大花美人蕉茎尖组织培养技术研究

以大花美人蕉(Canna×generalis)根茎茎尖为外植体进行组织培养技术研究,筛选出芽诱导适宜的培养基为MS+6-BA 8.0mg/L (单位下同)+TDZ 0.03;MS+6-BA 8.0+TDZ 0.03+NAA 0.1培养基能较好地诱导分化出丛生芽,继代增殖培养中与MS+6-BA 3.0+TDZ 0.03+NAA 0.1培养基交替使用可减少畸形芽,增殖系数达1.67;适宜的生根培养基为MS+6-BA 1.0+NAA 0.5,生根率达66.67%,且植株生长健壮,移栽易成活。     

中药材铁皮石斛组培苗不同培养基的筛选与优化

铁皮石斛组培苗在生长各个阶段对营养物质的需求不一样,培养条件不同组培苗生长结果也不一样。本研究以铁皮石斛种子为材料,通过无菌播种进行原球茎诱导、增殖、分化、生根试验,对各阶段培养基进行比较,以期筛选出最佳培养基条件,为将来铁皮石斛走向工厂化、标准化生产提供思考和借鉴。结果表明,种子萌发以及原球茎诱导的最佳培养基配方是1/2 MS培养基,35 d后萌发率达93.1%。原球茎增殖最佳培养基配方组合是MS+6-BA(1.5 mg/L)+NAA(0.5 mg/L),增殖系数达14.8。原球茎分化成苗的最佳培养基配方组合是MS+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L),分化率达92.1%,且长势良好。组培苗生根的最佳培养基配方组合是1/2 MS+NAA(1.5 mg/L),生根率达97.7%,根系健壮发达。     

紫花苞舌兰类原球茎诱导及植株再生

为建立紫花苞舌兰类原球茎离体再生体系,本研究以其腋芽为外植体,研究了不同激素浓度配比、添加剂对其类原球茎诱导、分化及生根诱导的影响。结果表明,外植体在1/2 MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+AC(活性炭)0.2 g/L+CW(椰汁)10%培养基上培养35 d后,获得无菌苗,其成活率达80%以上;无菌苗的顶端分生组织在1/2 MS+10 mg/L Picloram培养基上的类原球茎的诱导率最高,达75%;类原球茎在1/2 MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L培养基上培养45 d后分化出小苗,分化率为54%;小苗在1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+AC 0.2 g/L培养基上生根培养35 d后,生根率达85%以上;小苗驯化移栽成活率达95%,长势良好。     

红掌的离体组织培养与快速繁殖

本研究从红掌组培的实用化生产出发,在不同激素成份及浓度水平下,以MS为基本培养基,红掌的叶片或叶柄为外植体进行组培快繁试验。实验结果表明:MS+6-BA1mg/L+2.4-D0.1mg/L为最佳诱导培养基,诱导率可达89%以上,红掌的叶片诱导效果比叶柄较为理想。最适分化培养基为:MS+BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L,其分化率为93%;继代增殖培养基为MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L,增殖系数达7.1;适合生根诱导培养基为l/2MS+NAA0.2mg/L,生根率达96.5%以上。生根苗田间移栽后成活率可达95%以上。     

扁桃愈伤组织诱导及分化的研究

以扁桃优良品种'Naporeil'的茎段、叶片和花药作为外殖体,分别对其进行愈伤组织诱导和分化研究,以筛选愈伤组织的最佳诱导增殖培养基、分化培养基和生根培养基.结果表明,该品种以茎段、花药作为外殖体最易诱导获得愈伤组织,叶片不适宜作为外殖体诱导愈伤组织;愈伤组织的最佳诱导增殖培养基均为B5+0.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,愈伤组织诱导率为100%,增殖倍数最高可达7倍;茎段愈伤组织的分化培养基为MS+0.2 mg/L NAA+0.8 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT,分化率为71%;花药愈伤组织未见分化.由茎段愈伤组织再分化获得的不定芽在1/2MS+0.5 mg/L IBA培养基上诱导生根,并给以黑暗预处理可使生根率达80%以上.     

复叶槭顶芽组织培养再生体系的建立

初步建立了复叶槭顶芽组培再生体系。N-苯基-N'-1,2,3-噻二唑-5-脲(TDZ)可诱导复叶槭顶芽分化。复叶槭顶芽的最佳增殖培养基为MS 0.1mg·L-16-BA 0.01mg·L-1NAA,最佳分化培养基为MS 0.01mg·L-1TDZ,最佳生根培养基为MS 0.1mg·L-1NAA。     

紫花三叉白芨快繁技术研究

为建立白芨(Bletilla striata)高效实用的组织培养快繁体系,以紫花三叉白芨成熟未开裂的蒴果、块茎、叶片为外植体,筛选最佳外植体材料,并研究不同生长调节剂浓度培养基对原球茎萌发、丛生芽诱导以及生根影响。结果表明,白芨种子为最佳外植体材料;培养基KC + NAA 0.5 mg·L–1有利于白芨原球茎丛生芽诱导;培养基MS + 6-BA 2.0 mg·L–1 + NAA 0.2 mg·L–1 + 10%椰汁有利于丛生芽增殖及成苗;将2 cm高幼苗转入生根培养基1/2MS + NAA 0.5 mg?L–1中,其生根效果最好,生根率达98.67%。     

橙黄玉凤花种子萌发培养及小苗组培快繁研究

对橙黄玉凤花Habenaria rhodocheila种子进行无菌萌发培养以获得大量原球茎,并对原球茎组培,建立其快繁体系。结果表明,橙黄玉凤花种子以0.1%升汞消毒15 min为最佳处理。种子萌发培养基中,添加0.2%活性碳(AC)有利于种子萌发。种子萌发的最佳培养基为1/2MS＋NAA 0.5 mg·L-1＋AC 0.2%,原球茎增殖分化最佳培养基为1/2MS＋NAA 0.2 mg·L-1＋ZT 3.0 mg·L-1＋AC 0.2%;生根最佳培养基为1/2MS＋NAA 0.1 mg·L-1＋6-BA 2.0 mg·L-1＋AC 0.2%。     

大花蕙兰组培快繁技术研究

选用大花蕙兰杂交新品种1053为外植体,采用1/2MS为基本培养基进行大花蕙兰组培快繁技术研究,结果表明：类原球茎诱导的最佳外植体为大花蕙兰鳞茎,培养基最佳激素浓度配比为0.5 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA;类原球茎增殖与分化芽最佳激素浓度配比为1.0 mg/L 6-BA＋0.3 mg/L NAA;幼芽增殖的最佳激素浓度配比为2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA,最佳有机添加物为150 ml/L椰汁,幼芽增殖正交试验得出影响因素主次顺序：6-BA〉椰汁添加物〉NAA,优组合为2 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA、添加物椰汁150 ml/L;诱导生根的最佳激素浓度配比为0.3 mg/L IBA＋0.2 mg/L NAA,添加香蕉泥100 g/L对幼苗根生长有显著的促进作用。优化后的大花蕙兰组培快繁技术参数,可为大规模工厂化生产提供参考。     

铁皮石斛同源四倍体工厂化快繁工艺研究

以实验室前期诱导的铁皮石斛四倍体为研究材料,利用气孔、叶绿体、染色体计数及流式细胞仪等方法,对铁皮石斛同源四倍体株系的纯合性进行鉴定,在此基础上利用茎段扩繁和原球茎诱导、增殖、分化两种方案比较增殖效率,并对原球茎的倍性稳定性进行再鉴定。结果表明：（1）实验室的‘花自 2’株系为纯合同源四倍体。（2）茎段扩繁最佳增殖培养基为MS＋2.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+15%香蕉汁,茎段诱导原球茎最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L KT,诱导率达到76.66%;原球茎增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+15%马铃薯提取液,原球茎分化最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg/L 6 BA+20%马铃薯提取液,原球茎分化率达到85.70%;生根最佳培养基为1/2 MS＋0.5 mg/L NAA＋15%香蕉汁,生根率达到92.77%。（3）原球茎根尖鉴定结果表明,诱导的倍性可以稳定遗传。（4）瓶苗移栽的最佳炼苗时间为5 d,移栽成活率达92.30%。该试验建立了铁皮石斛同源四倍体株系新的快繁技术体系,为四倍体试管苗的工厂化生产和推广奠定了技术基础。     

春石斛优良品种‘森禾2006’组培快繁体系的建立

本文研究了春石斛‘森禾2006’的拟原球（PLBs）诱导、增殖、分化及壮苗和生根,建立了其组培快繁体系。结果表明：‘森禾2006’PLBs最适诱导培养基为1／2MS＋TDZ0．5mg·L-1＋水解酪蛋白2．0gL-1;PLBs增殖培养基为1／2Ms＋水解酪蛋白2．0gL-1;PLBs分化培养基为1／2MS＋KT1．0mg·L-1＋NAA0．1mg·L-1;壮苗生根培养基为Ms＋IBA0．5mg·L-1＋NAA0．1mg·L-1＋香蕉泥100．0g．L-1。     

杂交兰类原球茎增殖中芽分化的控制和快速繁殖

以‘玉女杂交兰’为材料,研究了培养时间、活性炭、切块大小和外源生长调节物质对类原球茎增殖和分化的影响。结果表明,培养时间、活性炭和切割处理对类原球茎增殖和分化影响显著,在培养基中添加活性炭或对类原球茎进行切割均能有效控制增殖过程中的芽分化。将类原球茎切成直径2~3 mm的小块接种到培养基MS＋1.0 mg.L-16-BA＋0.2 mg.L-1NAA＋0.3 g.L-1AC＋30 g.L-1蔗糖＋5.5 g.L-1琼脂中培养40 d,类原球茎增殖率为384.23%。将增殖后的类原球茎接种到培养基1/2MS＋1.5 mg.L-16-BA＋0.1 mg.L-1NAA＋20 g.L-1蔗糖＋5.5 g.L-1琼脂中培养40 d,芽分化率为463.06%。将分化的芽转入培养基1/2MS＋0.5 mg.L-1NAA＋0.5 g.L-1AC＋20 g.L-1蔗糖＋100 g.L-1土豆汁＋5.5 g.L-1琼脂中培养,生根率为100%,平均根分化数为2.80条.株-1。以泥炭土为基质,组培苗的移栽成活率可达97.78%。     

阔鳞鳞毛蕨孢子的无菌繁殖

以阔鳞鳞毛蕨（Dryopteris championii）成熟孢子为外植体,研究了不同植物生长调节剂及浓度对其孢子萌发、愈伤组织诱导、丛生芽分化及生根的影响。结果表明：1/2MS＋2%蔗糖为孢子萌发最适培养基,20 d后萌发率达65%;诱导愈伤组织的最适培养基为MS＋KT 0.5 mg.L-1＋2,4-D 1 mg.L-1,诱导率达39.8%,愈伤组织为绿色颗粒状;颗粒状愈伤组织在MS＋KT0.2 mg.L-1的培养基中生长出大量丛生芽,转化率可达66.3%;MS＋IAA 0.2 mg.L-1＋NAA 0.2 mg.L-1培养基可有效促进幼孢子体苗生根。     

红籽鸢尾高频离体再生条件的初步筛选

红籽鸢尾(Iris foetidissima Linn.)为鸢尾科(Iridaceae)鸢尾属(Iris Linn.)多年生草本植物,原产于西欧和非洲北部。该种的叶鞘呈深绿色剑形,蒴果饱满且蒴果成熟开裂后露出红、橙黄和白等不同色泽的种子并一直垂挂到翌年春天,集观花、观叶和观果为一体,观赏价值较高。另外,该种还具有耐寒性好、在长江中下游地区四季常绿、适应性强及耐粗放管理等优     

柳杉种子无菌苗组培快繁体系的建立

以柳杉种子在无菌条件下萌发的幼苗为外植体,研究3种基本培养基和3种植物生长调节剂对不定芽诱导、增殖及生根的影响,建立了完整的组培快繁体系。结果表明,柳杉种子经预处理后,用75%酒精消毒20 s,再用0.1%HgCl2浸泡600 s的消毒效果较好,污染率为10.00%,成活率为82.33%;丛生芽诱导的最适培养基配方为DCR＋6-BA 0.2 mg·L-1,诱导率较高,达66.67%;丛生芽增殖的最适培养基配方为DCR＋6-BA 0.2 mg·L-1＋IBA 0.05 mg·L-1,增殖倍数达到11.00;适宜的生根培养基为DCR＋NAA 0.01 mg·L-1＋IBA 0.2 mg·L-1,生根率为90.00%,平均生根数为4.09。     

大薯类原球茎的离体诱导及再生体系的建立

采用正交试验设计方法,以大薯带节茎段为外植体,离体诱导类原球茎并建立大薯类原球茎的再生体系,以解决愈伤组织分化成苗和试管苗移栽成活率低的难题。结果表明：以带节茎段为外植体诱导类原球茎的最适培养基为MS（含3×Ca2＋）＋1.0 mg·L-1 6-BA＋0.2 mg·L-1 NAA＋0.1%PVP＋3%蔗糖,诱导率高达93.33%;类原球茎增殖的最适培养基为MS＋4mg·L-1 6-BA＋80 mg·L-1 Ad＋0.1%PVP＋3%蔗糖;类原球茎生根的最适培养基：1/2MS＋0.10 mg·L-1 NAA＋0.1%PVP＋3%蔗糖。将诱导得到的生根类原球茎植株进行炼苗,移栽基质珍珠岩：蛭石=2：1,移栽成活率可达到95%。     

阳桃胚乳愈伤组织诱导和不定芽发生的研究

首次成功建立阳桃胚乳组织培养并获得胚乳再生植株。胚乳愈伤组织诱导以培养基MS 2,4-D2．0mgL^-1 BA0．2mgL^-1的效果最好,诱导频率可达94．7％,愈伤组织乳白色,结构致密,生长旺盛;将其接种在培养基MS ZT3．0mgL^-1 NAA0．2mgL^-1上,愈伤组织由乳白色致密型转变为淡绿色致密型,进而形成绿色芽点,分化出不定芽,分化频率可达73．3％;胚乳植株在培养基MS ZT2．0-2．5mgL^-1 NAA0．05mgL^-1上进行壮苗和营养繁殖。     

芨芨草愈伤组织器官发生及植株再生

芨芨草(Achnatherum splendens (Trin.) Nevski)种子消毒并在MS培养基上萌发获得无菌苗, 以幼苗的叶鞘和胚轴为外植体诱导愈伤组织, 经继代后进一步诱导不定芽及生根。研究结果表明, 诱导愈伤组织最适合的培养基为B5+1.5 mg.L-12,4-D+0.5 mg.L-1 NAA; 诱导芽分化较适合的培养基为B5+0.5 mg.L-1 6-BA +0.2 mg.L-1 NAA; 1/4 B5+1.0 mg.L-1 NAA+0.2 mg.L-1 IBA +1.0 g.L-1活性炭培养基则有利于芨芨草试管苗的生根。本实验建立了完整的芨芨草植株再生体系, 移栽成活率高。     

轮叶党参的组织培养及植株再生研究

以轮叶党参为材料,研究了不同外植体、激素组合、培养基及光照条件对愈伤组织诱导及植株再生的影响.结果表明,叶片是轮叶党参组织培养较为合适的外植体.外植体在添加0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.5 mg·L~(-1) KT的MS培养基上愈伤组织诱导率最高可达100%;愈伤组织转移到附加0.75 mg·L~(-1) 6-BA+0.5 mg·L~(-1) NAA的MS培养基进行继代培养,增殖后的愈伤组织转移到附加0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.2 mg·L~(-1) NAA的1/2MS分化培养基进行分化,其分化率达89.4%;将分化出的芽转接到附加0.2 mg·L~(-1) IAA+0.2 mg·L~(-1) NAA的1/2MS培养基,生根率达92.5%.暗培养诱导出愈伤组织后转到16 h·d~(-1)光照条件下,愈伤组织增殖倍数和分化率显著提高,再生苗健壮,长势强.     

短距槽舌兰的驯化栽培与快速繁殖

为促进短距槽舌兰的资源驯化栽培, 本文对其生物学特性、生长发育规律和组织培养快速繁殖技术进行了研究。对开花植株进行人工授粉, 取种子进行观察发现, 授粉后140 d 种子才达到成熟状态; 将其接种在无植物生长调节剂的RE培养基上, 萌发率可达90%以上。将萌发的种子转接在RE＋0.2 mg·L-1 NAA＋0.2 mg·L-1 6-BA＋5 g·L-1椰粉＋2 g·L-1水解酪蛋白的培养基上可诱导原球茎大量增殖。最适壮苗生根培养基为RE＋0.6 mg·L-1 NAA＋0.2 mg·L-1 6-BA＋80 g·L-1香蕉泥, 生根率100%。试管苗移栽到直径0.3-1.7 cm的小号细树皮盆栽中, 成活率在95%以上, 试管苗栽培6个月后可分化花芽, 这为短距槽舌兰的产业化生产奠定了基础。