丝体多糖PESF（polysaccharide from Pleurotus eryngii mycelium solid-state fermentation）;进而,采用斑马鱼幼鱼和成鱼高脂动物模型,研究了刺芹侧耳菌丝体多糖在动物体内的降脂效率并解析了可能的降血脂途径和机理。实验结果证实,剂量400μg/mL的PESF不仅可显著抑制高脂饮食引起的斑马鱼幼鱼体内脂质积累,而且也可以有效抑制高脂饮食下斑马鱼成鱼的肝脏和肠道组织内的脂质积累,证实刺芹侧耳多糖具有显著抑制动物体内脂质积累的活性。这些结果建议,刺芹侧耳多糖降血脂的途径可能是通过降低肠道对脂类物质的吸收,从而减少了脂滴在肝脏中的积累。因此,本研究建议刺芹侧耳多糖具有开发成为降脂食品添加剂或者降脂药物原料的潜力。     

四个杏鲍菇品种的氨基酸分析与比较

测定了4个杏鲍菇新品种子实体的氨基酸含量,结果表明,4个新品种的子实体中含有丰富的8种人体必需氨基酸、支链氨基酸和带有胍基的精氨酸,而芳香族氨基酸的含量却很低。在测定过程中,由于采用了酸水解,子实体中的色氨酸被破坏,而其余17种氨基酸均被测出,含量极其丰富。尤其是精氨酸、谷氨酸的含量接近于α-酪蛋白、卵蛋白和大豆球蛋白。     

杏鲍菇抗烟草花叶病毒蛋白的筛选

采用离子交换层析和凝胶层析方法,从杏鲍菇干样中分离得到多个蛋白组分,经枯斑寄主检测,发现多个蛋白组分都有抗烟草花叶病毒(TMV)的活性,对TMV的抑制率均在70%以上,高者可达99%。其中xb68Ab已得到了纯化,分子量约为23.7kD,在心叶烟和苋色藜上它对TMV侵染的抑制率分别达到99.43%和98.9%。     

新疆阿魏菇与杏鲍菇中氨基酸含量的分析研究

对新疆阿魏菇与杏鲍菇的氨基酸成分进行系统分析,结果显示新疆本地的阿魏菇和杏鲍菇中17种氨基酸含量丰富,种类齐全,阿魏菇中氨基酸总量为16.80%高于杏鲍菇中氨基酸总量(14.34%);两种菇中必需氨基酸含量(EAA)占总氨基酸含量的比例分别为34.72%和37.92%。新疆阿魏菇与杏鲍菇种富含人体必需的氨基酸,可作为饮食氨基酸来源的重要补充。     

合成生物学驱动下高质量酵母蛋白的研究进展

酵母蛋白作为一种新质蛋白;其必需氨基酸含量高、分布理想且富含支链氨基酸;同时兼具环境可持续性;有效缓解了蛋白质资源短缺及环境压力等问题。目前;在合成生物学技术的驱动下;酵母蛋白在食品工业领域得到了快速发展。本文系统介绍了酵母蛋白的营养组成与功能特性;重点阐述了通过自然界筛选、诱变筛选、适应性实验室进化、理性改造及发酵工艺优化等策略实现高产酵母蛋白的目标。在此基础上;讨论并总结了修饰改性技术对酵母蛋白物化特性与结构的影响。未来;可通过开发高效精准的高通量筛选技术;深入解析蛋白合成的关键基因及其调控网络;实现对酵母菌株的定向调控;同时优化发酵工艺参数;开发有效的蛋白改性技术;以促进酵母蛋白在食品、饲料等领域的广泛应用。     

基于ITS序列分析对杏鲍菇菌种的鉴定

采用拮抗实验和ITS序列分析结合的方法,对供试的20株菌株进行了分析。ITS序列分析结果表明,供试菌种的ITS序列长度为624 bp,与GenBank数据库中杏鲍菇菌种的ITS序列相似度为99%以上,在种的水平上证明供试菌种为杏鲍菇,同时构建的系统发育树将供试菌种聚在了4个类群。