水杨酸在紫杉醇生物合成中诱导作用的研究

研究了水杨酸对红豆杉细胞培养中紫杉烷合成的影响。在适宜浓度的水杨酸诱导下,紫杉醇(Taxol)的产量提高了近3倍,同时10去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-DAB)与巴卡亭Ⅲ(Baccatin Ⅲ)相应上升。通过对紫杉醇合成代谢途径的动力学分析,初步推断水杨酸的加入提高了10-DAB合成速率。并通过水杨酸和硝酸银的配伍诱导,实现了诱导子之间的协同作用,获得了39 mg/L的紫杉醇含量,比两个诱导子单独作用时的最高含量之和还高出50%。     

云南红豆杉中紫杉烷类二萜成分化合物的遗传毒性研究

目的:研究云南红豆杉中四种紫杉烷类二萜成分化合物(2-去乙酰氧基紫杉宁E、7-去乙酰氧基紫杉宁J、2-去乙酰氧基去肉桂酰基紫杉宁、巴宁亭酸)的安全性。方法:采用Alarmblue检测采用四种紫杉烷类二萜成分化合物在CHL细胞上的细胞毒性,采用CHL细胞染色体畸变实验和Ames试验,观察云南红豆杉中四种紫杉烷类二萜成分化合物遗传毒性作用。结果:四种紫杉烷类二萜成分化合物在CHL细胞株上IC500.5 mg/m L;未对鼠伤寒沙门氏杆菌组氨酸缺陷型菌株回复突变数产生影响;未使得CHL染色体畸变率增加。结论:在本实验条件下,未观察到2-去乙酰氧基紫杉宁E、7-去乙酰氧基紫杉宁J、2-去乙酰氧基去肉桂酰基紫杉宁、巴宁亭酸对CHL细胞有明显的细胞毒性以及未观察到体外遗传毒性。     

南方红豆杉紫杉烷13α-羟化酶基因的克隆及序列分析

目的:紫杉烷13α-羟化酶是紫杉醇下游合成途径关键酶之一,负责催化紫杉二烯-5α-醇的C13侧链发生羟基化反应生成紫杉二烯-5α、13α-二醇.该研究从南方红豆杉中克隆出紫杉烷13α-羟化酶基因并对其序列进行生物信息学分析.方法:利用南方红豆杉的总DNA和总RNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术克隆出紫杉烷13α-羟化酶基因的DNA序列和cDNA序列,利用swiss-prot、DNAMAN等生物信息学工具对其核酸序列和蛋白序列进行分析.结果:测序结果显示其cDNA序列长度为1 651bp,含有一个1 458bp的开放阅读框,同源性比较分析结果表明,其氨基酸序列与已经报道的蔓地亚红豆杉的紫杉烷13α-羟化酶氨基酸序列的一致性为96%.结论:成功克隆出南方红豆杉紫杉烷13α-羟化酶基因,为利用合成生物学工程技术生产紫杉醇或其前体物质提供了分子基础.     

紫杉烷类化合物研究进展

综述了近年来紫杉烷类在植物化学和药物化学方面的研究进展。着重介绍新的紫杉烷类天然化学成分的分离及其半合成衍生物。     

美洲大蠊肠道产7-木糖紫杉烷糖基水解酶菌株的筛选及鉴定

旨在筛选美洲大蠊肠道具有产7-木糖紫杉烷糖基水解酶性能的内生菌,并对其进行生物学鉴定.以实验室保存的178株美洲大蠊肠道内生菌为研究对象,采用刚果红透明圈法和荧光显色法筛选产木聚糖酶菌株,进一步利用薄层色谱法筛选产7-木糖紫杉烷糖基水解酶菌株.在此基础上,选取一株高产7-木糖紫杉烷糖基水解酶菌株进行形态学、生理生化和分...     

从南方红豆杉中筛选和鉴定25株产紫杉烷的内生真菌

为从南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)中分离产紫杉烷的内生真菌,从其幼茎、树皮和叶片中分离纯化了491株内生真菌,经筛选获得25株内生真菌具有产紫杉烷的能力,其中,4株可产紫杉醇、巴卡亭Ⅲ和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ,8株能产紫杉醇和巴卡亭Ⅲ,1株能产紫杉醇和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ,1株能产巴卡亭Ⅲ和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ,6株仅产紫杉醇,5株仅产巴卡亭Ⅲ。根据内生真菌的来源,幼茎中有11株产紫杉烷的内生真菌,叶片中有9株,而树皮中仅有5株。这些菌株的紫杉醇、巴卡亭和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ产量分别为0.64~9.87、0.48~3.42和0.20~1.00μg L~(–1)。因此,南方红豆杉中具有紫杉烷类代谢途径的内生真菌来源广,数量多,是研究真菌中紫杉烷类化合物代谢途径的良好材料,也为紫杉烷类抗癌药生产提供了潜在的真菌种源。     

紫杉醇生物合成相关酶基因的克隆与表达

以牛儿基牛儿基二磷酸为前体的紫杉醇生物合成大约有20步酶促反应,其反应过程已基本阐明,近一半的相关酶基因已得到克隆与表达。综述了编码参与紫杉醇生物合成的紫杉二烯合酶、紫杉二烯5α羟化酶、紫杉烷10β羟化酶、紫杉烷13α羟化酶、紫杉二烯5α醇O乙酰基转移酶、紫杉烷2α苯甲酰转移酶、去乙酰基巴卡亭Ⅲ10βO乙酰转移酶、3氨基3苯基丙酰转移酶和3N去苯甲酰2脱氧紫杉醇苯甲酰转移酶等9个酶基因的克隆和表达方面的研究情况,并指出随着紫杉醇生物合成的分子生物学研究的不断深入,利用分子生物技术大规模生产紫杉醇将为期不远 。     

外显子拼接法克隆紫杉烷2α-羟基化酶基因与生物信息学分析

紫杉烷2α-羟基化酶是形成紫杉醇核心骨架的羟基化反应关键酶之一,以taxusin作为底物进行氧化生成2α,7β-dihydroxytaxusin.利用蔓地亚红豆杉的总DNA为模板,采用PCR技术克隆出紫杉烷2α-羟基化酶的DNA序列,利用在线比对和生物学软件分析其内含子,采用外显子拼接法克隆出紫杉烷2α-羟基化酶基因的cDNA序列.测序结果表明该基因含有1个1 488 bp的开放阅读框,编码495个氨基酸的多肽;同源性比较分析结果表明,其碱基序列及氨基酸序列与已经报道的加拿大红豆杉的紫杉烷2α-羟基化酶基因的一致性为分别为98%和89%.利用SWISS-PROT、DNAMAN等生物信息学工具对其列进行了序列分析,为利用代谢工程的方法生产紫杉醇或其前体物质提供了分子基础.     

马特链霉菌7-木糖紫杉烷糖基水解酶初步研究

酶法转化7-木糖紫杉烷(7-XDT)为10-脱乙酰基紫杉醇(10-DAT)是目前合成紫杉醇的最主要途径.本研究分离到一株具有产生7-木糖紫杉烷(7-XDT)糖基水解酶能力的马特链霉菌(Streptomyces matensi YUCM 410051),通过酶的最适反应温度、硫酸铵分级沉淀、最适反应pH和酶的有机试剂耐受等研究,发现最适反应温度为25～30℃,硫酸铵分级沉淀酶活在20％～70％的盐浓度时活性最高;粗酶液最适反应pH在6.0～7.5,酶的甲醇耐受浓度和DMSO耐受浓度均为10％.深入研究该酶对开发具有水解7-木糖紫杉烷(7-XDT)中木糖基的酶资源和提高红豆杉中的紫杉烷类化合物的利用率具有重要价值.     

中国红豆杉愈伤组织紫杉烯合成酶cDNA片段的分离(简报)

从红豆杉的组织培养物中,筛选得到紫杉烷类化合物的高产株系,构建该株系的cDNA库,利用紫杉烯合成酶的特异性PCR引物对构建的cD－NA库进行PCR扩增,将得到的片段克隆后测序,该82bp片段与太平洋红豆杉紫杉烯合成酶相同片段完全一致。     

水杨酸对人工膜脂质过氧化的抑制作用

本文研究了水杨酸对人工膜脂质过氧化的抑制效应.实验结果表明,水杨酸能抑制磷脂酰胆碱脂质体的过氧化,减少丙二醛的形成,自旋捕集实验表明,水杨酸能(火卒)灭氢氧自由基和超氧阴离子自由基.质谱分析对水杨酸与氢氧自由基的反应产物进行了鉴定,证明产物为二羟基发甲酸.对水杨酸(火卒)灭氢氧自由基的机理进行了讨论.     

水杨酸对芒果炭疽病的诱导抗性作用

大田试验结果表明,水杨酸叶面喷雾可减轻芒果炭疽病的发生,100—200mgL-1均有极显著的效果,病情指数分别比对照下降了23％－41．1％,以浓度为100mgL-1的效果最好,而在马铃薯培养基（PDA）中平板培养时,100mgL-1水杨酸对芒果炭疽菌菌丝生长和孢子萌发均无抑制作用．因此认为,水杨酸处理芒果后感病指数下降,是由于水杨酸处理提高了芒果幼果的抗病性,即幼果产生了诱导抗性而引起的．     

水杨酸和阿斯匹林对小麦幼苗生长过程中盐害的缓解作用

以小麦为材料,研究盐分胁迫对小麦幼苗生长的影响以及水杨酸和阿斯匹林对小麦幼苗生长过程中盐害的缓解作用。结果表明,水杨酸和阿斯匹林能够相对提高盐分胁迫条件下小麦幼苗叶片的相对含水量,降低叶片质膜透性和盐害对细胞膜的伤害,提高幼苗体内超氧化物歧化酶、过氧化物酶等细胞保护酶的活性,抑制过氧化作用产物丙二醛的积累;同时发现外源水杨酸和阿斯匹林还能够提高幼苗体内ＡＴＰ的含量,维持幼苗能量代谢和供应的正常进行,从而提高小麦对盐分胁迫的适应性     

水杨酸在植物抗病中的作用

水杨酸是一种重要的能激活植物抗病防卫反应的内源信号分子。本文首先介绍了水杨酸的基本性质及水杨酸在植物抗病中的作用,然后从水杨酸与水杨酸结合蛋白的相互作用以及水杨酸介导的信号传导途径与非水杨酸介导的信号途径等方面初步探讨了水杨酸诱导植物抗病性的作用机制,最后总结了研究水杨酸作用机制对植物抗性生理和抗性分子生物学发展的意义。     

水杨酸在植物抗病中的作用

水杨酸是一种重要的能激活植物抗病防卫反应的内源信号分子,本文首先介绍了水杨酸的基本性质及水杨酸在植物抗病中的作用,然后从水杨酸与水杨酸结合蛋白的相互作用以及水杨酸介导的信号传导途径与非水杨酸介导的信号途径等方面初步探讨了水杨酸诱导植物抗病性的作用机制,最后总结了研究水杨酸作用机制对植物抗性生理和抗性分子生物学发展的意义。     

苜蓿叶片水杨酸含量与其蓟马抗性的关系

采用不同抗蓟马特性的苜蓿品系,于不同蓟马虫口密度下测定苜蓿水杨酸含量和虫害程度,以明确苜蓿叶片水杨酸含量与其抗蓟马特性的关系.结果表明,苜蓿叶片游离态、结合态水杨酸含量均与苜蓿抗蓟马特性密切相关;高抗品系(抗蓟马品系)的水杨酸初始含量(0.539 mg·g-1)高于低抗品系(0.403 mg·g-1);与较低抗品系相比,高抗品系受害器官(叶)水杨酸含量随虫口密度和危害点面积的增大而增加相对缓慢,而随危害指数的增大而增加较快(3.84倍).可见,水杨酸主要是间接增强苜蓿对蓟马的抗性;高抗蓟马苜蓿品系能通过快速获得较高水杨酸含量来阻碍被危害伤口的扩大,降低其受危害程度,促使自身产量和品质提高.     

The Root Hair Assay Facilitates the Use of Genetic and Pharmacological Tools in Order to Dissect Multiple Signalling Pathways That Lead to Programmed Cell Death

The activation of programmed cell death (PCD) is often a result of complex signalling pathways whose relationship and intersection are not well understood. We recently described a PCD root hair assay and proposed that it could be used to rapidly screen genetic or pharmacological modulators of PCD. To further assess the applicability of the root hair assay for studying multiple signalling pathways leading to PCD activation we have investigated the crosstalk between salicylic acid, autophagy and apoptosis-like PCD (AL-PCD) in Arabidopsis thaliana. The root hair assay was used to determine rates of AL-PCD induced by a panel of cell death inducing treatments in wild type plants treated with chemical modulators of salicylic acid synthesis or autophagy, and in genetic lines defective in autophagy or salicylic acid signalling. The assay demonstrated that PCD induced by exogenous salicylic acid or fumonisin B1 displayed a requirement for salicylic acid signalling and was partially dependent on the salicylic acid signal transducer NPR1. Autophagy deficiency resulted in an increase in the rates of AL-PCD induced by salicylic acid and fumonisin B1, but not by gibberellic acid or abiotic stress. The phenylalanine ammonia lyase-dependent salicylic acid synthesis pathway contributed only to death induced by salicylic acid and fumonisin B1. 3-Methyladenine, which is commonly used as an inhibitor of autophagy, appeared to influence PCD induction in all treatments suggesting a possible secondary, non-autophagic, effect on a core component of the plant PCD pathway. The results suggest that salicylic acid signalling is negatively regulated by autophagy during salicylic acid and mycotoxin-induced AL-PCD. However, this crosstalk does not appear to be directly involved in PCD induced by gibberellic acid or abiotic stress. This study demonstrates that the root hair assay is an effective tool for relatively rapid investigation of complex signalling pathways leading to the activation of PCD.     

水杨酸诱导植物抗病性的新进展

水杨酸是一种重要的能激活一系列植物抗病防卫反应的内源信号分子.首先介绍了水杨酸在植物抗病性中的作用,并从水杨酸与过氧化氢及其代谢酶类相互作用的角度初步探讨了水杨酸诱导植物抗病性的分子机理,最后概述了目前这一领域中需要进一步研究的若干问题.     

Inverse correlation between jasmonic acid and salicylic acid during early wound response in rice

This study presents a kinetic analysis of the response to wounding in rice plants. In particular, jasmonic acid, salicylic acid, and lipoxygenase activity were measured in leaves of wounded rice plants during the early tillering phase. The results show that endogenous jasmonic acid transiently increases to a maximum 30 min after wounding (jasmonic acid burst) and lipoxygenase activity increases after the jasmonic acid burst, but not after the second smaller peak of endogenous jasmonic acid 23 h after wounding. In contrast, endogenous salicylic acid decreases during the jasmonic acid burst, such that the kinetic profiles of jasmonic acid and salicylic acid are inversely correlated during the early response to wounding. It is proposed here that the increase in endogenous jasmonic acid and the decrease in endogenous salicylic acid may contribute for establishing the efficient negative cross-talk between jasmonic acid and salicylic acid signaling pathways during the early response to wounding in rice.