内生真菌与两种兜兰共培养过程中的相互作用

由硬叶兜兰（Paphiopedilum micranthum）和杏黄兜兰（P.armeniacum）根中分别分离得到瘤菌根菌属（Epulorhiza）真菌PM 1和美孢胶膜菌（Tulasnella calospora）PA 1。在DE培养基上,PM 1分别与硬叶兜兰和杏黄兜兰共培养,两种兜兰接菌苗的生物量以及Ca、Mn元素含量比对照组显著增加,表明PM 1能促进两种兜兰生长;PA 1对两种兜兰生长的影响不显著,但从干物重增长的百分率来看,PA 1对杏黄兜兰有一定的促进作用。PM 1对硬叶兜兰的影响高于杏黄兜兰,PA 1对杏黄兜兰的影响高于硬叶兜兰,表明真菌对宿主植物生长的促进作用更强。PM 1和PA 1在Harvais培养基上与杏黄兜兰共培养,两种真菌均对杏黄兜兰幼苗产生不利影响。结果表明,不同培养基养分水平能显著影响内生真菌与杏黄兜兰的共生关系,营养相对贫瘠的DE培养基有利于两者共生,而营养丰富的Harvais培养基不利于共生。     

濒危物种杏黄兜兰的保育生态学

杏黄兜兰(Paphiopedilum armeniacum)是中国特有的兰科濒危物种。自2000年4月1日至2005年10月10日,在云南省怒山的落砂坡山选取66个调查点进行杏黄兜兰保育生态学研究:对443基株共1302分株进行了繁殖式样、物候和生命周期等主要生物学特性,以及对该物种的生境要求、群落结构特征等生态学习性进行了观察研究,并在广东省深圳进行迁地保护和迁地繁殖后重返原产地的试验,研究了原产地的气候、植被和其他环境因素与杏黄兜兰之间的关系以及杏黄兜兰迁地栽培和繁殖的无性后代重返原生长地的生物学特性。研究结果表明:落砂坡山的杏黄兜兰在石灰岩上的次生灌木丛或草丛内生长良好;它兼具有性和无性繁殖,无性繁殖的目的就是实现有性繁殖和延长基株的寿命;无性繁殖有二种形式:产生分蘖或根茎;灌木丛或草丛的落叶为杏黄兜兰生长提供腐殖质,杏黄兜兰根茎繁殖是它对落叶等覆盖的一种适应;分株的开花率为7.39%±1.02%,开花分株的结果率为32.23%±12.08%;杏黄兜兰具有入侵适度破坏和正处于恢复初期的森林环境的能力,而在茂密连片的大树森林内不能生长。杏黄兜兰在深圳人工疏林下生长良好并繁殖许多无性的克隆分株,将繁殖的克隆分株重返原产地能正常开花和结实。试验结果显示,杏黄兜兰可以进行迁地保护以保存种质资源和迁地繁殖的植株回归原产地。基于杏黄兜兰濒危机制的分析,认为,杏黄兜兰生存所面临的威胁是生长空间被完全剥夺和人为灭绝性采集而不是其自身存在的生物学缺陷,为此,提出了相应的保育对策。     

杏黄兜兰的花发育过程及引种栽培

通过形态解剖研究了杏黄兜兰花的发育过程,发现杏黄兜兰5月份发育出花序原基,6～7月份发育出花序鞘,7～8月份发育出苞片,8月底至9月完成花器官形态分化过程。形态分化完成后杏黄兜兰的花器官继续快速增长。退化雄蕊、能育雄蕊、花柱在花形成后早期不融合,在后期才融合形成合蕊柱,且因为相对生长速率的不同,三者的相对位置、形态也发生改变。此外,在7～9月份引种至昆明栽培的不同批次杏黄兜兰中,产生花芽比率显著不同,进一步证实8月底至9月初是杏黄兜兰进行花器官形态分化的关键时期。     

丝核菌的分类系统：现状及存在问题

以重要植物病原菌为特征的丝核菌是一类在土壤中广泛分布的丝状真菌,通常不产孢,以菌丝或菌核的形式存在,多样性非常丰富。本文基于国内外最新研究进展,对依据菌丝体的细胞核数目、菌丝融合、有性生殖和系统进化等方面的基本特征展开的丝核菌分类体系及分类现状进行了综述。基于菌丝的细胞核数目,丝核菌被分为单核、双核和多核丝核菌三大类群。自然界中单核丝核菌数量极少,多核和双核丝核菌在全球分布广泛,占丝核菌的绝大多数。基于菌丝融合试验的结果,目前多核丝核菌被分为13个菌丝融合群,双核丝核菌被分为18个菌丝融合群。部分融合群内又根据一些稳定的特征分了亚群,但亚群的建立标准并不统一。目前的分子系统学研究结果基本支持丝核菌的菌丝融合群及亚群的分类。基于部分有性世代被发现的菌株的形态特征,多核和双核丝核菌分别被鉴定为亡革菌属和角担菌属。此外,目前已有分属重要植物病原菌和兰科菌根菌类群的至少9个融合群或亚群的17个菌株完成了基因组测序,比较基因组学和线粒体组学开始在丝核菌分类和进化研究中发挥作用。丝核菌分类系统特殊且复杂,作者在文末提出了目前丝核菌分类学研究面临的问题和今后研究的趋势,期待更多的学者参与到这个重要菌...     

纳豆菌发酵制作鱼内脏有机肥与抑制立枯丝核菌的应用

为了探索纳豆菌有机肥对作物的生长作用及其提高作物对茎基腐病原菌-立枯丝核菌的抗性能力,以纳豆菌作为发酵菌兼功能菌制作鱼内脏有机肥,将成品有机肥进行作物对立枯丝核菌的抗性应用实验:将番茄和辣椒种子播种于感染立枯丝核菌的园土及原园土中,对比植株在两种园土中的生长情况,并进行纳豆菌与立枯丝核菌平板对峙培养试验。结果发现,成品有机肥对两种种子发芽的作用都不明显,两种作物在两种园土中加肥组的植株生长量均达到无肥组的3倍左右,染菌园土中不加肥的番茄和辣椒苗茎基腐病苗率分别是55%和50%,加肥组的番茄和辣椒苗茎基腐病苗率分别是11%和17%;平板对峙培养的菌落状况显示立枯丝核菌生长受到抑制。结果表明,纳豆菌对立枯丝核菌生长具有抑制作用,用纳豆菌发酵制作的有机肥提高番茄和辣椒的生长量,并减少这两种作物的茎基腐病苗率。     

基于灰色关联分析方法评价13种野生兜兰的迁地保护适应性

由于过度收集和对原生境地的破坏,我国野生兜兰已濒临灭绝,对其进行迁地保护十分必要。通过对引种的13种40份野生兜兰资源进行迁地栽培,并观测兜兰种质在迁移地的各种生长性状指标等,本研究利用灰色关联分析方法评价13种兜兰的迁地适应性,分析影响其迁地保护的关键因素。结果表明:(1)带叶兜兰、同色兜兰、长瓣兜兰、文山兜兰适应性较强,与理想种的关联度均在0.8以上;巨瓣兜兰、白花兜兰、小叶兜兰、紫纹兜兰、紫毛兜兰、硬叶兜兰适应性一般,与理想种的关联度在0.7~0.8之间;麻栗坡兜兰、杏黄兜兰、红旗兜兰适应性较差,与理想种的关联度均在0.6以下;(2)不同兜兰种类、同一种类不同产地兜兰种质的迁地生长适应性不同,来源地和栽培温度可能是影响其迁地保护的关键因子。     

青海豌豆根腐病病原菌种类及致病性的研究

豌豆极腐病是青海东部干旱地区豌豆生产上的一种新病害,近年来危害逐年加重,致使豌豆产量遭受严重损失。根据分离鉴定和致病性测定结果,青海豌豆根腐病病原真菌是由茄镰刀菌、尖孢镰刀菌、豌豆丝囊霉、根串珠霉、立枯丝核菌、腐霉、链孢粘帚霉等复合反染所引起的。经回接试验：镰刀菌和豌豆丝囊霉对豌豆具有较强的致病力;腐霉及其他病原菌则有加强腐烂作用。     

三种苔藓植物提取物对植物病原菌的抑菌性研究

以立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、棉花枯萎病菌(Fusariumoxysporum)、苹果轮纹病菌(Physalosporapiricolanosa)、草莓灰霉病菌(Botrytiscinerea)四种植物病原菌为供试病原菌,对大镰刀藓Drepanocladusexannulatus、锐尖匍灯藓Plagiomniumacutum和疣小金发藓Pogonatumurnigerum三种藓类醇提液进行抑菌活性筛选,结果表明,大镰刀藓提取液对立枯丝核菌有较好的抑制作用,对立枯丝核菌的EC50为0.878mg/mL;而锐尖匍灯藓的提取液对立枯丝核菌的生长却有促进作用。     

国产兜兰属植物观赏价值评价及其在华南地区的应用前景分析

以植株的生长状况、整株姿态、叶片观赏性、开花性、花形、花色和花朵观赏期为评价指标,利用灰色关联分析,对我国原产的27种兜兰属植物的观赏价值进行了综合评价并分析了它们在华南地区的应用前景。结果表明:多花长瓣型的飘带兜兰与理想种的关联度最高,达到0.7304,是最值得在华南地区栽培的兜兰种类,其次为白旗兜兰。而紫纹兜兰、汉氏兜兰;文山兜兰、格利兜兰、带叶兜兰、亨利兜兰、同色兜兰,它们的关联度系数超过0.6;紫毛兜兰、巨瓣兜兰、红旗兜兰、天伦兜兰、长瓣兜兰、根茎兜兰的关联度均超过0.5;也是值得推广兜兰种类;杏黄兜兰、硬叶兜兰、白花兜兰由于生长状况差、开花性差等原因与理想种的关联度分别只有0.1900、0.1921、0.2917,不适于华南地区栽培;其它9种兜兰的关联度虽然介于0.35~0.50之间,但其中有些种类如虎斑兜兰、麻栗坡兜兰、波瓣兜兰、德氏兜兰等由于具有独特的观赏价值和育种潜力,也是值得在华南地区栽培的兜兰种类。     

生姜根际茎腐病拮抗菌的筛选及鉴定

从生姜根际土样分离获得的86个细菌分离物中,通过离体拮抗试验,筛选出2株对生姜茎腐病有良好拮抗效果的细菌,编号分别为JF24和JF3。通过对它们进行形态学观察、生理生化测定以及16S rRNA序列分析,初步确定,JF24为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens),JF3为粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)。JF24和JF3的16S rRNA序列的GenBank登录号分别为FJ999730和FJ999731。     

Interaction between Endophytic Fungi and Seedlings of Two Species of Paphiopedilum during Symbiotic Culture

Two fungi PM 1 and PA 1 were isolated from P.micranthum and P.armeniacum, respectively, the former belonged to Epulorhiza while the latter belonged to Tulasnella calospora. In this study, seedlings of P.armeniacum and P.micranthum were inoculated with PM 1 on DE medium, the biomass and the content of Ca, Mn of both P.armeniacum and P.micranthum seedlings were higher than those in the control seedlings, which indicated that PM 1 could improve the growth of those species. Seedlings of P.armeniacum and P.micranthum were inoculated with PA 1 on DE medium, the biomass in both species was no difference with those in the control ones. But PA 1 enhanced the dry weight of P.armeniacum according to the rate of dry weight increase. The impact of PM 1 on P.micranthum was higher than on P.armeniacum, while PA 1 impacted conversely, which demonstrated that fungi had stronger improving effect only on its own host plants instead of any other orchids. P.armeniacum seedlings wereinoculated with PM 1 and PA 1 on Harvais medium. The growth of seedlings was inhibited by fungi. The results indicated that nutrient level of medium played an important role in affecting the symbiotic relationship between P.armeniacum seedings and endophytic fungi. Poor nutrient medium was beneficial to the symbiotic relationship and nutrient rich medium was not conducive to the symbiosis.     

广藿香内生真菌多样性及其对青枯菌的拮抗活性

【目的】对广藿香各部位内生真菌的类群结构及多样性进行系统分析,筛选出对青枯菌具拮抗活性的菌株。【方法】采用组织块分离法从广藿香健康植株的根、茎、叶中分离内生真菌,结合形态学和基于ITS-r DNA序列分析鉴定方法分析广藿香内生真菌的类群结构及多样性,并利用双层平板拮抗法筛选对青枯菌具有抑制活性的菌株。【结果】从广藿香中共分离获得313株内生真菌,隶属于30个属,其中链格孢属(占28.75%)、拟茎点霉属(占23.00%)和炭疽菌属(11.82%)为优势类群,此外还分离到炭皮菌属、弯孢聚壳属、Gibellulopsis、新萨托菌属、葡萄座腔菌属、篮状菌属等较为少见的类群。茎、叶内生真菌的定殖率和分离率明显高于根,而根部多样性指数为2.64,要高于茎(2.00)和叶(1.97);广藿香茎与叶、根与茎、根与叶之间的内生真菌相似性指数分别为0.35、0.20、0.19,均小于0.5,显示各部位之间的内生真菌组成不相似程度高。从313株广藿香内生真菌中通过拮抗实验筛选到16株对青枯菌有拮抗活性的菌株,其中GHXR07、GHXR27和GHXR29的拮抗活性尤为显著,分别被鉴定为Talaromyces sp.、Myrothecium roridum Tode和Talaromyces wortmannii(Kl?cker)Benjamin。【结论】广藿香内生真菌具有丰富的物种多样性且其类群分布具有一定的组织特异性,其中部分菌株对青枯菌具有明显的拮抗活性。     

天目山山胡椒不同部位内生真菌组成及多样性分析

采用表面消毒法,从浙江天目山野生山胡椒[ Lindera glauca( Sieb.et Zucc.) Blume]的茎、叶和树皮中分离出内生真菌,基于ITS序列分析进行分类鉴定;并以内生真菌的分离率、定殖率、分离频率、多样性指数(H')及相似性系数为指标,分析了山胡椒内生真菌的菌群组成及多样性.结果显示:在26株山胡椒样株的728块组织块中共分离得到328株内生真菌(茎、叶和树皮中分别有161、40和127株);共鉴定出44个分类单元(茎、叶和树皮中各有19、18和28个),其中25个分类单元鉴定到种、17个鉴定到属、2个鉴定到科,ITS序列的GenBank登录号从JF502420至JF502462.在44个分类单元中,有40个分类单元属于子囊菌(310株),存在于山胡椒的各个部位;仅有4个分类单元属于担子菌(18株),且仅存在于茎和树皮中.山胡椒茎、树皮和叶中内生真菌的定殖率分别为65％、60％和15％,分离率分别为0.77、0.61和0.19;叶和树皮中内生真菌的多样性指数均为2.63,远大于茎(H’=1.83).山胡椒内生真菌的优势属为Phomopsis、Paraconiothyrium、Phoma和Colletotrichum,大量存在于叶、茎和树皮中.山胡椒茎与树皮、茎与叶及叶与树皮间内生真菌的相似性系数分别为0.27、0.19和0.18,显示树皮和叶之间以及树皮和茎之间内生真菌的组成极不相似.研究结果表明:山胡椒体内存在大量的内生真菌,其茎、叶和树皮的内生真菌菌群组成具有一定程度的多样性和差异性,且内生真菌的分布具有组织特异性.     

无花果内生真菌的分离及其鉴定

从无花果(Ficus carica)的根、茎、叶中分离得到87株内生真菌,经显微形态特征观察鉴定为14个属,其中根部35株涉及8个属,茎部37株涉及10个属,叶部15株涉及3个属。结果表明,无花果的不同部位内生真菌的数量、分布和种群存有差异。     

茶树中内生菌的动态分布

从茶树的根、茎、叶中分离得到143株内生真菌,经显微形态特征观察鉴定为14个属,其中根部62株涉及11个属,茎部55株涉及9个属,叶部26株涉及6个属。结果表明,茶树的不同部位内生真菌的数量、分布和种群存有差异。     

锦绣杜鹃菌根真菌rDNA ITS序列分析及接种效应研究

利用rDNA ITS序列对锦绣杜鹃菌根真菌的16个菌株进行了分类分析。根据菌株ITS序列全长计算各菌株间序列相似度和遗传距离,并与GenBank中最相似菌株序列构建系统发育树。结果表明：16个菌株在系统树上聚为3个大分支。其中7个菌株在支持率为100%的基础上与树粉孢属真菌Oidiodendron sp.聚为一类;2个菌株与未鉴定的杜鹃花科植物根系真菌unidentified root associated fungi聚为一类,支持率为100%;其他7个菌株在98%的支持率上与几种未命名的欧石楠类菌根真菌     

Dark septate endophytes: a review of facultative biotrophic root-colonizing fungi

Dark septate root endophytes (DSE) are conidial or sterile fungi (Deuteromycotina, Fungi Imperfecti) likely to be ascomycetous and colonizing plant roots. They have been reported for nearly 600 plant species representing about 320 genera and 100 families. DSE fungi occur from the tropics to arctic and alpine habitats and comprise a heterogeneous group that functionally and ecologically overlaps with soil fungi, saprotrophic rhizoplane-inhabiting fungi, obligately and facultatively pathogenic fungi and mycorrhizal fungi. Numerous species of undescribed sterile and anamorphic taxa may also await discovery. Although DSE are abundant in washed root and soil samples from various habitats, and are easily isolated from surface-sterilized roots of ecto-, ectendo-, endo- and non-mycorrhizal host species, their ecological functions are little understood. Studies of DSE thus far have yielded inconsistent results and only poorly illustrate the role of DSE in their natural habitats. These inconsistencies are largely due to the uncertain taxonomic affinities of the strains of DSE used. In addition, because different strains of a single anamorph taxon seem to vary greatly in function, no clear generalizations on their ecological role have been drawn. This paper reviews the current literature on DSE and the ecology and discusses the need for and direction of future research.     

Positive correlation between VAM-induced changes in root exudation and mycorrhizosphere mycoflora

The influence of vesicular-arbuscular mycorrhizal (VAM) fungi on rhizosphere mycoflora was studied together with the possible mechanism involved in this process. Six combinations of VAM fungi and phosphorus fertilizer treatments were applied to Leucaena leucocephala roots and quantitative and qualitative observations were made periodically of the rhizosphere mycoflora and constituents of root exudates. The results obtained indicate that the presence of specific mycoflora in the rhizosphere of mycrorrhizal roots is mediated through root exudates rather than being an outcome of improved P nutrition.