Synthesis of 27-Oxo, 27-Hydroxymilbemycins A3 and A4 and Novel 27-Alkoxymilbemycins A3 and A4 from Milbemycins A3 and A4 and…

27-Oxomilbemycins A₃ and A₄ and 27-hydroxymilbemycins A₃ and A₄ were identified as metabolites in soil metabolism studies of milbemycins A₃ and A₄. Chemical derivation methods were developed to synthesize 27-oxomilbemycins A₃ and A₄ and 27-hydroxymilbemycins A₃ and A₄ from milbemycins A₃ and A₄. In addition, 27-alkoxymilbemycin derivatives were also synthesized from the same precursors. Some of the synthesized compounds displayed satisfactory acaricidal activity against the organophosphorus-sensitive two-spotted spider mite (Tetranychus urticae), but did not have superior activity to corresponding milbemycins A₃ and A₄.     

DF-6 P3A型超声波粉碎机 DF-6P3A型智能超声波粉碎机

简讯 宁波师范学院实验总厂是浙江省教委、宁波市教委下属研究、生产生化仪器和教学仪器的科技实体,技术力量雄厚,质量检验手段先进,产品结构合理,性能可靠,并取得省科技部门和省教仪公司鉴定。该厂生产的超声波粉碎机是利用强超声在液体中产生空化效应原理,对生物材料等物质进行超声处理的多功能、多用途仪器,用于粉碎细胞、乳化、分散、提取、匀化、消泡、清洗及加速化学反应等,是生物、化学、农林、医药、食品、环保、卫生、能源等领域的得力工具。目前可供施种类型的超声波粉碎机。     

黑曲霉A3木聚糖酶固体发酵研究

筛选了一株高产木聚糖酶的黑曲霉Ａ３菌株,研究了其在固体培养基中的发酵条件。该菌最适培养条件为：起始ｐＨ４．６。２８℃,１ｍｌ孢子悬液接种量,蔗渣粉：麸皮为１．５：１,发酵３天,木聚糖酶活力可达５１４７ＩＵ／ｇ培养基干重。氮源组成,温度、ｐＨ及发酵时间对曲中木聚糖酶和纤维素酶的比例有较大影响。与液体发酵相比,粗酶的最适反应温度均为５５℃,最适反应ｐＨ值分别为４．６和４．２,在不同温度下保温１ｈ,测得     

A New Synthesis of 2′,3′-Didehydro-3′-deoxy-3-Alkylthymidine

Abstract

The preparation of 3-alkyl D4T derivatives has been carried out starting from the corresponding 5′-O-t-butyldimethylsilyl-3′-O-methanesulfonylthymidine 2 by way of deprotection-elimination and succesive alkylation reactions.     

利用~1H-NMR模拟谱研究三核苷酸A3′P(CH_3)5′A3′P(CH_3)5′A的构象性质

根据Altona等人的方法.利用~1H—NMR模拟谱分析了A3′P(CH_3)5A3′P(CH_3)5′A的三种非对映异构体:a、b和C的构象状态.发现:在室温下三个核糖环都是S型构象占优势(X_N≤0.44),而且随温度升高S型构象成分增多;两个二核苷酸片段-PAPA和APAP-的磷酸骨架扭角分别与A3′P(CH_3)5′A两种异构体a或b数值接近.差值约5°左右;二核苷酸片段中核糖环的重叠程度与手性磷原子的构型有关、R构型比S构型的核糖环重叠程度小;从而推测,A3′P(CH_3)5′A3′P(CH_3)5′A各种非对映异构体的稳定性为RR>RS.SR>SS,与化学合成中所见相符合.     

CYP3A4基础与临床研究进展

细胞色素P4503A4(CYP3A4)是存在人类肝脏及肠道中的一种主要的细胞色素CYP450酶,约占成人肝脏CYP450酶总量的25%左右。临床中约有50%的药物是通过其代谢,并且其基因位点突变也与其多种疾病相关,知晓CYP3A4的表达水平和不同功能的遗传学基础,无论是对疾病的发病基础、临床药物的应用,会带来前所未有的启发,在药物应用过程中,通过对基因组学的认识,从而可以在基因层面了解个体代谢差异产生的原因,调整药物用量,提高疗效,最终使药物副作用降到最低限。目前对CYP3A4的研究渐趋于成熟,已逐渐阐明了其药物间相互作用的机制,它能够被多种药物竞争性抑制或者诱导,并受到某些蛋白受体的调控影响,可改变药物的药代动力学,增强或降低药效,造成个体用药差异,这也是造成药物间相互作用的重要原因。然而CYP3A4基因多态性与基因导向治疗关系,还有待进一步深入研究。该文对CYP3A4基因多态性、分布以及与临床疾病及用药的研究现状作一综述。     

黑曲霉A3木聚糖酶酶学性质研究

黑曲霉Ａ３（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ Ａ３）的固体培养物浸出液,经过多步分离纯化后,获得三个组份的木聚糖酶,称为ｘⅠ、ｘⅡ和ｘⅢ。经７％凝胶浓度的盘状电泳分析均为单一组份。经等电聚焦电泳测ｘⅠ、ｘⅡ和ｘⅢ。的等电点分别为６．８、５．５和６．１。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得亚基分子量（Ｄａ）分别为ｘⅠ,４２０００;ｘⅡ,２００００;ｘⅢ,３１０００。三个酶组份的最适反应温度分别为ｘⅠ,４０℃;ｘⅡ     

黑曲霉A3木聚糖酶酶学性质研究

黑曲霉A3(AspergillusnigerA3)的固体培养物浸出液,经过多步分离纯化后,获得三个组份的木聚糖酶,称为xⅠ、xⅡ和xⅢ.经7%凝胶浓度的盘状电泳分析均为单一组份.经等电聚焦电泳测xⅠ、xⅡ和xⅢ的等电点分别为6.8、5.5和6.1.SDS-PAGE测得亚基分子量(Da)分别为xⅠ,42000;xⅡ,20000;xⅢ,31000.三个酶组份的最适反应温度分别为xⅠ,40℃;xⅡ,50℃;xⅢ,50℃.最适反应pHxⅠ,3.5;xⅡ,4.5;xⅢ,5.0.保温一个小时后,酶的半失活温度分别为xⅠ,55.6℃;xⅡ,54.8℃;xⅢ,46.6℃.金属离子Ag+、Hg2+、Ni2+和脲对不同的酶组份具有一定的影响.     

Synthesis of 3′-Acetamidoadenosine Derivatives as Potential A3 Adenosine Receptor Agonists

On the basis of high binding affinity of 3′-aminoadenosine derivatives 2b at the human A₃ adenosine receptor (AR), 3′-acetamidoadenosine derivatives 3a–e were synthesized from 1,2:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose via stereoselective hydroboration as a key step. Although all synthesized compounds were totally devoid of binding affinity at the human A₃AR, our results revealed that 3′-position of adenosine can only be tolerated with small size of a hydrogen bonding donor like hydroxyl or amino group in the binding site of human A₃AR.     

Nogo A和srGAP蛋白在NIH 3T3细胞中的共表达

为检测Nogo A和srGAPs蛋白在NIH 3T3细胞上的表达,应用Western印迹的方法检测Nogo A蛋白的表达. 从NIH 3T3细胞抽提物中检测到约230 kD特异性的Nogo A反应条带;利用双重免疫细胞荧光化学标记法和激光共聚焦显微镜成像技术分别检测Nogo A与srGAPs或Rho蛋白在NIH 3T3细胞上的共表达状况,可观察到Nogo A与srGAPs共存于3T3细胞的细胞浆、突起和生长锥样结构上,亦可观察到Nogo A与Rho蛋白的共存.结果表明,NIH 3T3细胞中共表达Nogo A、srGAPs和Rho分子. 这为研究Nogo A与Rho信号转导途径间的关系奠定了基础.     

CYP3A基因表达与调控的分子机制

Ｐ４５０３Ａ是参与药的氧化代谢的重要酶系,在肝脏及肠道中含量丰富。人体内参与药物代谢的ＣＹＰ３Ａ亚系为ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ３Ａ５、ＣＹＰ３Ａ７。其中ＣＹＰ３Ａ７主要存在于胚胎肝脏。ＣＹＰ３Ａ的主要调控位于５端,其中某些转录调控因子结合位点与ＣＹＰ３Ａ在组织中的特异性表达有关。５端有两个特殊结构ＮＦＳＥ与ＨＦＬａＳＥ分别为ＣＹＰ３Ａ４与ＣＹＰＡ３Ａ７所独有,可能与基分别在成人及胚胎计中的特异性表达有     

A deletion mutation in the βA1/A3 crystallin gene (CRYBA1/A3) is associated with autosomal dominant congenital nuclear cataract in a Chinese family

Congenital cataracts are an important cause of blindness worldwide. In a family of Chinese descent, a dominant congenital nuclear cataract locus was mapped to chromosome 17q11.1-12. The maximum LOD score, 2.49, at recombination fraction 0, was obtained for marker D17S1294. The results of both linkage and haplotype analyses defined a disease-gene to an 11.78-cM region harboring the gene coding for A1/A3 crystallin (CRYBA1/A3). Mutation analysis of the CRYBA1/A3 gene identified a 3-bp deletion in exon 4, which cosegregated with the disease risk in this family and was not observed in 100 normal chromosomes. This mutation resulted in the deletion of a highly conserved glycine at codon 91 (G91) and could be associated with an incorrect folding of A1/A3 crystallin. It highlights the physiological importance of crystallin and supports the role of CRYBA1/A3 in human cataracts formation.Y. Qi and H. Jia contributed equally to this work     

金川牦牛HIF-3A克隆及生物信息学分析

[目的]克隆金川牦牛低氧诱导因子-3A(HIF-3A)并进行生物信息学的分析。[方法]采用PCR方法从金川牦牛血液中克隆出HIF-3A,通过生物学软件Protparam、SOPMA、ProtScale、NetPhos、SignaIP、TMHMM、PSORTⅡ、Protfun2.2对核酸序列以及蛋白进行分析。[结果]金川牦牛HIF-3A长度为513 bp、ORF为441 bp、一共编码氨基酸146个,相对分子质量为15 729.19 Da,和普通牛的CDS区有8个碱基不同,突变了5个氨基酸,预测无跨膜区域,不存在信号肽序列,主要位于细胞质与线粒体中,有β-转角和α-螺旋。在同源性比较中与牛的同源性达到了97.5%,与其他物种同源性较低。[结论]成功克隆出金川牦牛的HIF-3A基因,且不同属的物种间不具有较高的保守性,为非分泌蛋白。     

细胞色素P450 3A7羟化维生素D3的功能研究

本研究通过体外生化实验研究细胞色素P450 3A7对维生素D3的羟化作用。根据GenBank报道的序列设计特异引物,扩增cyp3a7的编码区,将cyp3a7的编码区插入到pcDNATM3.1/myc-His(-) A的XhoⅠ/Bam HⅠ,通过测序检测序列的正确性。pcDNA-CYP3A7及pcDNA分别瞬时转染293T细胞,48 h后收集细胞,提取S9组分,用Bradford法测定蛋白质浓度。S9组分经12%SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting检测,用myc抗体作为一抗检测CYP3A7在293T细胞的表达水平。0.6 mg S9组分与1μmol/L维生素D3于37℃孵育30 min,用4倍体积的氯仿甲醇(体积比为3∶1)抽提,有机相在氮气流下吹干,残基用于HPLC分析。结果显示,重组表达CYP3A7的293T细胞的S9组分通过Western blotting检测到了特异的约60 kD的条带,对照样品未检测到特异条带的蛋白质。重组表达CYP3A7的293T细胞S9组分的孵育样品通过HPLC检测到了25-羟基维生素D3,对照样品未检测到25-羟基维生素D3。结果表明重组表达的CYP3A7羟化维生素D3生成25-羟基维生素D3。本研究为进一步探究还有哪些P450参与维生素D3在鸡体内的代谢,为阐明其代谢途径提供理论依据。