苏云金杆菌发酵后处理技术与产量关系研究

本文采集并分析了苏云金杆菌Bacillus thuringiensis发酵后处理技术,揭示了Bt发酵后处理生产膜过滤数据分析、喷雾干燥数据分析和产量的关系,以期对Bt实际生产过程进行高效控制。     

利用废弃物发酵生产苏云金芽胞杆菌的研究进展

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)是目前应用最广泛和产量最大的微生物杀虫剂,它对鳞翅目、双翅目、鞘翅目等许多害虫有特异毒杀作用,而对人类和其它非靶标动物以及农作物无害。长期以来,人们一直致力于苏云金芽胞杆菌的筛选及发酵研究,以期能获得高毒力的绿色生物杀虫剂产品。由于发酵培养基成本较高,利用废弃物生产Bt杀虫剂既有利于资源循环利用和环境保护,又能降低Bt杀虫剂的多重优点,因此成为近年来国内外的研究热点。本文简要介绍了筛选苏云金芽胞杆菌的基本方法以及利用废弃物发酵生产Bt杀虫剂的研究进展。方法以及利用废弃物发酵生产Bt杀虫剂的研究进展。     

苏云金杆菌溶氧控制发酵

利用BIOSTATC10自控发酵罐 ,研究了Bt菌种Gc - 91进行间歇培养时氧的供需特性。研究表明 ,以生产培养基配方进行发酵时 ,生长高峰期的临界氧浓度在DO12 .0 %～ 17.5%之间 ,控制溶氧接近于临界氧浓度进行发酵 ,Bt晶体含量和毒力效价有大幅提高。     

中国10年抗虫棉大田生产:Bt抗虫棉技术采用的直接效应和间接外部效应评估

中国自1997年便开始大面积种植Bt抗虫棉.本研究试图分析中国种植抗虫棉10年后减少防治棉铃虫杀虫剂用量的可持续性.通过对1999~2007年4个省16个村农户大田Bt抗虫棉生产的跟踪调查数据分析,发现生产上控制棉铃虫的杀虫剂用量不仅未增加,反而呈下降趋势;虽然没有直接回答Bt抗虫棉能够维持并增加其生产率的机理,但本研究发现,10年来不仅抗虫棉,而且非抗虫棉防治棉铃虫的杀虫剂用量也显著减少,这与抗虫棉广泛种植后棉铃虫的种群总量下降有关.这些发现对于Bt技术效应分析具有重要意义,同时,本文所采用的同时评估抗虫转基因技术生产的直接效应和间接外部性效应的方法,对于未来该领域的同类研究也具有借鉴意义.     

苏云金杆菌幕虫亚种菌株的特性研究

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Bt53菌株是一株对仓库害虫具有高效杀虫活性的菌株,为其能在生产上有效控制仓储害虫,作者分别采用液体培养法、SDS-PAGE、喷雾处理等方法就该菌株的培养、生化及杀虫活性进行了系统的研究。研究结果表明在摇瓶培养条件下菌株Bt53优化培养基：玉米粉0．5%、黄豆粉2．0%、酵母粉0．10%、蛋白胨0．75%、磷酸二氢钾0．75%、碳酸钙0．15%;硫酸镁0．035%,培养时间40h,pH7．5,转速180r/mim,温度30℃为该菌株最佳培养条件。通过生化测定初步确定Bt53菌株为幕虫亚种。Bt53菌株晶体有菱形、长椭圆形、不规则形晶体及镶嵌形晶体,晶体大小不均,可产生分子量为43kD、15kD、19kD的晶体蛋白质。菌株Bt53对烟草粉螟二龄幼虫的室内防效以9d后发酵原粉稀释100、300倍的防效最好,超过80%。烟叶仓库中使用烟叶均匀喷雾处理比烟包表面喷雾处理效果稍好,防效较高。Bt53菌剂对烟叶的化学成分影响不大。用Bt53菌株防治烟叶仓库害虫有巨大的发展潜力。     

广谱重组苏云金杆菌的生产工艺研究

对既杀鞘翅目昆虫又杀鳞翅目昆虫的广谱重组Bt菌株LCJ 0 8,LCJ 12进行了摇瓶发酵和中试发酵。通过 2 .4吨罐发酵试验 ,优化了发酵培养基和发酵条件 ,发酵效价达到 140 0 - 170 0IU/μL(棉铃虫 )和 2 0 0 0CU/μL(柳兰叶甲 )。以直接喷雾干燥和加填充料后喷雾干燥方法生产的粉剂 ,效价分别达到 2 50 0 0 - 34 0 0 0IU/mg和 82 0 0IU/mg。以低倍浓缩工艺生产的悬乳剂 ,毒力效价 2 50 0IU/μL以上。     

苏云金芽胞杆菌Bt0601发酵条件的优化研究

应用正交实验和单因子实验,结合杀虫毒力测定,对携带杀虫基因cry1Ac和虎纹捕鸟蛛毒素基因Hwtx-I的苏云金芽胞杆菌工程菌Bt 0601的发酵工艺条件进行研究。实验获得的苏云金芽胞杆菌Bt 0601工程菌的最佳发酵条件为:发酵初始酸碱度控制在pH 7.5、发酵温度(30±0.5)℃、转速200 r/min、通气量为30 mL/300 mL,接种量为4%,培养44 h。此外,本文还对Bt 0601菌株在30 L发酵罐中的发酵特性进行了研究,摸索了通气量对其大罐发酵的影响,确定大罐发酵的最佳通气量为1.75 L/min。     

苏云金杆菌Bt33发酵条件优化及应用于烟草粉螟防治的研究

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Bt33菌株是从736株野生型Bt菌中筛选分离的1株对烟草粉螟具有高效杀虫活性的菌株,鉴定为科尔默亚种。本研究对Bt33菌株进行了初始接种量、培养基及发酵条件优化,晶体蛋白质电镜观察和SDS-PAGE分析,在室内及烟叶仓库中进行了防治效果测定,对施用Bt33后的烟叶进行了化学成分分析及单体烟评吸。结果表明,应用Bt33防治烟草粉螟效果好;对烟叶的化学成分影响不大;单体烟评吸分显著高于对照,用Bt33防治烟叶仓库害虫烟草粉螟有一定的发展潜力。     

碱前处理白酒丢糟生物质转化苏云金芽胞杆菌培养基

为了减少环境污染和资源浪费,利用浓香型白酒丢糟作为原料生产还原糖用于培养苏云菌芽胞杆菌(Bt)。采用不同浓度、温度、氢氧化钙和氢氧化钠前处理浓香型白酒丢糟,HPLC测定前处理液还原糖产量,并利用前处理液培养Bt。结果表明,用0.75%Na OH在100℃下处理1 h后,还原糖产量最高(81 g/kg)。而芽胞产量最高的前处理条件为1%Ca(OH)_2在50℃下处理1 h,芽胞产量高达4.6×10~7CFU/m L。利用白酒丢糟前处理液培养Bt,既能有效的减少资源浪费和环境污染,又能实现Bt制剂商业化。     

温度对Bt水稻及其非靶标害虫褐飞虱生态适应性的影响

【背景】温度是影响植物生长发育最为重要的环境因子之一。明确温度对Bt水稻及其非靶标害虫的影响有助于今后Bt水稻的推广应用。【方法】设置不同的温度梯度(26、30和34℃)分别处理Bt水稻T2A-1(表达Cry2A蛋白),在处理后不同天数内分别测定Cry蛋白、叶绿素、草酸、可溶性糖和总氮含量,同时评价不同温度处理下Bt水稻上褐飞虱的生态适应性。【结果】Cry蛋白含量显著受温度影响,随着温度升高Cry蛋白含量下降。温度、处理时间及两者相互作用均显著影响Bt水稻T2A-1的叶片叶绿素、叶鞘草酸、可溶性糖和总氮含量。叶绿素含量在26℃处理20 d时高于30、34℃的处理。随着温度的升高,Bt水稻叶鞘草酸含量升高。可溶性糖含量高温(30和34℃)处理后20 d低于26℃处理。Bt水稻叶鞘内可溶性氮含量随着温度的升高而升高。温度对非Bt水稻MH63上叶绿素、草酸、可溶性糖和总氮含量的影响与T2A-1趋势一致。高温(34℃)处理的Bt水稻上的褐飞虱雌雄虫寿命、每雌产卵量及卵孵化率显著低于26℃处理。温度对非Bt水稻MH63上褐飞虱生态适应性参数的影响与T2A-1趋势一致。【结论与意义】温度对Bt水稻具有显著影响,且对Bt水稻上非靶标害虫褐飞虱的生态适应性产生不利影响。本研究有利于今后Bt稻田的害虫综合治理措施的制定。