赖氨酰氧化酶样蛋白4在人类恶性肿瘤发生与发展中的作用

赖氨酰氧化酶样蛋白4(lysyl oxidase like 4, LOXL4)是一种属于赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase, LOX)蛋白质家族的分泌型铜依赖性胺氧化酶,参与细胞外基质(extracellular matrix, ECM)的组装和维持。LOXL4蛋白在人类肝癌、胃癌、乳腺癌、宫颈癌、头颈鳞癌、食管癌和结直肠癌中表达上调,而在人类膀胱癌和肺癌中表达下调并抑制肿瘤的生长,表明LOXL4蛋白在不同类型的人类恶性肿瘤中具有促癌或抑癌的双向作用。肿瘤细胞外泌体中的LOXL4蛋白通过催化作用产生过氧化氢,后者直接激活FAK/Src信号通路,并促进细胞基质粘附和细胞迁移。外泌体介导的LOXL4还可以通过激活PI3K/Akt信号通路来促进肿瘤细胞的增殖和免疫逃逸。肿瘤细胞中的 LOXL4可以经外泌体转运至巨噬细胞,进一步通过STAT1和STAT3介导的信号通路激活细胞免疫抑制功能和激活程序性死亡配体 1(programmed death ligand 1, PD-L1)表达,触发巨噬细胞的免疫抑制功能,促进肿瘤细胞的免疫逃逸。此外,LOXL4蛋白还能通过激活p53蛋白和抑制Ras/ERK信号转导通路发挥抑癌功能。本文主要总结了LOXL4蛋白的结构、功能及其在人类恶性肿瘤发生发展的作用机制,进一步探讨LOXL4蛋白在恶性肿瘤研究中的应用前景,为恶性肿瘤的临床诊断、治疗和筛选预后标志物提供理论基础和参考依据。     

人LOXL2启动子的鉴定与初步分析

LOXL2（lysyl oxidase like 2）是赖氨酰氧化酶（LOX）家族的一个重要成员,不仅可促进细胞外基质中胶原蛋白和弹性蛋白的交联,而且在转录调控、细胞信号转导以及细胞粘附等生物学过程中也有重要作用。多篇研究表明,LOXL2在多种肿瘤中高表达,且与多种肿瘤细胞的增殖迁移等生物学行为密切相关。LOXL2的表达调控机制目前仍不清楚。为了进一步研究LOXL2的转录调控机制,本研究克隆鉴定了LOXL2的启动子。首先通过数据库对LOXL2基因结构及潜在启动子区域进行了分析,进而以人的基因组DNA为模板,通过PCR定向克隆策略,构建了5个长度不同并覆盖LOXL2基因转录起始位点附近约1.7 kb的LOXL2基因启动子荧光素酶报告基因重组体。启动子活性分析结果表明,与对照组相比,5个重组体均具有启动子活性(P<0.05),提示LOXL2基因核心启动子定位于转录起始位点附近约185 bp的区域内。转录因子结合位点分析结果表明,LOXL2基因启动子缺乏典型的TATA盒,但含有GC盒以及Sp1、NFkB等潜在的转录因子结合位点。外源转染Sp1表达质粒能显著增强LOXL2基因启动子的活性（P<0.05）,提示Sp1能直接激活LOXL2的转录。     

赖氨酰氧化酶样蛋白2在肾细胞癌中的表达及其临床意义

为探究赖氨酰氧化酶样蛋白2 (lysyl oxidase like 2, LOXL2)与肾细胞癌(renal cell carcinoma, RCC)的关系,本研究采用免疫组织化学方法检测58例RCC组织及13例癌旁组织中LOXL2的表达水平,并利用统计学方法进一步分析LOXL2与临床病理参数和预后之间的关系。研究显示,LOXL2在癌组织和癌旁组织的阳性表达率分别为68.96%和23.08%,差异具有统计学意义(p<0.05)。LOXL2阳性表达与患者的临床分期和肾包膜浸润相关(p<0.05),但是与患者的性别、年龄、吸烟、病理类型、肿瘤大小和肿瘤分级均无相关性(p>0.05)。采用Kaplan-Meier法和Log-Rank检验分析LOXL2与术后生存时间的关系,实验显示LOXL2阳性组和阴性组患者的5年生存率分别为61.58%和89.46%,差异具有统计学意义(p<0.05)。我们的研究表明LOXL2在肾癌中过表达,其可能在肾癌的侵袭和转移过程中发挥作用,可作为预后的分子标记物。     

BATF2对Wnt信号通路影响的研究

摘要wnt信号通路在各种生物体内高度进化保守,与癌症的发生发展密切相关。BATF2是一个新近发现的基因,研究表明其具有抑癌基因的作用。目前,BATF2与wnt信号通路的关系尚不清楚,该文用荧光素酶报告基因检测、Real－timePCR和Western blot发现BATF2能影响wnt信号通路。过表达BArF2可明显下调TCF4／p－catenin的转录活性和Wnt信号通路下游基因的表达,可以下调细胞核中的β-caenin。推测BATF2可能通过下调细胞核中的p－catenin来实现对wnt信号通路的下调。上述结果为抑制Wnt信号通路用于肿瘤治疗提供了一定的依据。     

LEF-1的调控及其与肿瘤的关系研究进展

淋巴细胞增强因子（lymphoid enhancer factor,LEF-1）是Wnt信号通路中的一个重要调控因子。其异常表达对肿瘤细胞增殖和凋亡调控起关键作用。LEF-1作为Wnt信号通路核内的转录因子,还与T细胞受体α（TCRα）的增强子相互作用形成特定的构象,从而与其他因子结合共同调节基因的表达。同时,LEF-1为一多启动子基因,编码产生致瘤的全长形式的LEF-1和对Wnt信号通路起负向调控作用的截短形式的LEF-1。诸多研究结果表明肿瘤的发生发展与LEF／TCF各亚型的比例有关。就Wnt／LEF-1信号通路的调控以及与肿瘤的关系做一综述。     

赖氨酰内肽酶特性及其表达、应用的研究进展

赖氨酰内肽酶是一种重要的工具酶,广泛应用于科学研究及工业化生产。目前市场上的赖氨酰内肽酶大多是从天然微生物中提取获得,其高昂的价格限制了其广泛运用,重组表达能够解决产量的难题。首次对赖氨酰内肽酶进行了综述,包括赖氨酰内肽酶的来源、结构、功能性质及其主要应用,并重点总结了近年来的重组表达进展,同时对今后的研究方向进行了展望。     

CTHRC1与肿瘤关系的研究进展

胶原三股螺旋重复蛋白1基因是从大鼠正常动脉和受损动脉中筛选出的差异表达基因,其通过TGF-β和Wnt/PCP通路发挥作用,使胶原生成减少,促进细胞迁移。在多种肿瘤中发现CTHRC1异常表达,并与肿瘤转移相关。该文就CTHRC1与肿瘤的关系作一综述。     

HIF-1α与LOX在食管鳞状细胞癌中高免疫反应阳性

目的探讨缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF-1α)、赖氨酰氧化酶(lysyloxidase,LOX)蛋白在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达和临床意义。方法通过免疫组织化学法检测40例ESCC患者肿瘤组织和癌旁正常组织中HIF-1α与LOX的蛋白表达水平,结合患者临床病理资料分析HIF-1α与LOX蛋白表达与临床病理特征的关系及两种蛋白表达的相关性。结果 ESCC癌组织中HIF-1α和LOX蛋白阳性表达率高于癌旁组织。HIF-1α的阳性表达与淋巴结转移、肿瘤浸润深度T分级显著相关,LOX的阳性表达与淋巴结转移、肿瘤浸润深度T分级和TNM分期显著相关,同时HIF-1α与LOX的表达呈显著正相关。结论 HIF-1和LOX在ESCC的侵袭转移中可能发挥协同作用,可以作为ESCC肿瘤浸润、进展及预后的指标。     

Dkk-1在肿瘤中的研究进展

DKK-1是一种分泌型糖蛋白,通过结合细胞表面受体LRP5/6、Kremen1/2在Wnt通路中起负调控作用。Dkk-1的表达受p53、MYCN、β-catenin等基因调控。Dkk-1在细胞内的异位表达能抑制多种肿瘤细胞的增殖,但有时能在促凋亡因子存在时诱发凋亡。Dkk-1在一些肿瘤中低表达,而在另一些肿瘤中高表达。Dkk-1在不同肿瘤的发生、发展以及转移这几个阶段中的表达和功能表现出复杂多重的差异。该文就Dkk-1在肿瘤中表达和功能的研究进展作一综述。     

RB-E2F信号通路与乳腺癌及其治疗

视网膜母细胞瘤基因（retinoblastoma gene, RB1）突变或调节CDK-RB-E2F通路其他成分的突变存在于几乎所有人类恶性肿瘤中。因此,通过抑制细胞周期蛋白激酶（CDK）来实现对细胞周期的调控,在肿瘤治疗中越来越显示出其优势。目前,CDK4/6抑制剂帕博西尼（palbociclib）联合芳香酶抑制剂,治疗ER 阳性乳腺癌是很有效的临床应用。研究显示,CDK-RB-E2F信号通路,对控制乳腺细胞增殖发挥关键作用。近期的研究结果,揭示了该通路在肿瘤发展、血管生成及转移中的作用。并且,E2Fs是不依赖于其他临床参数的乳腺癌预后指标。本综述总结了乳腺癌中RB E2F通路的最新研究进展,并且讨论应用高通量基因组学研究,筛选获得乳腺癌中CDK4/6抑制剂重要的作用靶点,旨在发展更有效的联合治疗手段。     

HER-2/neu基因高表达及靶向治疗

HER-2/neu癌基因在许多肿瘤,如乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌等肿瘤中高表达,在肿瘤的发生与发展中起重要作用,与肿瘤的转化、转移、复发、预后差、患者生存期缩短有关。HER-2/neu在乳腺癌过度表达率约为20%～30%,编码蛋白P185HER2属生长因子受体家族,抗P185HER2单克隆抗体(Herceptin)作为靶向药物已临床应用治疗HER2/neu高表达乳腺癌。     

LOXL2 promotes vasculogenic mimicry and tumour aggressiveness in hepatocellular carcinoma

Lysyl oxidase‐like 2 (LOXL2) has shown to promote metastasis and poor prognosis in hepatocellular carcinoma (HCC). Also, we have previously reported that vasculogenic mimicry (VM) is associated with invasion, metastasis and poor survival in HCC patients. In the present study, we investigated molecular function of LOXL2 in HCC and VM. We used the immunohistochemical and CD31/periodic acid‐Schiff double staining to detect the relationship between LOXL2 and VM formation. We performed the gain and loss of function studies and analysed the migratory, invasion and tube formation in HCC cell lines. We analysed the function of LOXL2 in VM formation and HCC metastasis both in vitro and in vivo. We have showed that LOXL2 was overexpression in HCC and was positively correlated with tumour grade, metastasis, VM formation and poor survival in 201 HCC patients. Secondly, our studies have showed that LOXL2 overexpression in HCC cells significantly promoted migration, invasion and tube formation. Finally, we found that LOXL2 may increase SNAIL expression, thereby enabling VM. Our study indicated that LOXL2 may promote VM formation and tumour metastasis by collaborating with SNAIL in HCC. What's more, the overexpression of LOXL2 indicated a poor prognosis in HCC patients.     

Lysyl oxidase-like 2 (LOXL2) controls tumor-associated cell proliferation through the interaction with MARCKSL1

Lysyl oxidase-like 2 (LOXL2) is a member of the lysyl oxidase gene family that contributes to the invasiveness and metastasis in tumor progression. However, the role of LOXL2 in cellular signaling is incompletely understood. In this study, we investigated a possible mechanism of LOXL2 function in tumor metastases in vitro, using a human breast carcinoma cell line. Myristoylated alanine-rich C kinase substrate-like 1 (MARCKSL1), a modulator in the regulation of cellular homeostasis, was identified as a LOXL2 interacting protein. We examined the binding domains that are required for the interaction between LOXL2 and MARCKSL1. The scavenger-receptor domain of LOXL2 was shown to interact with the N-terminal domain of MARCKSL1. Luciferase activity was noticeably reduced by the transfection of MARCKSL1 in a dose-dependent manner. In addition, over-expression of LOXL2 activates cell growth by inhibiting MARCKSL1-induced apoptosis. The effect of LOXL2 on cell cycle and apoptosis-related components was also confirmed through the silencing of LOXL2 expression. LOXL2 activates the FAK/Akt/mTOR signaling pathways, and MARCKSL1 suppresses LOXL2-induced oncogenesis. These insights supply evidence that LOXL2 promotes cell proliferation and inhibits apoptotic cell death. Taken together, our results indicate an underlying mechanism for an increase of LOXL2-related activity in breast tumor cells.     

基质金属蛋白酶-2和p185HER-2/neu蛋白在卵巢癌中的研究进展

基质金属蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)是基质金属蛋白酶家族的重要成员,能降解明胶蛋白和Ⅳ型、V型胶原,在细胞外基质的降解过程中起着关键作用,能够促进肿瘤细胞发生侵袭和转移。p185HER-2/neu蛋白是一种相对分子质量185×103的跨膜糖蛋白,由HER-2/neu基因编码,属于酪氨酸激酶受体家族,p185HER-2/neu蛋白在人类多种癌症中存在扩增及过量表达,并与肿瘤的侵袭性表型及生存期短密切相关。就基质金属蛋白酶-2和p185HER-2/neu蛋白的生物学特性,与卵巢癌侵袭转移和预后的关系及MMP-2和p185HER-2/neu蛋白的研究情况等予以综述。     

基质金属蛋白酶-9表达与胰腺癌生物学行为及预后的相关性研究

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）的表达与胰腺癌生物学特性及对患者预后的影响。方法：采用免疫组织化学法检测63例原发性胰腺癌及11例癌旁正常组织中MMP-9的表达.比较MMP-9的表达与胰腺癌患者生物学特性及预后的关系。结果：MMP-9阳性表达率为68.3%（43/63）,而11例癌旁正常组织无MMP-9表达。MMP-9的表达与肿瘤大小（P=0.014）、分化程度（P=0.039）、TNM分期（P=0.001）、远处转移（P=0.011）及淋巴结转移（P=0.009）显著相关。MMP-9表达阳性者生存时间明显低于阴性表达者（Log-rank检验,x2=32.70,P=0.000）。Cox回归分析表明：分化程度（P=0.000）、TNM分期（P=0.006）、淋巴结转移（P=0.035）及MMP-9过表达（P=0.000）是胰腺癌预后的独立影响因素。结论：MMP-9过表达在胰腺癌的浸润转移中发挥重要作用,过表达提示预后不良.对MMP-9的检测可有效的评估胰腺癌患者的预后。     

Lysyl oxidase-like 2 is a regulator of angiogenesis through modulation of endothelial-to-mesenchymal transition

Lysyl oxidase-like 2 (LOXL2) belongs to the family of lysyl oxidases, and as such promotes crosslinking of collagens and elastin by oxidative deamination of lysine residues. In endothelial cells (ECs), LOXL2 is involved in crosslinking and scaffolding of collagen IV. Additionally, several reports have shown a role for LOXL2 in other processes, including regulation of gene expression, tumor metastasis, and epithelial-to-mesenchymal transition (EMT). Here, we demonstrate an additional role for LOXL2 in the regulation of angiogenesis by modulation of endothelial-to-mesenchymal transition (EndMT). LOXL2 knockdown in ECs results in decreased migration and sprouting, and concordantly, LOXL2 overexpression leads to an increase in migration and sprouting, independent of its catalytic activity. Furthermore, LOXL2 knockdown resulted in a reduced expression of EndMT markers, and inhibition of transforming growth factor-β (TGF-β)-mediated induction of EndMT. Interestingly, unlike in EMT, overexpression of LOXL2 alone is insufficient to induce EndMT. Further investigation revealed that LOXL2 expression regulates protein kinase B (PKB)/Akt and focal adhesion kinase (FAK) signaling, both pathways that have been implicated in the regulation of EMT. Altogether, our studies reveal a role for LOXL2 in angiogenesis through the modulation of EndMT in ECs, independent of its enzymatic crosslinking activity.     

MiRNA在乳腺癌转移中的作用

乳腺癌是女性高发的恶性肿瘤之一,远处转移是患者致死的最重要原因。目前乳腺癌转移的具体机制尚未明确。乳腺癌转移相关微RNA(microRNA,miRNA)的发现,为我们研究乳腺癌转移提供了新的思路。miRNA参与包括乳腺癌细胞的生长、凋亡、迁移、侵袭等肿瘤发生、发展过程,进而实现对乳腺癌转移的调控。有些miRNA在乳腺癌转移过程中起促进作用;有些则起抑制作用;还有一些miRNA的功能存在争议。本文将主要着眼于近年来发现的这几类miRNA在乳腺癌转移中所起的作用,并对其将来在乳腺癌诊断、预后判断及治疗中的应用做一综述。     

P-gp、MMP-2、C-erbB-2在乳腺癌原发灶和转移淋巴结中的表达对比研究

目的：探讨乳腺癌侵袭转移和多药耐药之间的关系,为治疗方案的个体化提供依据。方法：采用免疫组化方法检测46例乳腺浸润性导管癌患者乳腺原发灶及相应腋淋巴结转移灶中P-gp、MMP-2、c-erbB-2的表达,结合临床表现、病理学指标,分析其相关性。结果：46例原发灶P-gp阳性表达35例（76.1%）,MMP-2阳性表达25例（54.3%）,c-erbB-2高表达18例（39.1%）;相应腋淋巴结转移灶P-gp阳性表达28例（60.9%）,MMP-2阳性表达16例（34.8%）,c-erbB-2高表达16例（34.8%）;P-gp、MMP-2蛋白表达水平与肿块大小、淋巴结转移数目均呈正相关（P〈0.05）,c-erbB-2蛋白表达水平与腋窝淋巴结转移数量呈正相关,与ER、PR表达呈负相关,P-gp阳性表达与MMP-2和c-erbB-2的表达呈正相关（P〈0.05）。结论：肿瘤原发灶与转移灶存在异质性,P-gp、MMP-2、c-erbB-2的表达与乳腺癌的多药耐药和侵袭转移有关,检测上述基因在原发灶与转移灶的表达,为乳腺癌选择个体化的化疗、内分泌治疗及分子靶向治疗提供了分子生物学依据。