膀胱ICC细胞的研究现状和展望

膀胱ICC细胞(Interstitial cells of Cajal in bladder)早在上个世纪已被发现,与胃肠道ICC细胞同族,膀胱ICC以自发电活动为特性,源于胞内贮存钙离子释放和钙激活的氯同道开放引起自发短暂去极化。膀胱ICC细胞起初被理解为起搏细胞,其自发的电活动作为起搏器引起下游平滑肌的收缩,这种假说尚缺乏立足的直接证据,目前认为ICC细胞仅仅是膀胱平滑肌收缩活动的调节器,与上皮-传入神经以及神经-平滑肌的信号传递密切相关。病理状态下ICC细胞的作用似乎比生理状态下更为突出,例如膀胱过度活动症,多篇文献报道膀胱过度活动症患者膀胱的ICC细胞数目比正常增多,而且其平滑肌的收缩对酪氨酸激酶受体(tyrosine kinase receptor,c-Kit)拮抗剂格列卫更加敏感。未来膀胱ICC细胞的研究集中在阐明病理及生理状态下ICC的作用机制和信号通路。     

膀胱平滑肌细胞自发性钙活动传递的在体观察和分析

目的:观察离体活膀胱肌条铺片中平滑肌细胞自发性钙活动,并分析平滑肌细胞自发性钙活动的特征.方法:制作离体膀胱肌条铺片,Physiological saline生理液灌流保持肌条铺片活性.待肌条自发性收缩活动出现后,Fluo-4负载肌条铺片激光扫描共聚焦显微镜观察并高速扫描记录平滑肌细胞自发性钙活动,随后利用Fluoview软件分析平滑肌细胞自发性钙活动肌束内纵向、横向及肌束间的传递情况.结果:成功记录到离体活膀胱肌条铺片中平滑肌细胞的节律性自发性钙活动.钙活动在肌束内纵向传递几乎无时间延迟,但在肌束内横向传递有一定的时间延迟;在相邻的膀胱平滑肌束间也记录到钙活动的传递.结论:平滑肌细胞的自发性钙活动起源于肌束的一侧,随后传导到肌束的另一侧;平滑肌细胞钙活动纵向传递和横向传递的途径和机制可能不同;膀胱平滑肌束之间的钙活动传递可能是通过ICCs细胞完成.     

膀胱ICC样细胞研究进展

Cajal间质细胞(ICC)是分布在消化道自主神经末梢和平滑肌之间的一类特殊细胞,是胃肠道慢波的起搏细胞,是胃肠运动的pacemaker,它推进电活动的传播以及介导神经信号传递,控制胃肠道自主神经运动功能.近年来在人和动物膀耽中已证实存在ICC样细胞,其功能研究是最近研究的热点.ICC样细胞证实具有和胃肠ICC一样的藕联及神经调节功能的结构基础和功能特点,其是否具有起搏特性值得期待.     

大鼠膀胱Cajal间质细胞的分离、培养和鉴定

目的:探索大鼠膀胱Cajal间质细胞(ICC)的分离和培养方法,为进一步研究其在膀胱中的作用提供条件.方法:取大鼠的膀胱组织,采用Ⅱ型胶原酶酶解法分离细胞,将细胞悬液接种于含50ng/ml SCF、15%(v/v)FBS的DMEM培养基中,进行培养.用c-kit特异性杭体标记细胞,免疫荧光鉴定ICC细胞.结果:培养8小时后的ICC贴壁良好,并保持其固有特征:两个长的突起,多个短的侧突.胞体小,核大,c-kit抗体荧光染色阳性.结论:酶解法分离大鼠膀胱ICC并培养成功.     

豚鼠膀胱内Cajal样间质细胞的分布情况研究

目的:观察Cajal样间质细胞(ICCs)在成年豚鼠膀胱的分布情况.方法:取5只成年豚鼠膀胱,制作全层冰冻切片,行ICCs特异性标志物c-kit免疫荧光染色,按粘膜层、粘膜下层和肌层进行统计分析.结果:豚鼠膀胱内可见c-kit免疫阳性细胞,胞体呈梭形,两端伸出长的突起,其形态与肠壁肌层Cajal细胞相似.且肌层和粘膜下层多于粘膜层.结论:豚鼠膀胱存在Cajal样间质细胞,并在肌层高表达,可能参与膀胱自主节律性运动的调控,调节逼尿肌的运动,为"神经-Cajal样间质细胞-肌肉"单元的形成提供组织学基础.     

人胎儿早中期肠壁肌层发育分化的研究

目的探讨人胚早中期肠壁肌层的发育分化过程.方法采用形态学及免疫组织化学方法对24例4-28周胎儿空肠、回肠、结肠肠壁肌层进行形态学及免疫组化观察.结果α-SMA阳性的环行肌层与纵行肌层在10周胎儿已形成完整环形,空肠、回肠的黏膜肌层在10周时刚开始形成,13周时才刚刚形成完整环形,而结肠的黏膜肌层迟至15周才形成完整环形,此时细胞均呈圆形或卵圆形,绒毛中央α-SMA阳性的细胞在13周胎儿各段肠已出现,但结肠较空肠、回肠少.此后,随着胎龄的增大,各肌层均明显增厚,细胞形态也逐渐由卵圆形变为梭形.结论环行肌层与纵行肌层的发育分化早于黏膜肌层;空肠、回肠各肌层的发育分化早于结肠.     

中华绒螯蟹肠道内间质样细胞的显微和超微结构观察

目的探究中华绒螯蟹(Eriocher sinens is)肠道中是否存在间质样细胞。方法通过对中华绒螯蟹中肠和后肠进行全层铺片和肠cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)特殊染色法碘化锌-锇酸(zinc iodide-osmium,ZIO)染色,并结合后肠透射电镜观察中华绒螯蟹后肠ICC样细胞分布及形态。结果光镜检查结果显示:中华绒螯蟹间质样细胞常分布在中肠和后肠的黏膜下层。这些细胞形态相似,多为圆形或卵圆形,胞体直径约为10μm左右,呈灰黑色,常成群呈块状或片状分布,在后肠中的分布更为密集。电镜检测结果显示:这些细胞分布于黏膜下层、肌层与肌层之间和肌肉束边缘。后肠中间质样细胞多为梭形及纺锤形,也有不规则型,常有两个或两个以上突起,与邻近的细胞连接方式多为缝隙连接。此外,本研究还在后肠肠道固有膜层、肌层间和黏膜下层发现了大量颗粒细胞的分布。结论本研究通过传统的特异性ZIO染色和超微形态的观察初步发现中华绒螯蟹肠道内有ICC样细胞的分布。     

基因谱系示踪技术揭示小鼠Tbx18+心脏祖细胞向心系细胞分化的潜能

心脏祖细胞(cardiac progenitor cells,CPCs)的研究对阐明先天性心脏病的机制及治疗心血管疾病具有重要意义.哺乳动物的心脏组织由多种不同CPCs分化形成.转录因子Tbx18在发育中的心外膜中表达,对心脏的发育形成起重要的调节作用.为了在组织及活体细胞水平检测和阐明Tbx18+CPC的分化潜能,应用Cre-LoxP系统建立Tbx18+CPCs基因命运谱系示踪模型:Tbx18-Cre/Rosa26R-EYFP和Tbx18-Cre/Rosa26R-LacZ双杂合基因敲入小鼠.该双杂合基因敲入小鼠通过Cre的表达能有效地示踪Tbx18+细胞在胚胎和成年小鼠中的分化命运.Tbx18-Cre/Rosa26R-EYFP双杂合小鼠心脏能非常容易地利用流式细胞分选系统(FACS)分离出YFP+细胞,也可在倒置共聚焦显微镜下观察.应用X-gal染色分析其表达模式,揭示Tbx18命运谱系参与心房肌、室间隔、心室肌、冠状动脉、瓣膜等的形成.应用免疫荧光技术初步揭示Tbx18+CPCs向心脏肌钙蛋白T(cTNT)阳性心肌细胞和平滑肌肌球蛋白重链11(MYH11)阳性血管平滑肌细胞分化的潜能.心脏是一个由多种肌肉和非肌肉组织细胞构成的复杂器官.推测Tbx18可能在心脏祖细胞向肌源性细胞分化的信号通路中起重要调节作用.在上述研究中应用基因谱系示踪技术,验证Tbx18可作为一类CPCs的标志,为更深入揭示心脏祖细胞向心系细胞的分化潜能打下基础.     

胎儿胰腺发育中CgA和NSE的表达及其意义

目的检测人胎儿胰腺中CgA和NSE的表达特征,初步探讨胎儿胰腺发育过程弥散神经内分泌系统的形成及其生物学作用.方法用免疫组织化学SP法,检测嗜铬素A(chromograin A,CgA)和神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)在不同胎龄胎儿胰腺组织中的表达.结果CgA在16-38周的胰腺中均有表达,随胎儿发育,CgA阳性细胞分布状态和反应程度均有差异变化;NSE在22-38周胎儿胰腺中表达,集中定位于胰腺的内分泌部细胞.结论CgA和NSE在人胎儿胰腺中的阳性表达,反映出弥散神经内分泌系统在胎儿胰腺中的形成过程;表明胎儿胰岛的形成及其DNES细胞的分泌,有调节胰腺外分泌部发育分化的作用,也提示胰岛DNES细胞通过调节血糖可能对胎儿个体发育具有重要影响.     

蜗轴螺旋动脉平滑肌的培养及其鉴定

目的:本研究通过联合两种常用的细胞培养方法,建立了一个蜗轴螺旋动脉平滑肌细胞原代培养的模型.方法:分离的蜗轴螺旋动脉的平滑肌来自于豚鼠.切碎血管组织并且将其放入37度的0.1%胰蛋白酶溶液中消化20分钟.消化后,将这些消化后的组织块在35-mm的培养皿中贴壁.运用这种培养方法,混杂的成纤维细胞通过与血管平滑肌细胞不同的贴壁能力,可在传代的时候被去除.在7-10天后,细胞从组织块中长出来.大约3周,细胞可长满培养皿.在第三代培养的血管平滑肌细胞中,纯的并且活性好的细胞可以被活得.经过形态学,免疫荧光化学和电镜对这种方法得到的血管平滑肌细胞进行了鉴别.结果:显示了典型的平滑肌的细胞的特点:形态学的"峰-谷"样的生长形态,免疫荧光化学显示这些细胞表达平滑肌细胞的特异性标志物(α-SM-actin和myosin.结论:通过本文研究方法得到的大量的纯的蜗轴螺旋动脉血管平滑肌细胞是一个很好的研究血管平滑肌细胞在内耳循环紊乱过程生理功能的一个体外模型.除此之外,还可以是一些作用于血管平滑肌药物评价的体外模型.     

六种藓类植物茎的比较解剖学研究

通过对6种藓类植物,即褶叶青藓(Brachythecium salebrosum(Web.et Mohr.)B.S.G.)、湿地匐灯藓(Plagiomnium acutum(Lindb.)Kop.)、侧枝匐灯藓(Plagiomnium maximoviczii(Lindb.)Kop.)、大凤尾藓(Fissidensnobilis Griff.)、大羽藓(Thuidium cymbifolium(Doz.et Molk.)B.S.G.)和大灰藓(Hypnum plumaeforme Wils.)嫩茎和老茎的石蜡切片和显微观察发现,同一藓类植株的嫩茎和老茎,茎结构稳定,不同种藓类植物茎横切面具有不同特征.植物体茎横切面形状、表层细胞的层数、细胞大小和细胞壁厚薄、皮层细胞大小和形状、中轴的有无以及比例等特征可以作为藓类植物的分科分类依据之一.     

Investigation of the mechanism of temperature sensitivity of the electroreceptors of ampullae of lorenzini

In experiments on Black Sea skates (Raja clavata), the potential of the receptor epithelium of the ampullae of Lorenzini and spike activity of single nerve fibers connected to them were investigated during electrical and temperature stimulation. Usually the potential within the canal was between 0 and –2 mV, and the input resistance of the ampulla 250–400 k. Heating of the region of the receptor epithelium was accompanied by a negative wave of potential, an increase in input resistance, and inhibition of spike activity. With worsening of the animal's condition the transepithelial potential became positive (up to +10 mV) but the input resistance of the ampulla during stimulation with a positive current was nonlinear in some cases: a regenerative spike of positive polarity appeared in the channel. During heating, the spike response was sometimes reversed in sign. It is suggested that fluctuations of the transepithelial potential and spike responses to temperature stimulation reflect changes in the potential difference on the basal membrane of the receptor cells, which is described by a relationship of the Nernst's or Goldman's equation type.I. P. Pavlov Institute of Physiology, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. I. M. Sechenov, Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. Pacific Institute of Oceanology, Far Eastern Scientific Center, Academy of Sciences of the USSR, Vladivostok. Translated from Neirofiziologiya, Vol. 12, No. 1, pp. 67–74, January–February, 1980.