兔出血症病毒2型理化特性研究

【目的】本研究旨在研究该病毒的理化特性,评价不同处理条件对RHDV2的杀灭效果。【方法】本研究拟对临床疑似RHDV2感染致死的家兔进行RT-PCR鉴定病原,并利用不同pH值、不同温度、常用兽用消毒剂、不同浓度甲醛处理RHDV2,通过PMA-RT-qPCR对病毒理化特性进行研究。【结果】经RT-PCR检测与测序分析,确诊为RHDV2感染,该毒株VP60基因序列与GenBank中RHDV2(登录号:MN276176.1)一致性为98.35%。PMA-RT-qPCR结果表明,RHDV2对酸碱、高温、兽用消毒剂、甲醛均表现不同程度的敏感性。酸碱处理病毒,随pH值降低或升高,病毒杀灭率均有提高。65℃处理病毒30 min后,病毒杀灭率可达77.61%,83℃处理5 min后,病毒杀灭率可达95.10%。RHDV2对3种所测兽用消毒剂均敏感,其中聚维酮碘对RHDV2杀灭作用最好,作用30 min后,病毒杀灭率达88.78%。0.3%甲醛的杀灭率优于0.2%甲醛,作用30 min后,其杀灭率可达82.22%。【结论】本研究探究了RHDV2的理化特性,该病毒对酸碱、高温、兽用消毒剂、甲醛均有不同程度的敏感性。本研究为RHDV2的诊断、临床消毒剂的选择提供了参考依据,为该病毒致病机理研究与疫苗研发奠定基础。     

两种甲型肝炎病毒抗原快速检测方法的建立

目的建立两种甲型肝炎病毒抗原(HAV-Ag)检测试剂盒,并对其检测效果进行评价。方法生物素标记甲型肝炎病毒抗体(HAV-Ab)与辣根过氧化物酶标记亲和素联合应用建立甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法;同时使用辣根过氧化物酶标记HAV-Ab作放大系统建立双抗体夹心甲型肝炎病毒抗原ELISA检测试剂,对比两种检测方法的特异性、灵敏度及实际应用效果。结果用生物素标记甲型肝炎病毒抗体-辣根过氧化物酶标记亲和素作放大系统建立的甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法,较双抗体夹心ELISA检测方法灵敏度高1～2个稀释度;两种检测法均对10余种病毒无交叉,P/N值BA-ELISA检测法较高。结论甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法是一种灵敏度高,特异性好,方便快捷的检测方法,可广泛应用于甲型肝炎病毒研究及临床检测中。而甲型肝炎病毒抗原双抗体夹心ELISA检测法,检测灵敏度适中,操作简单,更适用于甲肝疫苗生产检定。     

微酸性电解水对人员手部和即食蔬菜消毒效果的研究

本实验研究了微酸性电解水对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌菌悬液的杀灭作用,以及微酸性电解水对人员手部冲洗及黄瓜和生菜浸泡法的消毒效果。结果表明,采用有效氯浓度为80 mg/L的微酸性电解水对含有0.3%有机干扰物的大肠杆菌菌悬液,作用1 min,杀灭对数值大于6;对含有0.3%有机干扰物BSA的金黄色葡萄球菌菌悬液,作用2 min,杀灭对数值大于5;采用40 mg/L的微酸性电解水清洗手部1 min,三次实验对手部微生物杀灭对数分别为1.77、1.86和1.81;采用有效氯浓度为80 mg/L的微酸性电解水将黄瓜和生菜分别浸泡30 min,三次实验对黄瓜样本表面微生物的平均杀灭对数值分别为1.15、1.04和1.41;三次实验对生菜样本表面微生物的平均杀灭对数值分别为2.31、1.89和2.89。     

长春花组织培养条件的最优化

确定出长春花的愈伤组织诱导条件。优化长春花的组织培养的外植体、消毒方法、激素的种类和配比。叶柄作为诱导培养的外植体,2．5％有效氯的次氯酸钠消毒15min-20min,2,4－D：Kt＝2－3．5ppm:1ppm的激素诱导下11d诱导出生长良好、呈疏松颗粒状的愈伤组织。     

鸡的胚胎发育阶段透明标本的制作

1.药品、用具重铬酸钾、冰醋酸、甲醛、甘油等配制成混合液。玻璃杯、镊子等。 1 号液每克重铬酸钾加水100毫升(可适当多配些备用)。 2 号液冰醋酸175毫升、甲醛500毫升加水1850毫升。 3 号液 10％甲醛、2％甘油加88％的水。     

二氧化氯杀灭除盐水系统中有害菌的研究

本文报道了杀菌剂二氧化氯对热电厂除盐水系统中有害菌的杀灭作用,并与氯的杀菌率作了比较。利用二氧化氯进行杀菌时,对粘液异养菌使用2ppm;铁细菌、硫酸盐还原菌使用1ppm;真菌使用2ppm,杀菌率达90—99％;而使用氯达到同样杀菌率需4—5 ppm。杀灭天然菌膜中细菌、真苗则需比人工混合菌提高三分之一以上的投药量。在5—60 min的接触时间内杀菌率提高5％,低剂量下随环境pH值(6一11)和温度(10—50℃)的上升,杀菌率有所提高。除50ppm以上的蛋白胨外,所试的糖、酸、氨均不影响二氧化氯的杀菌活性,但明显降低氯的杀菌作用。二氧化氯杀菌中出现失话余量,它同初始投量相比,杀菌率最高可差20—30％。     

含氯消毒饮用水对微生态制剂使用的影响

目的了解临床使用消毒饮用水稀释益生菌产品,对益生菌活菌数的影响。方法配制不同有效氯水溶液,测定不同放置时间四个菌种活菌数变化情况。结果微囊包被屎肠球菌、蜡样芽胞杆菌在有效氯5 ppm和10ppm中使用有效活菌数不受任何影响;微囊包被粪肠球在有效氯5 ppm中浸泡2 h内使用,不影响其有效活菌;而在10ppm中1 h之内使用有效活菌数不受影响;微囊包被枯草芽胞杆菌在有效氯5 ppm中1 h之内活菌数不受影响,而增加浸泡时间及有效氯浓度都会影响其有效活菌数。结论在临床使用微生态产品可以使用含氯消毒饮用水稀释但是需尽快用完不要超过否则影响部分菌株的使用效果。     

紫外线对甲型肝炎病毒灭活机理的研究

自1979年Provost体外培养甲型肝炎病毒（HAV）首获成功以来［1］,有关HAV对多种理化因子抗力的研究不少【’1,但对其具体作用机制,迄今尚未见诸报道。为此,本研究通过观察UV照射对HAVRNA链与衣壳蛋白完整性等的影响,探讨UV对HAV的灭活机理,为灭活HAV的实际应用提供理论基础。材料与方法1病毒与细胞受试毒株为HAVHM－175株,其培养细胞为非洲绿猴肾细胞MEK株,生长液为Engle”s液。生长与维持培养温度分别为37℃和35℃,2病毒灭活试验将纯化HAV悬液均匀涂布于细胞培养板孔内,室温干燥,置照射强度为300pw八mZ紫外灯下6…     

洁净区消毒剂杀菌性能验证

目的验证5种消毒剂的杀菌性能及消毒效果,为环境微生物控制的策略及实施提供依据。方法采用中和剂鉴定试验测定相应中和剂的中和效果,然后通过悬液定量杀灭试验测定消毒剂的杀菌效果和作用时间;最后通过载体定量杀灭试验测定消毒剂在最短有效作用时间下对不同载体表面微生物的杀灭效果。结果试验选取的中和剂对测试的消毒剂有良好的中和作用,中和剂及中和产物对测试微生物的生长无显著影响,可用于悬液定量杀灭试验及载体定量杀灭试验。悬液定量杀灭试验中,5种消毒剂对测试微生物均具有较高的杀灭作用,对细菌的杀灭对数值在4.26～6.44之间,对真菌的杀灭对数值在3.51～5.35之间,芽孢杆菌的杀灭对数值为4.21。载体定量杀灭试验中,消毒剂对细菌的杀灭对数值在4.25～5.65之间,对真菌的杀灭对数值在3.31～4.72之间,芽孢杆菌的杀灭对数值为3.61。结论 5种消毒剂对测试微生物的杀灭效果均符合标准规定,可用于洁净区的表面消毒灭菌。     

一组玉米胚钙沉淀蛋白的初步研究

从玉米胚中分离出一组理化性质相似的可为钙所沉淀的蛋白。该组蛋白可被3％的三氯乙酸和55％的硫酸铵可逆沉淀,具有较高的热稳定性,在93～94℃下5min不沉淀。该组钙沉淀蛋白可被等于或大于1mmol／L的CaCl2可逆地沉淀,但不被MgCl2或NaCl沉淀。该组蛋白在EGTA存在下可与phenyl－sepharose4B结合而被含Ca2 的缓冲液所洗脱。它们由7种蛋白质组成,亚基分子量为16～103kD。它们的一些理化性质类似于从动物肌肉细胞中提取的钙结合蛋白calsequestrin,其功能可能与缓冲和调节细胞游离Ca2 水平有关。