四川重楼属(延龄草科)一新变种——峨眉重楼

报道了四川峨眉山地区延龄草科Trilliaceae重楼属Paris一新变种——峨眉重楼Paris polyphylla Smith var. emeiensis H.X.Yin,H.Zhang ＆ D.Xue。该变种与宽瓣重楼P.polyphylla var.yunnanensis （Franch.）Hand.-Mazz.相似,区别在于叶柄较短,长2–5mm,叶片较窄,披针形,宽1.5–2.5cm,花梗短,长6–10（–13）mm,花瓣丝状,长2–3cm,药隔突出部分较短,长0.2–0.5mm。高效液相色谱法对新变种及多叶重楼P.polyphylla Smith各变种的甾体皂苷类成分的对比分析显示,宽瓣重楼以薯蓣皂苷为主,长药隔重楼P.polyphylla var.pseudothibetica H.Li以偏诺皂苷为主,而峨眉重楼、多叶重楼P.polyphylla var.polyphylla、华重楼P.polyphylla var.chinensis（Franch.）Hara、狭叶重楼P.polyphylla var.stenophylla Franch.、宽叶重楼P.polyphylla var.latifolia F.T.Wang ＆ C.Yu Chang、白花重楼P.polyphylla var.alba H.Li ＆ R.J.Mitchell所含皂苷均为微量,由此揭示了峨眉重楼同近缘种之间的关系。     

重楼属的四个新异名

将小重楼Paris polyphylla Smith var．minora S．F．Wang、长药隔重楼P.polyhylla Smith var．pseudothibetica H．Li处理为金线重楼P.delavayi Franch．的异名;将广东重楼P.polyphylla Smith var．kwantungensis（R．H．Miau）S．C．Chen＆S．Y.Liang处理为多叶重楼P.polyphylla Smith的异名;将文县重楼P.wenxianensis Z．X．Peng＆R．N．Zhao处理为黑籽重楼P.thibetica Franch．的异名。     

湖南重楼属植物小志

通过多年的调查、标本采集和分类研究,初步查明湖南产重楼属植物5种、6变种和1变型。其中有2种（凌云重楼Paris cronquistii,北重楼Paris verticillata)、3变种（滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis,卵叶重楼Paris delavayi var.petiolata,长药隔重楼Paris polyphylla var.pseudothibetica)和1变型（宽叶重楼Paris polyphlla var.stenophylla f.latifolia)为湖南新纪录。同时,还记录了各种、变种和变型的简要特点、分布和生境,并列出了它们的检索表。     

重楼属植物引种栽培的研究 Ⅱ.滇重楼的育苗试验

滇重楼〔Paris polyphylla var.yunnanensis(Fr.)Hand-Mazz.〕的种子发芽试验表明滇重楼种子有双重休眠期:种子需通过一段低温时期使胚完成后熟;种子萌发后,胚芽再需要一段低温时期使胚轴完成后熟才能出土成苗。本文对滇重楼种子的种源、采种期、播种期、播种材料及其育苗措施等进行了有关试验,现报道如下。     

重楼属植物的免疫血清学研究

以海南重楼(Paris dunniana),花叶重楼(P.marmorata),多叶重楼(P.polyphylla),凌云重楼(P.cronquistii),五指莲(P.axialis),滇重楼(Paris polyphylla var.yunnanensis)等六种重楼属植物的根茎为材料,提取分离其球蛋白组份作为抗原,免疫家兔得到相应的抗血清。通过免疫双扩散,聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳、免疫吸收试验以及酶标免疫等方法,研究了重楼属上述六个种和变种的血清学行为以及他们之间的相互关系。在此基础上,用不加权算术平均对群法(UPGMA)经成聚运算,得到基于平均吸收相似系数(Sabs.mean.)和Jaccard's结合系数的两种表相图,这两种表相图的结果是一致的。花叶重楼与多叶重楼有较大的血清反应相似性,五指莲与滇重楼有最大的血清反应相似性。多型种P.polyphylla在形态上的较大变异与血清反应分析的结果是一致的,而且血清反应相似性分析支持了从形态分析得出的假设:Paris dunniana在重楼属的系统发生中是一比较原始的种。     

重楼属和延龄草核型的一致性

本文报道的重楼属3个种和变种与延龄草的核型基本一致,表明它们之间的亲缘关系很近,其核型简式为:延龄草(T. tschonoskii)2n=10=4m 2m(SAT) 2st(SAT) 2t(SAT) 1B;五指莲(Paris axialis)2n=10=6m 2t 2t(SAT) 2B;狭叶重楼(P. polyphylla var. stenophylla)2n=10=2m(SAT) 4m 2st 2t;小重楼(P.polyphylla var.minora)2n=10=4m 2sm 4t.     

四川重楼属一新变种

本文发表了四川重楼属一新变种,即小重楼Paris polyphylla var.minora S.F.Wang。     

重楼属两种植物种子及其附属结构的发育

重楼属两种植物(五指莲Paris axialis和滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis)种子发育的过程基本一致。双受精发生于授粉后10—15天。胚乳为沼生目型。种子发育延续的时间约为150—170天。胚胎发育终止于球形或稍有分化的阶段。种子具二层种皮。 二种重楼种子成熟时的外部形态显著不同。五指莲Paris axialis的种子呈浅棕黄色,长椭圆形,部分为绿白色海绵质假种皮所包裹。假种皮由珠柄发育而来,呈楔形。滇重楼Parispolyphylla var.yunnanensis的种子鲜红色,不规则圆形,外种皮肉质多浆。无假种皮。珠柄橙黄色,短而纤细。     

镧对华重楼生长及皂苷含量的影响

本研究以4年生华重楼（Paris polyphylla Smith var. chinensis（Franch.）Hara）为实验材料,分别采用0、5、20、80、160 mg/L的加镧营养液培养华重楼植株,通过比较不同营养生长指标及采用HPLC法测定根茎皂苷组分,研究不同施镧水平对华重楼生长及皂苷含量的影响。结果显示,镧对华重楼生长及皂苷含量均有显著影响,随着镧溶液浓度的增加,华重楼皂苷含量呈上升趋势,但当镧含量达到160.00 mg/L时,则会对华重楼的生长产生抑制作用,导致株高降低、比叶面积升高。研究结果表明80.00 mg/L的施镧水平最有利于华重楼的营养生长及根茎皂苷积累。     

峨眉山2种重楼属植物同域分化的分子遗传学及其形态学证据初探

对峨眉山2种重楼-小重楼（Paris polyphylla Smith vat．minora S．F．Wang）、黑籽重楼（P．thibetica Franch）DNA进行了AFLP（扩增的限制性片段长度多态性）分析和形态上的差异分析。AFLP分析可知小重楼和黑籽重楼在DNA分子水平上表现出极为丰富的遗传多样性,每个种内个体间的相似性很大,但有明显种间的遗传差异。形态对比分析可知小重楼和黑籽重楼在花部性状上有明显的差异。AFLP和形态分析结果表明小重楼和黑籽重楼无论是在形态还是遗传上均有明显差异。它们之间已经有了明显的分化。     

蚤休、重楼和王孙

经过历史考证,作者确认:首载于《神农本草经》的蚤休为重楼属的Paris polyphyllaSmith var. chinensis (Fr.)Hara;首载于《滇南本草》中的重楼为重楼属的Paris polyphyllaSmith var. yunnanensis (Fr.) Hand. -Mazz.;《植物名实图考》中的王孙则是三白草科的三白草Saururus chinensis (Lour.) Bail.     

滇重楼可持续采收方法初探

滇重楼是云南传统的道地药材。由于种苗繁育困难和生长周期长,重楼的推广种植多年来未能取得突破。滇重楼的"多年栽培,分期采收"技术是将滇重楼根茎按用途分为药用部分与种苗部分,采收时,仅采收药用部分,种苗部分(带顶芽的根茎)继续生长发育,而不是将整个根茎全部采收作为商品药材。通过考察滇重楼须根比率的月度变化规律及3年的根茎生长量,进行采收时间和经济效益分析。结果表明:实施滇重楼"多年栽培,分期采收"技术间隔时间以3年为宜,每年每公顷收益为11.25万～33.0万元,采收时间以12月至翌年3月份为宜。     

云南重楼植物内生真菌的分离及抗菌活性筛选

从云南重楼[Paris polyphylla Smithvar.yunnnanensis(Franch.)Hand.Mazz.]块状茎中分离出166株内生真菌,对其进行形态分类鉴定归于4目,6科,20个属,体现了云南重楼植物内生真菌的生物多样性特征。同时,选择与人类和植物相关的37株病原微生物作为抗菌活性筛选指示菌,进行了云南重楼植物内生真菌抗菌活性的初步研究。结果表明,4株内生真菌对细菌、植物致病真菌、皮肤致病真菌多种病原微生物具有显著抑制生长的作用。     

接种不同AM真菌对滇重楼幼苗功能基因表达的影响

为探究接种不同外源性从枝菌根(Arbuscular mycorrhizae,AM)真菌对滇重楼幼苗基因表达的影响,本研究以灭菌土壤为生长基质,将滇重楼(Paris polyphylla var. yunnanensis)新鲜种子与28种AM真菌于室温盆栽条件下共培养,采用实时荧光定量PCR的方法检测鲨烯环氧酶基因(Squalene epoxidase,SE)、共生受体类似激酶基因(Symbiosis-receptor-like kinase,SYMRK)、产生钙离子振荡的通道蛋白基因(Doesn’t making fections 1,DMI1)、钙/钙调依赖性蛋白激酶基因(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase,CCa MK)4个功能基因在滇重楼幼苗的差异表达情况。结果表明:28株AM菌株可不同程度的影响SE、SYMRK、DMI1、CCa MK 4个功能基因的表达,其中薄壁两性囊霉(Ambisporaleptoticha,Ale)和崔氏原囊霉(Archaeospora trappei,Atr)可以显著增加4个功能基因的表达量。隐类球囊霉(Paraglo-mus occultum,Po)和透明盾巨孢囊霉(Scutellospora pellucida,Spe)可以增加SE、SYMRK的表达,细凹无梗囊霉(Acau-lospora scrobiculata,Asc),亮色盾巨孢囊霉(Racocetra fulgida,Rfu),哥伦比亚内养囊霉(Entrophospora colombiana,Ec),明球囊霉(Rhizophagus clarus,Rcl),根内球囊霉(Rhizophagus intraradices,Rin)可以增加DMI1的表达。综上所述,接种的28株AM真菌菌株中Ale和Atr能显著的提高4种功能基因的表达,结合前期与滇重楼无菌播种幼苗进行共生培养分析AM真菌对种子萌发及幼苗化学成分的影响,推测这两株菌可望能作为培育滇重楼菌根化苗的理想菌株,人工接种AM真菌可为保护和提高滇重楼开辟了一条新的途径。     

滇重楼寄生菌的研究

从滇重楼(Paris polyphylla var.yunnanensis)地下茎中分离和鉴定出两种细菌——蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes),以及三种真菌——黑团孢霉(Periconia sp.)、白色厚顶孢霉(Pachnocybe albida)和重楼索霉(Hormomyces paridiphilus)。对蜡状芽孢杆菌、产碱假单胞菌和重楼索霉进行了液体培养并测定了胞外多糖含量,结果表明重楼索霉可分泌大量胞外多糖,这可能是导致滇重楼地下茎胶质化和多糖含量增加的原因。