利用速率区带离心数据计算沉降系数

速率区带离心法原本用于分离粒子和大分子。经Martin的发展,利用速率区带离心数据可以计算粒子的沉降系数,结果相当满意。此法的优点在于,不适于分析离心机测定的粒子,如亚细胞,可用此法测定其沉降系数,并且可用测定生物活性的方法测定区带的位置,样品不要求纯化,这些都是优于分析离心机之处。又由于可在制备超速离心机上完成,因此得到广泛的应用。在Martin之后,为了便于应用,许多人在计算上做了些改进,多数是就着某些型号转头、各别实验条件,制成数值表供计算用。其中较     

肌酸激酶胍变性与失活的关系

肌酸激酶(CK2.7.3.2)催化磷酸肌酸与ATP相互转化的反应。姚启智等曾对其在盐酸胍中的构象变化与失活动力学进行了比较研究,发现在低浓度变性剂中,失活的速度与程度都远大于构象变化。此酶为球蛋白,由两个可以解离的相同亚基组成,分子量82,600。本文在最适pH附近(pH9.0)测定了不同浓度盐酸胍中酶的沉降系数,对其解聚与构象变化进行了研究,以探讨快失活、慢构象变化与解聚的关系。 兔肌肌酸激酶的提取、活力测定、盐酸胍的纯化方法与文献[1]相同。沉降系数用日立282-型分析超速离心机于20℃左右测定,Schlieren光学系统,标     

浅谈超速离心技术在生物学中的应用

超速离心机是一种利用高速旋转的转头所产生的强大离心力场,对样品进行分离、提纯、分析的精密仪器。从1926年瑞典物理学家Sydberg研制成功第一台超速离心机以来,至今已有五十多年的历史。超速离心机已有小规模的试制到成批地进行商品生产。由于超速离心机的产生和超速离心技术的发展以及电子显微镜的作用,人们对细胞的结构和功能的了解越来越清楚了。过去人们只能在电子显微镜中看     

毛细管在离心机制冷系统中的应用

高速冷冻离心机是医学临床分析中不可缺少的设备,它的制冷系统一般均有四大关键部件,即压缩机、冷凝器、节流装置和蒸发器。国产离心机中制冷系统的节流装置均采用热力膨胀阀,但热力膨胀阀有其本身固有的缺点,如结构比较复杂,易泄漏制冷剂,易产生故障等。国外60年代以来已开始试验采用毛细管来替代热力膨胀阀,如美国Beck-man公司生产的高速、超速离心机,日本久保田、日立生产的高速、超速离心机均采用毛细管作为制冷系统的节流装置。毛细管与热力膨胀阀相比,有其独特的优点:     

GLL-18高速冷冻离心机

随着科学技术的发展,离心机的使用日趋广泛。除生物学、化学、医药卫生、食品等传统使用离心机的部门之外,在某些国防尖端部门也开始使用离心技术。因而各主要工业国家都对离心机的研制和生产给予一定的重视,并建立了自己的离心机系列,包括低速、高速和超速。高速冷冻离心机是离心机系列中不可缺少的一个组成部分。我国各科研和生产部门所用高速离心机基本依赖进口,这不仅要花费国家的大量外汇,而且仪器发生故障时,修理比较麻     

人精细胞基因组DNA的分离提纯方法及其含量测定

虽然很容易从低等脊稚动物、哺乳动物的 一些细胞,甚至鱼的精子中分离得到DNA,但 从哺乳动物精细胞分离DNA则极为困难〔：,”, 直至1988年Bahnak等才提出一个有效的方 法‘习,但费用既高耗时又多,需用超速离心机及 贵重药品氯化艳,故无此仪器的实验室就无法 引用。由于工作需要,我们建立了一个不用超 速离心机的新方法,突破了精子头难破及破后 DNA 又被大量蛋白质紧密缠绕很难分离的双 重困难。     

家蚕核多角体病毒DNA

用酚或pH10缓冲液抽提家蚕核多角体病毒DNA 时,得到两种不同的结果。酚抽提的DNA 超离心沉降系数(S_20,w)是28.5S,电镜观察到的是线型DNA 分子,长约8微米,最长的可达10微米以上。聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sepharose 柱分析和蔗糖密度梯度超离心等分析中,都是一个组分。pH10缓冲液抽提的DNA,超离心沉降系数(S_(20),w)只有4.7S,聚丙烯酰胺凝胶电泳中迁移速度远比酚抽提的快,并且是一条扩散的宽带,Sepharose 柱分析亦表明分子量远比酚抽提的小。文章对这种不同的结果进行了讨论。     

乙肝疫苗的制备安全性

<正>我们在研制乙肝疫苗中,先用硫酸铵沉淀浓缩表面抗原(HBsAg),然后用KⅡⅠ离心机经密度超速区带离心等一系列步骤,提纯的部分HBsAg用PH为2的胃蛋白酶消化后置于8M尿素中灭活。在明胶     

酿酒酵母菌核糖体RNA沉降系数的初步研究

为研究酿酒酵母菌核糖体RNA(rRNA)的沉降系数,用酶解法和液氮研磨法裂解酿酒酵母菌的细胞壁,Trizol Reagent提取其总RNA,同时提取小白鼠和斑马鱼的总RNA进行比较.经紫外分光光度计检测和甲醛琼脂糖变性胶电泳后,RNA纯度好,条带清晰,无弥散或降解现象.试验发现,与酶解法相比,用液氮研磨法破碎酿酒酵母菌细胞壁提取总RNA所用的成本低,时间少,产率和纯度高,适用于少量样品RNA的提取.同时,酿酒酵母菌与斑马鱼和小白鼠总RNA电泳图谱表明,三者的"18S rRNA"在条带大小方面差异较小,而"28S rRNA"差异较大.利用分析型离心机测得的酿酒酵母菌两个较大rRNA的沉降系数分别为24.7S和18.1S.研究结果表明了真核生物rRNA种类的多样性.     

分析超速离心技术及其在分子生物学中的应用

分析超速离心技术是生物化学和分子生物学中的一种经典方法。该技术是基于热力学和流体动力学第一定律,利用分析超速离心机研究蛋白、核酸和聚合物及其他各种复合物在溶液状态下的行为。从该技术利用的仪器、原理和数据分析方法及其在分子生物学中的应用等方面进行了综述,并对这一技术在现阶段的应用进行了总结和展望,以期为国内相关领域研究人员提供参考。     

一种制备酵母菌线粒体DNA的简便方法

ASimpleProcedureforPreparationmtDNAinYeastJinJianlingGaoDongSunZhongdong(MicrobiologyDepartment,ShandongUniversity,Jinan250100)目前,制备酵母mtDNA的常用方法大致有两类：一是先提取混合DNA（核DNA＋mtDNA）,再通过CsCI密度梯度离心或柱层析法分离纯化mtDNA（’,’,”’;二是先通过蔗糖不连续梯度超离心法分离纯化线粒体,再从线粒体中提取mtDNA”’。这些方法虽然能够得到纯度较高的mtDNA,但超离心法需要配套设备（超速离心机等）,柱层析法对样品的回收浓缩比较复杂。本文报道的制备mtDNA的方法,不需…     

简易的沙眼衣原体扩增及纯化方法的建立

目的建立扩增培养和纯化沙眼衣原体的简化方法.方法采用HeLa细胞培养扩增衣原体,并应用一步法将沙眼衣原体纯化回收.结果获得了具有高感染活性的沙眼衣原体.结论该方法与常规方法相比更简便、快速,同时减少污染机会、不需要超声和超速离心机等设备.     

超离心法及其在放射损伤研究中的应用

超离心机是研究高分子化合物如生物大分子蛋白质、核酸和病毒等的一个重要工具。在分析方面主要用以测定这些生物大分子的沉降系数与分子量。在制备方面可用以分离这些生物大分子和有关的亚细胞成分。在研究电离辐射对细胞原发损伤的规律时,观察射线对生物大分子的损伤和亚细胞成分的破坏,及其对生化功能的影响等问题,超离     

超速离心机制备冷冻干燥保存菌种

利用超速离心机原有的冷冻系统和真空系统进行冷冻干燥的方法冻干保存了３０种国际标准菌种,４℃保存一年后,随机检测了其中的１８种,全部存活良好。用本法还可以制备出１、２、３、１０ｍｌ不同容量的冷冻干燥生物制剂,适用于中批量各种冻干生物制剂的生产和研究。一机两用,省资金,省用房,提高了机器的利用率。     

番茄叶绿体DNA的分离纯化及某些性质的研究

分离纯化了番茄的叶绿体DNA(ct DNA)。热变性分析测得Tm=82.1℃,由此计算得(G+C)％=31.2％。热变性微分曲线表明,在番茄ct NDA分子上存在着碱基组成比例分布上的异质性。分析超离心测得沉降系数S_(20w)=62.4。据此计算出分子量为80×10~6d。用电子显微镜观索了制备的ctDNA.     

一种大量提取纯化SPP1-DNA的简便方法

自从Silvano等于1969年发表了关于枯草杆菌噬菌体SPP1及其DNA的研究论文后,十几年来有关SPP1及其DNA的研究日渐深入。本文介绍一种简便而大量提取该噬菌体DNA的方法,该法在对Silvano等人的方法予以改进和简化之后,避免了使用昂贵的药品氯化铯和超速离心机,从而使噬菌体SPP1的效价达到了一定的高度,便于获得大量的SPP1-DNA。     

甲型流感病毒核糖核蛋白的提纯及其部分理化性质的研究

用Triton x-100和DOC裂解、Sephadex G200柱层析和密度梯度超离心方法,首次从流感病毒感染的鸡胚尿囊膜中提纯了甲型流感病毒RNP。经蛋白质和核酸含量测定、补体结台试验、免疫双扩散及SDS—PAGF鉴定,所提纯的RNP与从病毒中提取的RNP相同。并测出粤防77—38毒株RNP的等电点为4.6,沉降系数为56．1 S。     

小鼠腹水瘤病毒(SRSV)及其核糖核酸的纯化和某些性质的研究

从感染NIH3T3小鼠成纤维细胞上清液中分离小鼠腹水瘤病毒,用蔗糖密度梯度离心法纯化。从新鲜病毒中取小鼠腹水瘤病毒RNA,并用酚-氯仿抽提和蔗糖梯度分离。各组分的沉降系数(S)和分子量通过超速离心凝胶电泳分析测定。SRSV RNA主要由两组分组成,一是沉降系数约60～70S(热处理后约35S),还有少量18S和28S,另一是4～5S。35S组分在体外能指导无细胞蛋白的合成。     

分析微生物学及其现状

不久前,生物学一直是一门描述性的科学,是在整休或显微水平上,生物学家只能了解它们生命过程的结果,而不知引起结果的动力。由于电子显微镜、超速离心机以及各种色谱技术的应用,使人们认识到许多生物学现象的最后因果机理,是依赖于细咆内外各种特异性分子之间的纷杂关系,其中包括带有遗传信息和生物学活性的核酸、蛋白质、多塘和类脂等。     

菜白蝶的一种新病毒II．病毒的生物物理、血清学性质

用氯仿-丁醇处理和差速超速离心,再经两次蔗糖密度梯度离心,纯化了这株菜白蝶病毒。病毒沉降系数约132S。在氯化铯中的浮力密度为1．39g／cm3。在相同条件下测定,健康菜白蝶幼虫蛋白沉降系数分别为16S、38S、76S,而被病毒感染的死幼虫则为17S、62S、127S。