伴海马硬化的颞叶癫痫患者海马组织内BDNF表达变化

目的：研究伴海马硬化的难治性颞叶癫痫（TLE）患者海马组织内脑源性神经营养因子（brain derivedneurotrophic factor,BDNF）的表达变化,探讨其在难治性颞叶癫痫发病机制中的作用。方法：采集5例伴海马硬化的难治性TLE患者手术中切除的海马组织,用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测BDNFmRNA表达,并与3例非海马硬化TLE患者对照。结果：与非海马硬化组比较,伴海马硬化的难治性TLE患者海马组织中的BDNFmRNA表达明显增加（P〈0．01）。结论：伴海马硬化的难治性TLE患者海马组织中BDNFmRNA表达表达增高,可能在海马硬化和难治性颞叶癫痫发生、发展中具有重要作用。     

GnRH—a对大鼠海马和皮质部位parvalbumin表达的影响

目的：研究促性腺激素释放激素类似物（gonadotropin releasing hormone analogue,GnRH-a）对大鼠海马、皮质部位小白蛋白（parvalbumin,PV）表达的影响。方法：采用酶联免疫吸附试验测定血清激素水平,免疫组织化学和图像分析观察大鼠海马、皮质部位PV的表达。结果：①GnRH-a组大鼠血清雌二醇（estradiol,E2）、LH及FSH水平较正常对照组下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;与OVX组比较LH、FSH较低,差异有统计学意义（P〈0.05）,但E2差异不显著。②正常情况下,大鼠海马、皮质部位可观察到PV神经元及纤维分布。③GnRH-a组PV细胞数及灰度值低于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,与去卵巢组大鼠组相似;GnRH-a＋E2联合用药后,PV细胞数及灰度值与正常对照组相似。结论：GnRH-a降低大鼠海马、皮质部位神经元中PV的表达,从而影响神经元的功能,这可能与其用药后神经精神副反应有一定关系。     

慢性颞叶癫痫大鼠行为、电图发作和核磁共振研究--海马-内嗅皮质-颞叶新皮质通路

目的和方法：强直电刺激（６０Ｈｚ,０．４￣０．６ｍＡ,２ｓ）左、右侧背侧海马或中部颞叶新皮质制作慢性大鼠癫痫模型,观察大鼠行为、ＥＥＧ、深部电图以及各脑区Ｔ２（质子横向驰豫时间）加权核磁共振成象（Ｔ２－ＭＲＩ）结构改变,研究海马－内嗅皮质－颞叶新皮质、大脑皮层神经通路在诱发颞叶癫痫中的可能作用。结果：右侧海马刺激组的原发性、继发性湿狗样抖动及癫痫“点燃”效应的发生率明显高于左海马和左、右颞叶新皮质     

MiR-30a-3p对人滋养肿瘤细胞系JEG-3细胞侵袭功能的影响

目的：MiRNAs对于胎盘的形成和正常妊娠的维持起着至关重要的作用,它在胎盘中的表达失衡的可能导致了妊娠相关疾病的发生,我们前期研究发现miR-30a-3p在子痫前期患者胎盘上特异性高表达,推测miR-30a-3p可能参与了子痫前期的发生发展过程,本课题通过观察miR-30a-3p对人滋养肿瘤细胞系JEG-3细胞侵袭能力的影响,深入探讨miR-30a-3p在子痫前期发病过程中的作用。方法：应用瞬时转染技术在人滋养肿瘤细胞系JEG-3细胞中分别转染miR-30a-3p mimics、mimics NC为miR-30a-3p过表达组和阴性对照组,空白转染组为空白对照组,利用荧光实时定量PCR技术检测各组细胞中miR-30a-3p的表达,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力的差别。结果：荧光实时定量PCR结果显示miR-30a-3p过表达组与阴性对照组、空白对照组相比miR-30a-3p的表达量明显升高,差异具有统计学意义（P〈0.05）;Transwell实验结果显示miR-30a-3p过表达组细胞的侵袭能力与阴性对照组、空白对照组相比均有降低,差异具有统计学意义（P〈0.05）。阴性对照组与空白对照组的侵袭能力差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：miR-30a-3p可以显著下调JEG-3细胞的侵袭力,miR-30a-3p有可能通过降低滋养细胞的浸润能力,导致滋养细胞对子宫肌层和螺旋动脉的浸润不足,造成＂胎盘浅着床＂,从而在子痫前期的发病过程中发挥了重要的作用,miR-30a-3p有望成为诊治子痫前期疾病的靶点。     

褪黑素对马桑内酯致痫大鼠海马及皮质内TNF—α水平的影响

目的观察褪黑素（melatonin,MT）对马桑内酯（coriaria lactone,CL）致痫大鼠海马及皮质内TNF-α水平的影响,探讨其抑制癫痫的作用机制。方法60]5健康雄性SD大鼠随机分为4组（每组15只）,分别为A组：生理盐水对照组（NS组）;B组：马桑内酯致痫组（CL组）;C组：褪黑素＋马桑内酯组（MT＋CL组）;D组：Luzidole＋褪黑素＋马桑内酯组（Luz＋MT＋CL组）。观察并记录火鼠行为学改变,用免疫组织化学方法检测大鼠海马及皮质内TNF-α含量的变化。用实时荧光定量PCR的方法检测大鼠海马内TNF—dmRNA含量的变化。结果行为学观察,NS组无痫样发作,CL组和Luz＋MT＋CL组痫样发作重（Ⅲ—Ⅴ级）,MT＋CL组无或仅有轻微发作（0-Ⅱ级）;免疫组织化学观察,与正常对照组比较,CL组和Luz＋MT＋CL组大鼠海马及皮质内TNF-α含量均明显增高（P〈0．05）;与CL组和Luz＋MT＋CL组比较,MT＋CL组TNF-α含量明显降低（P〈0．05）。实时荧光定量PCR结果显示,与正常对照组比较,CL组和Luz＋MT＋CL组大鼠海马TNF-αmRNA含量均明显增高（P〈0．05）;与CL组和Luz＋MT＋CL组比较,MT＋CL组大鼠海马TNFQmRNA含量明显降低（P〈0．05）;结论褪黑素能明显地抑制马桑内酯引起的致痫作用,其机制可能与影响海马及皮质内TNF-α水平有关。     

产前应激子代大鼠海马核转录因子-κB表达的性别差异

本研究采用免疫组织化学和Western blot检测NF-κB p65/p50在产前应激子代海马的表达,并探讨其表达是否存在性别差异。研究结果显示,在雌性子代,中、晚期应激组海马齿状回p65表达显著低于对照组（P〈0．01）,而海马各区p50表达均显著高于对照组（P〈0．01）,中、晚期应激组间p65和p50表达均有显著差异（P〈0．01）。在雄性子代,中、晚期应激组海马齿状回p65表达显著高于对照组（P〈0．01）,晚期应激组海马各区p50表达均显著低于对照组（P〈0．05,P〈0．01）,中、晚期应激组间p65和p50表达均有显著差异（P〈0．01）。雌、雄子代比较,对照组雌、雄p65表达差异极显著妒〈0．01）,p50仅在海马CA1区表达差异极显著（P〈0．01）;中期应激组雌、雄子代大鼠海马p65／p50表达无显著差异;晚期应激组雌、雄海马p65／p50表达均有极显著差异（P〈0．01）。Western blot与免疫组织化学结果基本一致。结果表明,产前不同时期的应激显著影响子代海马NF-κB p65和p50表达,且有性别差异,这可能是产前应激对子代雌、雄大鼠学习记忆能力影响差异的机制之一。     

姜黄素对自发性高血压大鼠脑缺血/再灌注后海马神经元损伤及RANTES表达的影响

目的：探讨姜黄素对自发性高血压大鼠（SHR）脑缺血/再灌注后认知功能及海马神经元损伤和调解活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子（RANTES）表达的影响。方法：雄性Wistar-Kyoto大鼠（WKY）和SHR,随机分为5组：假手术组（W-Sham、S-Sham）、缺血/再灌注组（W-I/R、S-I/R）和姜黄素组（S-Cur）,各组按再灌注时间分为3h、12 h、1 d、3 d、7 d 5个亚组（n=6）。采用四血管阻断法制备全脑缺血/再灌注模型,HE染色观察海马CA1区神经细胞形态,Nissl染色计数海马CA1区平均锥体细胞密度,ELISA法检测海马RANTES表达,于再灌注后7 d观察行为学。结果：与假手术组大鼠比较,缺血/再灌注组大鼠学习和记忆能力下降,海马CA1区神经元损伤加重,海马RANTES蛋白表达上调（P〈0.05）;与W-I/R大鼠比较,S-I/R大鼠学习和记忆能力下降,海马CA1区神经元损伤加重,海马RANTES蛋白表达上调（P〈0.05）;姜黄素组大鼠学习和记忆能力明显改善,海马CA1区神经元损伤减轻,海马RANTES蛋白表达下调（P〈0.05）。结论：缺血/再灌注更易导致SHR海马神经元损伤。姜黄素减轻SHR脑缺血/再灌注海马神经元损伤,其机制可能与抑制RANTES蛋白的表达有关。     

戊四氮点燃癫痫大鼠海马P75NTR及NF-κB的表达变化

目的探讨戊四氮点燃癫痫大鼠海马神经营养因子受体P75NTR及核转录因子NF-κB表达的变化,以探讨癫痫的发病机制。方法戊四氮腹腔注射诱导大鼠癫痫持续状态（SE）,观察大鼠行为学改变,分别选取1,6,24,72h四个时间点运用反转录多聚酶链反应（RT-PCR）方法检测SE大鼠和对照组海马P75NTR mRNA及NF-κB mRNA的表达。结果SE后6h,P75NTR和NF-κB表达开始增高,24h达高峰（P〈0.01）,72h略有下降,但仍高于对照组水平（P〈0.05）。各组间两两比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论癫痫SE时,P75NTR高表达同时伴NF-κB活性增强,二者变化具有相关性,可能为SE致痫的共同途径。     

miR-134-5p靶向抑制PAK3表达增强多发性骨髓瘤细胞的化疗敏感性的研究

摘要 目的：研究miR-134-5p对多发性骨髓瘤（multiple myeloma, MM）化疗敏感性的影响及其可能的作用机制。方法：CCK-8法测定人多发性骨髓瘤细胞KM3及其耐硼替佐米（bortezomib, BTZ）细胞株KM3/BTZ对BTZ的化疗敏感性,RT-PCR法检测KM3和KM3/BTZ细胞株中miR-134-5p和p21活化激酶3（p21 activated kinase 3, PAK3）mRNA的表达,生物信息学软件分析miR-134-5p的靶基因,荧光素酶报告实验进行验证,CCK-8法检测分别抑制miR-134-5p和PAK3后KM3/BTZ的化疗敏感性,Western-blot法检测抑制miR-134-5p后KM3/BTZ细胞株中PAK3蛋白的表达。结果：KM3/BTZ细胞株对BTZ的化疗敏感性显著低于KM3细胞株（P＜0.05）。MiR-134-5p在KM3细胞株的表达显著高于KM3/BTZ细胞株,而PAK3 mRNA在KM3细胞株的表达显著低于KM3/BTZ细胞株（P＜0.05）。PAK3为miR-134-5p的靶基因。MiR-134-5p inhibitor组和PAK3 siRNA组KM3/BTZ细胞株的化疗敏感性显著低于对照组（P＜0.05）。MiR-134-5p inhibitor组PAK3蛋白的相对表达显著高于对照组（P＜0.05）。结论：MiR-134-5p可提高KM3/BTZ细胞株的化疗敏感性,其机制可能与抑制PAK3的表达有关。     

鼻咽癌组织miR-20b-5p、miR-325-3p表达水平与放疗敏感性和预后的关系研究

摘要 目的：探讨鼻咽癌组织微小核糖核酸（miR）-20b-5p、miR-325-3p表达水平与放射治疗敏感性和预后的关系。方法：选取2017年11月至2019年6月我院收治的84例确诊为鼻咽癌并拟进行放射治疗的患者设为鼻咽癌组,另选取同期收治的42例慢性鼻咽炎患者为对照组,比较鼻咽癌组织及鼻咽部炎症组织中miR-20b-5p、miR-325-3p表达水平,分析鼻咽癌组织中miR-20b-5p、miR-325-3p表达水平与鼻咽癌患者临床病理特征的关系。根据鼻咽癌患者放疗敏感性评估结果分为敏感组和抵抗组,比较两组miR-20b-5p、miR-325-3p表达水平。随访3年,Kaplan-Meier法及Cox回归分析法分析miR-20b-5p、miR-325-3p表达水平与鼻咽癌患者生存预后的关系。结果：鼻咽癌组miR-20b-5p、miR-325-3p表达水平均高于对照组（P＜0.05）。不同T分期、N分期、临床分期患者在miR-20b-5p、miR-325-3p高表达组与低表达组中的占比比较存在统计学差异（P＜0.05）。完成7~8周放疗后3个月评估患者放疗抵抗率36.90%,抵抗组miR-20b-5p、miR-325-3p表达水平均高于敏感组（P＜0.05）。miR-20b-5p高表达鼻咽癌患者的累积生存时间短于miR-20b-5p低表达患者（P＜0.05）;miR-325-3p高表达鼻咽癌患者的累积生存时间短于miR-325-3p低表达患者（P＜0.05）。单因素、多因素Cox回归分析显示,年龄＞60岁、T3/T4期、miR-20b-5p高表达、miR-325-3p高表达是鼻咽癌患者预后不良的独立危险因素（P＜0.05）。结论：鼻咽癌组织中miR-20b-5p、miR-325-3p均异常高表达,其表达水平与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、临床分期及放疗敏感性有关,且miR-20b-5p、miR-325-3p高表达患者放疗后预后不良风险更大。     

低剂量伽玛刀照射癫痫大鼠颞叶神经元超微结构的改变及线粒体形态计量分析

目的观察低剂量伽玛刀照射癫痫大鼠颞叶神经元超微结构的变化,探讨线粒体形态改变程度及性质。方法建立大鼠青霉素局灶性癫痫动物模型,将48只SD大鼠分为对照组（A组）、实验组（癫痫模型组,简称B组）和癫痫后伽玛刀照射组（C组）。照射周边剂量12Gy,等剂量曲线为50％。分别于0．5h～60d后取靶区颞叶皮质区制备电镜样本,透射电镜观察,通过计算机图像分析系统对线粒体形态计量分析。结果A组细胞结构基本正常;B组可见神经元细胞质细胞器明显减少空化,线粒体体密度、数密度、比表面和嵴膜密度较对照组明显减少（P〈0．05）,线粒体平均体积和平均截面积较对照组明显增大（P〈0．05）。C组早期与B组基本一致,细胞质内有少量脂褐素,中期和晚期线粒体的各项参数与A组相差不显著,低剂量伽玛刀照射后早期线粒体的平均体积、平均截面积数密度、比表面与A组相差显著（P〈0．05）,圆球度各组间无明显差异。结论大鼠癫痫发作后其线粒体的形态结构发生明显变化,低剂量伽玛刀照射对神经元的修复有重要作用,本研究认为线粒体参与了癫痫的病理过程。     

阿司匹林对癫痫大鼠海马苔藓纤维芽生的影响

目的：探讨阿司匹林对癫痫大鼠海马齿状回苔藓纤维芽生的影响。方法：应用氯化锂-匹罗卡品诱导癫痫大鼠模型,将大鼠随机分为正常对照组、模型组和阿司匹林（20mg/kg,i.p.1/d）干预组（造模终止后干预组以开始干预时间点的不同分为0h,3h和24 h三组）。20天后,通过Timm染色观察不同时间点阿司匹林干预后癫痫大鼠海马齿状回苔藓纤维芽生的情况。结果：与正常对照组相比,癫痫大鼠海马齿状回有明显的苔藓纤维芽生（P〈0.05）。阿司匹林0h干预组海马齿状回苔藓纤维芽生减少不明显（P〉0.05）,3h干预组和24h干预组海马齿状回苔藓纤维芽生明显的减少（P〈0.05）;3 h干预组和24 h干预组相比海马齿状回苔藓纤维芽生无明显的差异（P〉0.05）。结论：合适的时间窗给予阿司匹林能够明显减少苔藓纤维芽生。这对癫痫的临床治疗有一定的指导意义。     

miR-134在人垂体腺瘤组织中的表达及其意义(英文)

目的:探讨垂体腺瘤患者miR-134的表达及意义,分析其表达水平与无功能垂体腺瘤(non-functioningpituitaryadenomas,NFPA)增殖侵袭能力的相关性。方法:选择2010年6月至2013年7月本院收集垂体腺瘤标本104例以及8例尸检正常腺垂体的临床资料。采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学技术检测Ki-67、MEG3、miR-134等在NFPA组织中的表达水平,并分析数据。结果:miR-134在NFPA组织中表达水平显著低于正常腺垂体和其他类型垂体腺瘤(P0.01);miR-134的表达水平与NFPA患者肿瘤侵袭性、肿瘤细胞Ki-67阳性率及发病年龄呈负相关(P0.01)。结论:miR-134表达下调可能是NFPA肿瘤发生及肿瘤呈侵袭样生长的重要因素,miR-134可作为诊断和评估NFPA预后的参考指标。     

癫痫大鼠海马NMDA受体亚基NR2A和BDNFmRNA水平的检测

目的通过锂一匹罗卡品癫痫模型（ithium—pilocarpine seizures rats model of epilepsy,LPS）,研究NMDA受体亚基NR2A、BDNF mRNA的表达,探讨NR2A、BDNF在LPS中的作用。方法建立氯化锂-匹罗卡品大鼠模型,运用原位杂交技术检测致痫后各组不同时间点海马CAI、CA3及DG区NR2A与BDNF mRNA的表达。结果LPS海马NR2A、BDNF mRNA在各观察时间点及部位模型组与正常对照组比较均有明显上调,且有显著统计学差异（P〈0．05）。模型组NR2A mRNA的表达上调7d达峰值（P〈0．05）;而BDNF mRNA表达上调14d达峰值。VPA干预组NR2A mRNA在大鼠海马不同时间及部位（除1d的CA3区）的表达较模型组明显下调（P〈0．05）;BDNF mRNA在大鼠海马不同时间及部位（除28d的DG区）的表达较模型组明显下调（P〈0．05）。结论锂－匹罗卡品腹腔注射可诱导大鼠海马NR2A和BDNF mRNA的表达明显上调;NR2A mRNA表达的增强可能是诱导调控BDNF mRNA表达增强的重要机制之一,说明NMDA受体亚基NR2A可能成为抑制癫痫发作的新靶点。     

锂-匹罗卡品颞叶癫模型的建立及苔藓纤维出芽的动态变化

目的研究锂-匹罗卡品颞叶癫模型大鼠致后性发作的行为学特点及海马结构病理改变的动态变化。方法将所有Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,实验组大鼠腹腔依次注射氯化锂、匹罗卡品诱发癫持续状态（SE）后,观察其自发性癫发作（SRS）,分别于SE后1周至10周5个不同时间点取材,Nissl染色和Timm染色分别观察海马神经元损伤及苔藓纤维出芽（MFS）的变化。结果注射匹罗卡品后84%的大鼠可诱发出SE,经过10～20d的缄默期后,可观察到Ⅰ～Ⅲ级的反复SRS,病理学检查可见海马神经元的损伤及齿状回内分子层MFS。结论锂-匹罗卡品颞叶癫模型与人类颞叶癫有类似发作特点及病理改变,是一种理想的颞叶癫动物模型。     

Increased Expression of Rac1 in Epilepsy Patients and Animal Models

The mechanisms of epilepsy remain incompletely understood. Rac1 (ras-related C3 botulinum toxin substrate 1) belongs to the Rho family of small GTPases. Rac1 play important roles in cytoskeleton rearrangement and neuronal synaptic plasticity, which had also been implicated in epilepsy. However, little is known regarding the expression of Rac1 in the epileptic brain or whether Rac1-targeted interventions affect the progression of epilepsy. The aim of this study was to investigate the expression profile of Rac1 in brain tissues from patients suffering from temporal lobe epilepsy (TLE) and experimental epileptic rats and determine the possible role of Rac1 in epilepsy. We demonstrated that the expression of Rac1 is significantly increased in TLE patients and in lithium-pilocarpine epilepsy model animals compared to the corresponding controls. Rac1 inhibitor NSC23766 reduced the severity of status epilepticus during the acute stage in a lithium-pilocarpine animal model. Consistent with these results, the latent period of a PTZ kindling animal model also increased. Our results demonstrated that the increased expression of Rac1 may contribute to pathophysiology of epilepsy.

     

CREB和CXCR2在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的：探讨c AMP反应原件结合蛋白（cyclic AMP response element-binding protein,CREB）和CXC趋化因子受体2（CXC chemokine receptor 2,CXCR2）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组织中的表达及与肺癌发生、发展的关系。方法：采用免疫组化Elivision法检测CREB和CXCR2在49例NSCLC组织中的表达,同时随机选取20例癌旁正常肺组织作为对照。结果：NSCLC中CREB和CXCR2的表达阳性率分别为57.1%和69.4%,均显著高于癌旁正常组织中的10.0%和15.0%（P〈0.05）;同时,CREB和CXCR2在NSCLC组织中的表达不仅与肿瘤的TNM分期有关（P〈0.05）,而且还与肿瘤的分化程度有关（P〈0.05）;另外,CREB在吸烟患者中的表达明显高于非吸烟患者（P〈0.05）,在鳞癌组织中的表达明显高于腺癌（P〈0.05）;CREB和CXCR2的表达呈正相关。结论：CREB和CXCR2可能参与了NSCLC的发生和发展,为NSCLC的靶向治疗提供了新的依据。     

微小RNAmiR-21和miR-31在13腔鳞癌组织中的表达及意义

目的：检测口腔鳞癌中微小RNA miR-21和miR-31的表达,探讨其与肿瘤发展的关系。方法：应用实时荧光定量PCR的方法检测72例口腔鳞癌,38例正常口腔粘膜miR-21和miR-31的表达,统计学分析其表达与肿瘤临床分期和病理分型的关系。结果：①口腔鳞癌组织与对照组比较,微小RNA miR-21和miR-31的表达都有显著增高（P〈0.05）,其中miR-21的增高更为显著（P〈0.001）。②统计学分析表明,miR-21的表达在晚期鳞癌组织较早中期鳞癌组织增高更为显著（P〈0.01）,在低分化鳞癌组织较中、高分化鳞癌组织增高更为显著（p〈0.001）;MiR-31的表达水平在不同肿瘤临床分期和病理分型鳞癌组织中无明显差异（P〉0.05）。结论：miR-21和miR-31在口腔鳞癌发生发展过程中表达有明显增高,其中miR-21表达水平可作为潜在的口腔鳞癌临床分期分级和预后的指标。