| 用siRNA沉默人血红素加氧酶-1基因降低胆红素水平 |
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| 引用本文： | 李春娥,金由辛,史毅,须丽清,钟文伟,申庆祥,李云珠,俞善昌,夏振炜. 用siRNA沉默人血红素加氧酶-1基因降低胆红素水平[J]. 细胞生物学杂志, 2007, 29(2): 282-290 |
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| 作者姓名： | 李春娥 金由辛 史毅 须丽清 钟文伟 申庆祥 李云珠 俞善昌 夏振炜 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院附属瑞金医院儿科 上海200025(李春娥，须丽清，钟文伟，李云珠，俞善昌，夏振炜)，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室 上海200031(金由辛，史毅)，上海市计划生育研究所 上海200032(申庆祥) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;上海市科委资助项目;上海市教委资助项目 |
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| 摘 要： | 拟通过RNA干扰技术特异下调人血红素加氧酶-1(human heme oxygenase-1,hHO-1)基因的表达,减少hHO-1的产量从而降低胆红素的产生,探讨在胆红素产生前就阻断其产生,为临床早期防治新生儿高胆红素血症及胆红素中毒性脑病探索一种新的有效手段。针对hHO-1基因设计并化学合成三对小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)。采用脂质体转染法将siRNA转染入人肝脏细胞株HL-7702;荧光显微镜检测siRNA转染细胞的效率;转染siRNA1~2天后经RT-PCR和Western印迹方法检测hHO-1表达水平和蛋白质量;并采用HO-1诱导剂血红素诱导或hHO-1表达质粒转染细胞以上调hHO-1表达,检测siRNA干扰后hHO-1产量和酶活性。结果显示:设计的三对siRNA能不同程度的特异下调hHO-1表达,筛选获得抑制效果最佳的siRNA-3。siRNA-3抑制hHO-1呈现浓度与时间依赖性。与非特异对照siRNA及未处理组比较,血红素诱导和hHO-1表达质粒转染均能上调HL-7702细胞内hHO-1表达,提高hHO-1产量,但转染siRNA-3后hHO-1表达明显抑制,同时hHO-1活性随着基因表达下调而下降。实验表明设计合成的siRNA-3抑制效果明显。siRNA-3通过降解hHO-1,减少hHO-1产量,降低酶活性,最终减少胆红素产生,从而使RNA干扰技术成为降低新生儿高胆红素血症和胆红素中毒性脑病发生的一种候选方法。
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| 关 键 词： | 血红素加氧酶 RNA干扰 酶活力 胆红素 高胆红素血症 |
| 修稿时间： | 2006-07-27 |
Heme Oxygenase-1 Gene Silenced with siRNA to Reduce the Level of Bilirubin |
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| Chun-E Li,You-Xing Jing,Yi Shi,LI-Qing Xu,Wen-Wei Zhong,Qing-Xiang Shen,Yun-Zhu Li,Shan-Chang Yu,Zhen-Wei Xia. Heme Oxygenase-1 Gene Silenced with siRNA to Reduce the Level of Bilirubin[J]. Chinese Journal of Cell Biology, 2007, 29(2): 282-290 |
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| Authors: | Chun-E Li You-Xing Jing Yi Shi LI-Qing Xu Wen-Wei Zhong Qing-Xiang Shen Yun-Zhu Li Shan-Chang Yu Zhen-Wei Xia |
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| Affiliation: | Department of Pediatrics, Ruijin Hospital, Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200025, China; 1.State Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China; 2.Shanghai Institute of Planned Parenthood Research, Shanghai 200032, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | heme oxygenase RNA interference activity bilirubin hyperbilirubinemia |
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