利用白树脂进行植物电镜制样

电子显微镜的分辨率在实际应用中。一方面取决于电镜本身的分辨率,同时还取决于标本的结构和反差。标本的结构在很大程度上受标本制备技术的影响,标本制备工作是电镜工作中最繁重最艰难的工作,同时又是重要的环节。目前,我们在电镜制样中,多用环氧树脂618,Epon812和Spurr为渗透包埋剂。由于这三种包埋剂粘度较高,并需同其它药剂配合使用,因此,在电镜样品制     

Lowicryl K4M 低温包埋显示甲状腺球蛋白的免疫电镜法

免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体 ,能显示抗原或抗体在细胞微细结构水平的定位 ,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。目前透射电镜观察的样本制备中 ,为保存良好超微结构的需要一般采用戊二醛、锇酸两种固定液 ;为使超薄切片有一定硬度采用的包埋剂如环氧树脂 6 18、 812需高温聚合 ,这些实验条件均可使多种抗原活性减低或丧失。因此 ,探索既能保持超微结构又能保存抗原性的电镜包埋剂及其应用很有必要。已知ＬｏｗｉｃｒｙｌＫ4Ｍ等低温包埋剂系列可能符合以上要求 ,为此我们进行了有关实验。材料和方法1.材料1 1…     

塑料薄切片技术

光学显微镜术观察用的薄切片,可用各种塑料包埋剂,如乙二醇甲基丙烯酸酯(glycolmethacrylate)和环氧树脂类(epoxy resins)包埋。这些塑料包埋剂经凝固后,很容易被切成1—2微米的薄切片,比传统的石蜡切片要薄得多;而且染色时无需经过脱蜡手续,便可     

环氧树脂厚切片的染色

供电子显微镜观察的超薄切片,一般用各种环氧树脂作包埋剂。用环氧树脂的包埋头也能切成厚1—2微米的切片,供光学显微镜观察。这种厚度的切片与几百埃计算的超薄切片相对而言,可称之厚切片或半薄切片。在超薄切片之前,用环氧树脂包埋头先切     

保持培养细胞原位、原形的超薄切片制备法

本文介绍先用环氧树脂Epon812包埋剂制成丘状膜,再在膜上培养细胞,直接将膜与细胞一起包埋,制备超薄切片。此种方法不仅能克服以往培养细胞需要离心成团,容易造成细胞破碎、变形的缺点;还能避免琼脂预包埋法悬浮细胞造成的抗原封闭;并能得到为数较多的连续超薄切片。它操作简便,较好地保持了培养细胞生长的原来位置及原有形状,为培养细胞进行免疫电镜的操作和提高制备培养细胞超薄切片的数量和质量提供了一种有效的途径。     

去包埋剂制片术揭示小麦珠被组织中微丝的跨胞分布

以ＤＧＤ包埋,去包埋剂制片法,结合常规电镜制备术,观察研究了小麦珠被组织中胞产连丝的结构与分布特征及其与微丝的关系。试验结果表明,同层珠被细胞间壁上胞间连丝的分布密度比上下层珠被间的要显著地高得多;珠被中是连丝保持因有的正常结构,孔径３０－４０ｎｍ,变动幅度不大,观察不到如作者以前２在小麦珠心和所见的那种甩镜连丝经结构个性而扩大,转变为开放态的景观。以去包埋剂制的进一步揭示,从胞南骨架网络表层有纤     

用水溶性环氧树脂包埋生物组织和制片方法

有各种包埋介质可用于生物组织的电子显微镜超薄切片和光学显微镜切片,其中以环氧树脂(如Epon 812、国产环氧树脂~#618等)使用最广泛。但大多数包埋介质是不溶于水的。常规的组织脱水剂如乙醇、丙酮和环氧丙烷(propykne oxide),它们都是良好的脂溶剂,因此组织中脂肪和蛋白质可能在脱水过程中往往被流失,而引起细胞亚显微结构的人工损伤。近年来新出现的水溶性包埋剂也能作脱水剂使     

辛德毕斯病毒装配及其6K蛋白与中间纤维的关系

用温和的选择性抽提方法与整装细胞电镜技术,DGD包埋-去包埋剂电镜技术相结合,对辛德毕斯病毒的装配与宿主细胞中间纤维的关系进行了探讨。电镜观察清晰地显示了病毒“装配中心”被中间纤维所网络,病毒的装配过程显然是以中间纤维为支架;正在装配的核壳体与已装配的核壳体紧密结合在中间纤维丝上。根据电镜照片分析,核壳体可能是沿中间纤维由装配中心向外扩散。应用人工合成6K蛋白所得抗体进行胶体金标记,证明辛德毕斯病毒非结构性6K蛋白也与中间纤维紧密结合。     

去包埋剂制片术揭示小麦珠被组织中微丝的跨胞分布

以DGD(diethylene glycol distearate)包埋、去包埋剂制片法,结合常规电镜制备术,观察研究了小麦珠被组织中胞间连丝的结构与分布特征及其与微丝的关系。试验结果表明,同层珠被细胞间壁上胞间连丝的分布密度比上下层珠被间的要显著地高得多;珠被中胞间连丝保持固有的正常结构,孔径30—40 nm,变动幅度不大,观察不到如作者以前在小麦珠心和胚乳中所见的那种胞间连丝经结构修饰而扩大、转变为开放态的景象。对去包埋剂制片的观察进一步揭示,从胞质骨架网络表层有纤细微丝以分散状向外伸展突入分界壁,时而可见各个微丝横贯分界壁而连接相邻骨架网络的图象。联系珠被中正常胞间连丝结构的稳定性与各个微丝以分散状跨越分界壁,讨论了微丝参与胞间连丝结构的可能性与可能模式。     

单殖目双睾吸虫(Diplorchis sp.)钩毛蚴眼点的超微结构

双睾吸虫自由生活的幼虫(钩毛蚴)是由寄生在沼蛙(Rana guentheri Boulcnger)膀胱内的成熟虫体所产的虫卵孵化而获得。按常规的方法清洗虫体后,于2％戊二醛和1％锇酸中双重固定,然后在各等级浓度的乙醇和丙酮中脱水,用618~#环氧树脂和Epon 812包埋剂浸透和包埋。经超薄切片后用醋酸铀和柠檬酸铅染色,最后在JEOL,JEM-100CXI,型透射电子显微镜下观察并进行显微摄影。     

电镜酶细胞化学样品微波制备技术

在电镜酶细胞化学技术中，我们在样品的固定，温育，包埋剂浸渍和聚合等主要过程中均使用微波照射，不仅缩短了制样时间，而且由于使用了小标本，间歇微波照射，低温水浴及适当延长样品在固定液中的时间等改进技术，使细胞超微结构和酶的活性都得以更好保存。酶染色清无扩散，定位准确。     

文蛤肉水解液的致突变性

目的评价文蛤肉水解液的致突变性,为文蛤的开发利用提供实验数据。方法采用Ames试验、小鼠嗜多染红细胞骨髓微核试验和CHL细胞体外染色体畸变试验3项致突变性试验,检测文蛤肉水解液有无致突变作用。结果 Ames试验中文蛤肉水解液各剂量组回变菌落数均在正常范围内,均未超过自发回变菌落数的2倍,在加与不加S9时5株试验菌株结果为阴性。CHL细胞体外染色体畸变试验,文蛤肉水解液各剂量组的染色体畸变率与阴性对照组比较,差异无显著性(P0.05),结果为阴性。小鼠骨髓微核试验,各剂量组的微核率与阴性对照组比较,差异无显著性(P0.05),结果为阴性。结论在本试验条件和范围下,文蛤肉水解液未见潜在的致突变作用。     

噻吩磺隆的毒性及致突变性

选用大鼠、豚鼠及家兔,采用经口及皮肤,粘膜染毒途径,研究其急性毒性。同时有Ames试验,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验进行致突变性研究,了解噻吩磺隆的毒性及致突变性。大鼠急性经口LD50大于5000mg／kg,经皮LD50大于2000mg／kg。家兔皮肤刺激试验阴性,轻度眼刺激性和弱致敏性。Ames试验,微核试验及小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验结果均为阴性。结论 噻吩磺隆属低毒性农药,在本实验条件下无致突变作用。     

薄切片的放射自显影术

薄切片是指厚度为0．5～1μm的树脂类切片。文献中称它为厚切片（thicksection）或半薄切片（semithinsectio）,籍以与电镜观察用的薄切片（thinsection）区别。我国已习惯称电镜用的切片为超薄切片,因此,把这类切片称薄切片就能说明其比超薄切片厚,比普通石蜡切片薄的特性。用薄切片作放射自显影具有下列优点：（1）改善分辨力：放射自显影象的分辨力与样品的厚度成反比,薄切片的厚度低于普通石蜡切片,所以其分辨力高于用石蜡切片制作的放射自显影象的。（2）减少人工假象：用薄切片作放射自显影,不需去除包埋剂,因此,提供了平正…     

Ames试验在水质检测方面的应用

近年来 ,水体污染日趋严重 ,各国学者从氯化后饮水中分离出多种致突变、致癌物质。为此我们采用Ames试验 ,对珠江流域主要取水点的水源水和对应自来水中的有机致突变物污染情况进行了研究。研究表明 ,部分取水点的有机致突变物污染较严重 ,并且氯化消毒后自来水的致突性大于水源水的致突性。因而 ,加强饮水中致突变物质的检测 ,改进净水消毒剂和净水流程很有必要。     

一种在两栖类胚胎的免疫组织化学研究中有多种用途的方法

本文介绍了我们最近发展的一项用于两栖类胚胎的免疫组织化学研究的技术。两栖类胚胎经过适当的化学固定以后,用振动切片机可以得到50—100 μ的切片。我们用这样的切片进行免疫萤光和免疫酶标染色,均得到满意的结果,可以进行光镜(共聚焦显微镜,普通显微镜)及透射电镜的观察。由于在整个过程中避免了使用有机溶剂及包埋剂,所以最大限度地保存了抗原性。与传统的各种免疫组化技术比较,切片的各部分组织均能迅速与抗体反应,组织保存相当完好,可以满足电镜观察的要求。运用这种方法,还可以将同一胚胎的不同切片分别用于光镜和电镜观察,使结果更具说服力。     

北京鸭B淋巴细胞的中间纤维—核纤层—核内骨架体系

以北京鸭腔上囊为实验材料,应用细胞分级抽提方法与非树脂包埋－去包埋剂的电镜制样技术相结合,显示出Ｂ细胞中相互连结的中间纤维－核纤层－核内骨架体系的超结构及其分布,中间纤维交织成网络状,纤维直径在９－１１ｎｍ,其成份是分子量为６７ｋＤ,等电点约为６．２的波形蛋白,核纤民支呈片层状结构环绕在核区周围,其主要成份是分子量为６７ｋＤ,等电点偏酸性的Ｌａｍｉｎ Ｂ。核内骨架由粗细不一的纤维形成网络结构,其上     

BaFe12O19血管内无机微粒栓塞材料的生物相容性研究

目的:本研究旨在探讨BaFe12O19微粒的生物相容性.方法:对BaFe12O19微粒进行一系列生物相容性实验,包括Ames致突变试验、细胞毒性试验、全身急性和亚急性毒性试验、溶血试验、出血和凝血时间测定、凝血试验等.结果:BaFe12O19微粒无毒性,无致突变性,对出血和凝血时间无影响,不引起溶血和凝血.结论:BaFe12O19微粒具有良好的生物相容性,有可能成为一种全新的血管内栓塞材料.     

植物样品制备的两种定向包埋方法

用作电镜观察的植物样品的制备,一般只能将植物样品平放在胶囊底部包埋。如果需要观察植物组织一定部位的细微结构,例如观察叶片或根的横断面的组织超微结构等,则一般包埋方法就不适用,即或在粘稠的环氧树脂中植物样品也是不易直立的,这只有采用定向包埋方法。     

介绍两种新颖的薄切片塑料

不久前曾先后介绍了两种乙二醇甲基丙烯酸酯(简称GMA)薄切片塑料。现在我再介绍两种供高分辨率光学显微镜观察的塑料产品。这两种产品经我们用植物材料试做切片,发现它们各有一定的优点。现将应用这两种塑料包埋剂的经验介绍如下: Ⅰ.GMA-Quetol 523塑料 GMA-Quetol 523塑料包埋剂,是日本人Kushida等首先使用的。基本配方包括三种