H+-Lsfet型青霉素酶传感器

将sos型H^＋－ISFET与戊二醚交联的牛血清蛋白-青霉素酶膜组合成单管输出式青霉素酶－H＋－ISFET传感器的探头(以下简称青霉素－酶FET),并用于测定溶液中的青霉素含量。青霉素－酶FET在0．005mol/L、O．Olmol／L、0．02mol／L磷酸缓冲液中的响应灵敏度分别为11—12mV／m mol／L、7．5—8．0mV／m mol／L以及3．7—4．OmV／m m01／L;响应时间为30s,在0．02mol／L磷酸缓冲液中的标定曲线线性范围为O．5—25mmo】／L’相关系数为O．9976。该青霉素·酶FET在青霉索浓度为10mmol／L的0．01mo1／L磷酸缓冲液中重复测定8次的标准偏差sD为1．67mv,变异系数cv为2．1％;贮存寿命大于4个月,使用寿命在1个月以上(每天测试一次)。     

青霉素敏感的酶场效应晶体管的研究和应用

酶场效应晶体管(ENFET)是近年来发展起来的一类半导体技术和生物技术相结合的新型器件。双管差分输出式ENFET对环境温度变化及总体pH变化等外界因素有自动补偿作用,其输出电压随时间的漂移较之单管输出有很大的改善。此外,还可采用金电极作参比电极以实现探头的小型化。青霉索ENFET在0．01mol／L和O．02m01／L的磷酸缓冲液中的响应灵敏度分别为6．5—7．0mV／mmol／L和3．2—3．6mV／mmol／L,线性范围为0．5—14mmol／L和0．5—25mm0l／L。当浸于O．Olmol／L磷酸缓冲液、置于4℃下保存时,探头的贮存寿命大于6个月。探头的累计使用次数可超过1000次。本文还论述了青霉素ENFET在青霉素发酵液浓度 测定中的应用。     

N—甲基吩嗪为介体辣根过氧化物酶传感器的研究

研究了将Ｎ－甲基吩嗪作为介体,通过牛血清白蛋白和戊二醛使其作为结合到玻碳电极上去的辣根过氧化物酶生物传感器。该酶电极对过氧化氢有良好的响应,Ｎ－甲基吩嗪还原电流的增值与过氧化氢浓度在１×１０－６～５×１０－４ｍｏｌ／Ｌ范围内有良好的线性关系,该传感器灵敏度高,检出限为１０－７ｍｏｌ／Ｌ,对过氧化氢的响应时间小于１０ｓ。     

场效应晶体管型赖氨酸传感器的研究

用自行研制的SOS型氢离子敏场效应晶体管,结合聚乙烯醇膜和赖氨酸脱羧酶膜,研制成场效应晶体管型赖氨酸传感器,其线性响应范围为:0.02％—0.10％,响应灵敏度75±3 mV,响应时间约2 min.传感器寿命达60 d,在pH 6.2的磷酸盐缓冲液中(含10^-3mol/L磷酸吡哆醛),37℃时器件性能最优,同时还考察了硅烷化及膜厚对器件性能的影响.用该传感器初步检测强化赖氨酸饮料的含量,结果与经典的茚三酮显色法基本一致.     

8mol/L脲中rhIL-3含量的测定

为解决8mol／L脉中rhIL－3的定量问题,以卵清蛋白作内标,进行常规SDS－PAGE后,作激光灰度扫描,并计算rhIL－3和卵清蛋白的峰面积,发现两种蛋白峰面积的比值与rhIL－3浓度在0．2－1．0mg／ml间呈良好线性关系。查标准曲线可以计算出8mol／L脲中rhIL－3的含量。重复性测定表明该法具有较好的重现性。     

免标记光学纳米生物传感器的研究

利用发光稳定的多孔硅,当蛋白质溶液固定到多孔硅表面时,其发光强度和反射光谱的峰位会随着被测物质量浓度的变化而发生变化的特性。制备免标记光学纳米生物传感器来检测牛血清白蛋白（BSA）,把不同质量浓度的BSA溶液固定到多孔硅上测量反射光谱的峰位和荧光强度的变化。实验结果表明：反射光谱的峰位与牛血清白蛋白的浓度呈线性关系：y=1．4189x＋366．31,R^2=0．9898;荧光强度的降低量与BSA溶液的浓度呈线性关系,检测限为8×10^-9 mol／L。     

固定化酶一化学发光分析法测定葡萄糖和一种新型葡萄糖传感器的研制

本文提出用固定化酶－化学发光分析法测定葡萄糖并在此基础上构建了一种新型葡萄糖传感器。这种传感器系由固定化酶膜,光敏二极管及醋酸纤维滤膜构成。与其他类型的葡萄糖传惑器相比,它具有灵敏度高、响应速度快、工作稳定等特点,其线性工作范围可达4个数量级,检测下限为O．5ppm,可连续测定200个样品,测定结果与邻甲苯胺法所得结果相一致。     

谷氨酸氧化酶电极的研究

用戊二醛作交联剂将谷氨酸氧化酶和牛血清白蛋白共交联,置于内层醋酸纤维素抗干扰膜和外层聚碳酸酯扩散控制膜之间,制成酶膜,将其与过氧化氢探头复合制成了扩散控制型谷氨酸氧化酶电极,并构建了采用该电极的流动注射分析芽纺。酶电极红性范围0—1000mg／L。50s响应电流达稳态值的95％。流动注射分析系统响应时间20s,检测速度60次／h,线性范围5—8 000mg,L,酶膜使用寿命两周以上。系统选择性好,仅对干扰物L－谷氨酰胺和L－天冬氨酸有微弱响应。对同一样品连续测定41次的变异系数2．8％。测量味精发酵液和瓦勃呼吸计的结果相吻合。可望应用于味精发酵及食品工业中。     

双酶电极法测定L-苯丙氨酸的研究

本文以Ｃｌａｒｋ氧电极为基础,把水杨酸羟化酶和苯丙氨酸脱氨酶同时固定在氧电极的表面,制成了双酶生物传感器。在磷酸缓冲液中,水杨酸浓度为０．５ｍｍｏｌ／Ｌ,烟酰胺腺嘌呤二核甘酸（ＮＡＤ＾＋）的浓度为１．０ｍｍｏｌ／Ｌ,其响应电流的变化对应反池中Ｌ－苯丙氨酸的浓度在０－０．１５ｍｍｏｌ／Ｌ之内有良好的线性范围。     

根瘤菌4012a菌株产细胞分裂素发酵条件的研究

用酶标免疫检测法研究了根瘤菌4012a菌株细胞分裂素发酵的适宜培养基和培养条件。结果表明,其最佳培养基为（g／L）：葡萄糖10.0,（NH4）2SO41.0,K2HPO4·3H2O0．6,MgSO4·7H2O0.1,CaCl2·2H2O0.4,FeCI3·6H2O0．04,Na2MoO4·2H2O0．1mg／L,泛酸钙100μg／L,腺漂吟200mg／L。该菌株在150r／min的旋转摇床上27℃振荡培养96h,发酵液中细胞分裂素产量可达908μg／L,生物活性（萝卜子叶扩大法）为1mg／L激动素当量。     

醋酸纤维素膜为基础的葡萄糖生物传感器的研制

用共价法将酶固定在醋酸纤维素膜上,方法简便易行,制造的酶膜稳定,比活力高。同时采用该方法制备了葡萄糖氧化酶酶膜,与氧电极组装成测定葡萄糖的生物传感器,线性范围为50~800mg／dl,仪器工作的最适pH为6．0,最适温度为40℃。将该膜与过氧化氢电极组装得到的传感器具有以下特性：线性范围为10~200mg／dl,最适pH为6．0,测定结果与酶试制盒有良好相关性。     

表面活性剂增敏--牛血清白蛋白荧光猝灭法测定槐花中芦丁含量

目的:应用牛血清白蛋白荧光猝灭法建立一种测定槐花中芦丁含量的新方法。方法:牛血清白蛋白(BSA)具有很强的内源荧光性,而芦丁溶液本身不产生荧光。当芦丁与BSA结合后,会导致其荧光强度下降,表面活性剂吐温-80(T-80)对体系有促进荧光猝灭作用。BSA在λex=338nm处的荧光猝灭程度与芦丁的量在一定浓度范围内呈良好的线性关系,据此建立测定槐花中芦丁含量的新方法。结果:该结合物的最大发射波长为λmax=338nm,与芦丁摩尔浓度在6×10-7~3.0×10-5mol.L-1范围内线性关系良好。其线性回归方程为ΔF=136.36CRu(×10-5mol.L-1)-0.5454,相关系数r=0.9976,检出限为1.58×10-7mol.L-1,RSD为2.8%~4.3%,加标回收率为97.6%~101.2%。结论:本方法操作简便、快速,用于实际样本的测定,结果满意。     

专一识别甲酯化赤霉素7，4的单克隆抗体的制备

合成Gas－3-O－HAS免疫原的同时,往往产生Gaa－7－CONH—HAS等其它成分,从而有可能通过特定的ELISA分步筛选法,在一次单抗研制流程中兼得两类针对不同Gas抗原决定簇的单克隆抗体(Mabs)。交叉反应结果表明,其中的Mab BG2对GA_7/4甲酯具有高亲和力和专一性,它与GA7me的亲和力比GA3me与GA1me分别高出100与200倍。7位羧基的甲酯化可显著增加Gas与该抗体的结合,而A环上双键或3β基的缺失,19,10－r-内酯环的破坏及D环上13位羟基的存在却严重降低Gas．与它的结合。这种高专一性的单抗将可用于高等植物和真菌体内早期非羟化途径中的GA7与GA4的免疫定量与定位研究。用该抗体建立的GA4me与GA7me ELlSAs具有极高的灵敏度,两者的检测范围分别为1．0×10^-14～1．O×1O^-13mol与2．0×10^-15～2．0×10^-13mol。     

蔗糖—葡萄糖双功能酶传感器的研究

结合蔗糖转化酶酶管与葡萄糖氧化酶－葡萄糖变旋酶双酶电极构成一种新的蔗糖传感器。该传感器可以分别用于蔗糖及葡萄糖的测定。蔗糖经酶管作用产生α－Ｄ－葡萄糖,再用ＧＯＤ－ＭＵＴ双酶电极定糖。若是样品中蔗糖和葡萄糖共存,比较样品流经不同路径时传感器的响应值,可以排除葡萄糖对蔗糖测定的干扰。传感器的最适ｐＨ和温度范围分别为：５．０－６．５和３０－４０℃,在稳态法实验中,传感器的线性范围为：２．５×１０＾－４     

硼和尿素及生长调节剂对苹果花粉萌发与生长的影响(简报)

花粉萌发培养基上添加0．01％－0.1％硼砂或硼酸及O．1％－0．6％的尿素,均不同程度地促进花粉萌发与花粉管生长。5~50mg·L-1的乙烯利及萘乙酸对花粉的萌发与花粉管生长则有抑制作用,抑制程度随两者浓度增加而增强。在1~5mg·L－1的BA下,花粉萌发率稍有下降,但花粉管生长受促;25mg·L－1BA可显著抑制花粉的萌发与生长。稀释500~2000倍的普洛马林（promalin）可促进红富士花粉的花粉管生长。     

利用厚度剪切模传感器在线快速检测鼠伤寒沙门氏菌

鼠伤寒沙门氏菌的浓度和生长用厚度剪切模（ＴＳＭ）传感器在线进行了测定．通过实验发现该法简单、实时和快速．该传感器的响应和细胞浓度之间存在良好的线性关系,相关系数为０．９７４．细菌的生长初始期即延滞期和对数生长期可以用该装置在线测定．影响测定的诸因素也进行了讨论,如培养基和电解质是关键的因素．测定的最佳浓度范围为１．２５×１０５～１×１０１０细胞／升．     

二茂铁－交联剂修饰的葡萄糖传感器

用年清白蛋白－戊二醛交联剂把葡萄糖氧化酶固定在Ｎａｆｉｏｎ－二茂铁修饰电极上,最后在电极上修饰一层Ｎａｆｉｏｎ膜,制备成葡萄糖传感器,电活物质如抗坏血酸,尿酸等对葡萄糖的测定无干扰。该传感器的线性范围为５．０×１０＾－＾４－１．３×１０＾－＾２ｍｏｌ／Ｌ,响应时间小于６０ｓ。     

丙烯酸酯-PEG400复合薄膜对胰岛素的体外控释研究

目的：在胰岛索非注射给药研究中,经皮给药系统凭借其独特的优势,已成为近年来医药领域的研发重点。控释膜的研究是经皮给药系统中一个重要组成部分,然而涉及胰岛素通过控释膜释放的研究报道不多。本实验室通过紫外光催化技术合成出一种丙烯酸酯-PEG复合薄膜作为胰岛素控释膜。本实验目的在于考察该复合薄膜在24小时内对胰岛素的体外控释作用,从而为胰岛素经皮给药制剂的基础研究作出贡献。方法：通过紫外光固化方法合成丙烯酸酯-PEG400复合薄膜,通过HPLC的方法考察丙烯酸酯-PEG400复合薄膜对不同浓度胰岛素溶液的控释作用,通过比较薄膜对不同浓度胰岛素溶液的累积渗透量及渗透速率等参数,研究薄膜对胰岛索的控释规律。结果：实验数据显示：丙烯酸酯-PEG复合薄膜对3．0mg／mL,6．0mg／mL,9．0mg／mL这三种不同浓度胰岛素控释曲线的相关因子分别为：0．9921,0．9950,0．9964。相关因子均大于0．99,表明该薄膜能很好的控制胰岛素溶液实现线性释放。经计算,薄膜对3．0mg／mL,6．0mg／mL,9．0mg／mL这三种浓度胰岛素的累积渗透量分别为：266．69μg／cm-2,343．65μg／cm-2,460．10μg／cm2。渗透速率分别为：9．24μg／cm-2·h-1,13．40μg／cm-2·h-1,19．04μg／cm-2·h-1。以上两组数据表明,薄膜对胰岛素的累积渗透量及渗透速率随胰岛素浓度的增加而增大。结论：通过实验结果我们可以看出,丙烯酸酯一PEG复合薄膜能控制不同浓度的胰岛素溶液以恒定速率释放,通过对比薄膜对各浓度胰岛素的累积渗透量及渗透速率等参数,发现该薄膜对胰岛素的释放速率受胰岛素浓度调节,具体表现为随胰岛素浓度的增加而增加。因此该薄膜不仅可以稳定控制胰岛素实现零级释放,而且可以通过调节胰岛素浓度实现调节胰岛素释放速率的目的。由此可以看出,该薄膜是一种理想的胰岛素控释膜。同时本实验作为胰岛素控释膜的基础研究,也为日后以该薄膜为控释膜的胰岛素经皮给药制剂的研发打下了坚实的基础。     

基于石英表面荧光性吖啶橙纳米自组装膜测定土壤中铬（Ⅵ）

研究了在石英表面上吖啶橙纳米金自组装膜的制备及其荧光特性,发现所构建的吖啶橙自组装膜具有强的荧光信号。在pH为7．60的KH2PO4^-NaOH缓冲溶液中,Cr^6＋离子能使吖啶橙自组装膜在λ=528nm处的荧光增强,增强的强度（△F）与Cr^6＋的浓度在一定浓度范围内呈线性关系,该方法的线性范围为0．00～36．00×10^-8μg／mL,检出限（DL）为2．47×10^-11μg／mL,将构建的吖啶橙自组装膜测定土壤中的Cr^6＋,回收率为94．91％～96．24％,相对标准偏差（RSD）为0．31％～0．70％。由此可知吖啶橙自组装膜适用于超痕量铬离子的界面荧光测定。实验结果表明该膜具有较好的可逆再生性能,自组装膜法检测限低、灵敏度高、反应速度快、稳定性好。     

成牛血清低分子量成分在杂交瘤细胞体外“无血清”培养中的利用

利用适量的(3．5～14％)成牛血清低分子成分超滤液(LMW－CS,排阻M=300 00)、10mg／L转铁蛋白(T)、10 mg／L胰岛素(I)、20μmol／L乙醇胺(E)、40 n mol／L硒酸钠(s,当以RPMll640为基础液时用)等诸补充成分替代胎牛血清加到基础液RPMll640或1：1(v／v)的IMDM与Ham’s F₁₂混合液中构成本实验性“无血清”培养基。培养在此种培养基中的杂交瘤细胞其最高细胞密度可以达到甚至超过培养在含胎牛血清的生长培养基中的最高细胞密度。对于杂交瘤细胞生长,4％的LMW－CS基本满足要求;T、I、E、S四种补充成分中乙醇胺(E)是首位影响因子; LMW－cs与TIES两部分之间的协同作用极为显著,两者缺一不可。