庆丰霉素的研究 Ⅵ.庆丰霉素的深层发酵

本研究的目的是探索庆丰霉素深层发酵的适宜条件。结果指出:庆丰霉素深层发酵的最适培养基成份为:玉米淀粉4％,糊精0.3％,黄豆饼粉2.0％,花生饼粉2.5％,硝酸钾0.2％,氯化钠0.3％,碳酸钙0.4％。适量的花生饼粉和硝酸钾对庆丰霉素的产生均有明显的促进作用,最适发酵温度为33℃。用庆丰链霉菌M15菌株进行摇瓶及发酵罐发酵,庆丰霉素的效价均达4500～5000微克/毫升。 铁对庆丰霉素产生有抑制作用,培养基中加入葡萄糖表现出葡萄糖效应。 对花生饼粉及硝酸钾促进庆丰霉素合成和铁及葡萄糖抑制庆丰霉素合成的可能作用机理进行了讨论。     

庆丰霉素的“土坑发酵”生产

庆丰霉素“土坑发酵”生产法是用固体种子代替二级液体种子,用土坑发酵代替温室瓶罐发酵或曲盘发酵,从而能有效地扩大生产规模,节约设备、投资、燃料和劳力。产品抗菌素效价7000单位左右。此法也适用于春雷霉素、灰黄霉紊等的士法生产。     

庆丰霉素的研究——Ⅳ.庆丰霉素的药效试验

在毛主席革命路线指引下,我们以阶级斗争为纲,坚持科研工作为无产阶级政治服务,为工农兵服务,与生产劳动相结合的方针,实行开门办科研。在广大工人、贫下中农和人民解放军的大力支持和热情帮助下,四年来,开展了庆丰霉素的药效试验。现将我们的试验结果和兄弟单位提供的试验结果整理如下:     

庆丰霉素光电比色效价测定

庆丰霉素的效价测定是用生物法,需要一定的设备。我们研究了用光电比色法测定庆丰霉素的效价的条件。与生物法测定相比较,光电比色测定的效价稍微偏低。现报告如下。     

用庆丰霉素防治蚜虫

我们从1978年开始,利用庆丰霉素防治蚜虫。现将结果报道如下。材料和方法     

SQP1质粒上庆丰霉素生物合成基因的变异和重组

通过原生质体形成与再生手段可以获得庆丰链霉菌SQPI质粒上庆丰霉素生物合成基因发生突变的菌株(Qmrq-)。这些突变株,每两个为一对在斜面上混合培养,使之发生杂交,在所得到的子代菌落中,能检出相当数量回复了庆丰霉素生物合成能力的菌落。推测这些菌落的出现是庆丰霉素合成基因不同突变位点发生遗传重组的结果。     

庆丰霉素防治小麦白粉病

白粉病对小麦产量有显著影响,据万县地区农科所调查,主要是每穗的粒数和千粒重下降,秕粒增加,病情愈重,影响愈烈。1973年我们协作组在万县地区共同进行了庆丰霉素防治小麦白粉病的初步试验,发现药效较高。1974     

庆丰霉素的研究I．产生菌的分类鉴定

本文研究了庆丰霉素产生菌的生物学特性及其所产生抗菌素的制菌谱,并和资料报道的相近似的已知种作了比较,认为这是一个属于链霉菌金色类群的新种,定名为庆丰链霉菌 (Streptomyces qingfengmyceticus n. sp. SAALMSIPP.)。     

纸层析法测定庆丰霉素

我们通过试验,找到了一种测定庆丰霉素的纸层析法,此法简易、快速、较准确。现介绍如下。一、试剂层析溶剂:正丁醇:冰乙酸:蒸馏水=2.8:1:1。显色剂:0.3克茚三酮,5毫升吡啶用95%的乙醇定容为100毫升配成。春雷霉素溶液(作定量标准用):贮备液为2毫克/毫升,用时以蒸馏水稀释为500微克/毫升。贮备液可在冰箱中保存三个月。     

庆丰霉素防治青草鱼细菌性烂鳃病

庆丰霉素是庆丰链霉菌产生的胞嘧啶核苷类抗生素,它是一种易溶于水的碱性物质,而且毒性低,使用安全,用途也广。对青草鱼烂鳃病、仔猪白痢病、以及水稻稻瘟病、麦类白粉病都有良好的防治效果。鱼,是人们普遍喜爱的副食品之一,随着人们生活水平的日益提高,对鱼的需求量也日渐增多。可是鱼类病害流行季节,易发生细菌性烂鳃病并并发多种病害,死亡率高,损失严重,     

庆丰霉素抗菌素对几种害虫的毒效试验简报

<正> 用抗菌素防治病虫害已有较长的历史,但用庆丰霉素抗菌素防治病虫害则是近几年研究成功的新农药。我们用它的溶液对菜粉蝶Pierisrapae(Linnaeus)、萝卜蚜Lipaphis erysimi(Kaltenbach)、二化螟Chilo suppressalis Walker及稻苞虫Parnara guttata Bremer et Grey进行毒效试验,发现对某些害虫有一定毒力,现简介如下。 对萝卜蚜的试验效果 共进行了二次试验:第一次,在甘蓝地进行。分别用庆丰霉素80、100、300、500ppm和清水对照处理(下同),喷药一次。浓度300ppm时,蚜虫下降率仅53.88％,毒力低。第二次,在萝卜地进行。分别     

在庆丰链霉菌中质粒参与庆丰霉素生物合成的遗传研究

本研究表明:庆丰链霉菌生物合成Qm的能力在遗传上是不稳定的。它可以自发或诱发丧失而产生不合成Qn、的q~-突变株,而q~-突变株的遗传性却十分稳定。试验了大约10~(10)个q~-菌株的孢子,没有发现有自发或诱发生成的q~ 菌落。但将q~ 及q~-菌株接种在同一斜面上混合培养,用药物抗性或营养缺陷型作为选择性标记,选择混合孢子液,我们发现q~ 菌株可以把Qm的合成能力转移给q~-突变株而产生转移接合子。据此,我们认为Qm的生物合成有质粒的参与。     

庆丰链霉菌SQP1质粒的种间转移和表达

庆丰链霉菌A201菌株的SQP1质粒可以通过混合培养接合转移到井冈链霉菌VA4菌株的细胞中,转移频率为2—8％。接合子p菌株的形态特征和亲株VA4相似,但却获得了产生抑制细菌的抗生素的能力,这种抑制细菌的能力在遗传上是稳定的。高温预培养能使接合子P2菌株抑细菌活性受到消除,消除频率达10％以上。鉴定P2接合子的发酵产物证明包含二个抗菌物质,一个是它本来的产物井冈霉素,另一个是新获得的抑制细菌物质庆丰霉素,后者的产生是由于SQP1进入新寄主细胞的结果。     

庆丰链霉菌细菌素的提纯和鉴定

利用Sephadex G25 凝胶过滤和磷酸纤维素层析相结合的方法,将庆丰链霉菌Q3所产生的细菌素——庆丰链霉菌素进行了提纯。这种细菌素是一种分子量为4737的蛋白性质物质,对热、紫外线和所试用的有机溶剂稳定,最适pH处于7.0—9.0。嗜热菌蛋白酶和链霉蛋白酶P可以完全破坏其活性,蛋白酶K能部分减低其活性,但所试验的其它蛋白水解酶类,以及DNA酶和RNA酶均无损其活性。根据庆丰链霉菌素对所测定的革兰氏阳性和阴性菌的生长影响,呈现抑制生长和促进生长,有一部分介于中间类型。     

庆丰链霉菌的致死接合现象

庆丰链霉菌各种衍生菌株的平板或斜面能自发产生麻点现象(pock),而当种内或种间杂交时,这种现象出现得更频繁。从麻点中心和周围孢子中可分别分离到具有产生麻点能力的菌株(Ltz~+)和本身虽然不能产生麻点但却可以作为检测麻点产生的指示菌株(Ltz~-)。 本文的研究结果表明,庆丰链霉菌的麻点现象是Ltz~+菌株和作为指示菌的Ltz~-菌株细胞之间在接合过程中的一种致死接合作用(lethal zygosis),致死率可达99％以上。决定这种致死能力的遗传因子能感染转移,可用已知质粒消除因子(如吖啶黄、高温预培养)处理及原生质体再生过程诱发消除。据此,我们认为庆丰链霉菌中产生麻点的能力很可能由质粒基因所决定。对于这种质粒的可能来源进行了讨论。     

关于利用Malaprade反应测定庆丰霉素化学效价的试验——兼与安徽省白湖农场试验站商榷

本期发表了两篇有关庆丰霉素效价测定方法的文章。1975年本刊曾发表过安徽省白湖农场试验站测定庆丰霉素效价的报告(见本刊2卷1期32页)。安康地区植保植检站根据两年的实验结果,对上述报告提出了不同看法。我们刊出此文,对开展学术讨论或有助益,亦可供进行这类工作的同志参考。四川省科委庆丰霉素协作组介绍了另一种方法,可供农业基层单位参考选用。     

庆丰链霉菌的连锁分析

用四点杂交方法对庆丰链霉菌的六个基因位点进行连锁分析,初步确定了它们在环形连锁图上的排列顺序,并同天蓝色琏霉菌A3(2)、龟裂链霉菌连锁图上的相应位点作了比较,它们之间是十分相似的。     

庆丰链霉菌质粒DNA的分离及电镜观察

本文报道用清亮裂解液PEG沉淀法从庆丰链霉菌M-15菌株中分离到质粒DNA,琼脂糖凝胶电泳用溴化乙锭染色及CsCl-EtBr密度梯度离心,在紫外线下观察均表明除了染色体带之外还有一条质粒带。我们摄制的电镜照片表明存在共价闭合超盘旋和开放环形两种分子构型,以多数大小相近的分子周长取平均值,按1微米=2.07×10~6道尔顿的公式计算,庆丰链老菌质粒DNA分子量约为10×10~6道尔顿。     

NTG对庆丰链霉菌诱发产生营养缺陷型突变体的研究

我们为了对庆丰链霉菌的遗传研究准备实 验材料,应用效果显著的化学诱变剂N一甲基一 N'一硝基-N一亚硝基狐(NTG),对庆丰链霉菌 进行诱变处理,筛选各种不同遗传标记的营养 缺陷型突变体,并分析了这些变种类型的分布 和突变机理。     

庆丰链霉菌原生质体的形成、再生及融合重组的研究

庆丰链霉菌生长在不含甘氨酸的培养基中,其细胞壁能很好地被溶菌酶溶解,释放出原生质体。原生质体不仅可以在R_2、RM和RG培养基上再生,而且在高渗庆丰链霉菌斜面孢子培养基上也能再生,孢子也比较丰满。A54菌株的再生频率是30.5％,A201菌株为38％。原生质体在4℃贮存过夜,再生频率降低30％以上。PEG能有效地诱导庆丰链霉菌原生质体融合重组,不同分子量的PEG诱导效果不一样,PEG1000的效果最好,重组频率可达10~(-2),和常规杂交相比,重组频率可以提高10—1000倍。用PEG诱导原生质体融合重组时,性因子的存在与否对重组频率没有明显的影响。