| 中国野生葡萄叶绿体分离及叶绿体DNA提取的研究 |
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| 引用本文： | 谢海坤,焦 健,樊秀彩,张 颖,姜建福,孙海生,刘崇怀. 中国野生葡萄叶绿体分离及叶绿体DNA提取的研究[J]. 西北植物学报, 2016, 36(7): 1464-1469 |
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| 作者姓名： | 谢海坤 焦 健 樊秀彩 张 颖 姜建福 孙海生 刘崇怀 |
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| 作者单位： | （中国农业科学院郑州果树研究所，郑州450009） |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系建设专项资金（CARS 30 yz 1）； |
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| 摘 要： | 以中国野生刺葡萄、山葡萄、桑叶葡萄和东南葡萄的成熟叶片为材料,比较柱式植物叶绿体DNAout试剂盒和改良的高盐-低pH法分离叶绿体及提取cpDNA效果。结果显示:(1)2种方法均分离得到了中国野生葡萄的叶绿体,但与柱式植物叶绿体DNAout试剂盒相比,改良的高盐-低pH法得到的叶绿体浓度高、杂质少,更适合中国野生葡萄叶绿体分离。(2)柱式植物叶绿体DNAout试剂盒提取的cpDNA,其OD260/OD280在1.28~1.36之间,质量浓度为4.2~7.8ng·μL~(-1),质量低,不能满足后续测序要求;而改良的高盐-低pH法提取的cpDNA,其OD260/OD280值在1.84~1.90之间,质量浓度为2 514.4~4 133.7ng·μL~(-1),质量高,纯度好,能满足后续测序要求。研究表明,改良的高盐-低pH法能简便、快速获得中国野生葡萄完整叶绿体及高质量cpDNA,并且提取的cpDNA可满足后续测序要求,为葡萄属植物叶绿体基因组的深入研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 中国野生葡萄；叶绿体分离；cpDNA提取；柱式植物叶绿体DNAout；改良的高盐 低pH法 |
An Optimized Chloroplast Isolation and Chloroplast DNA Extraction Protocol for Chinese Wild Grapes |
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| XIE Haikun,JIAO Jian,FAN Xiucai,ZHANG Ying,JIANG Jianfu,SUN Haisheng,LIU Chonghuai. An Optimized Chloroplast Isolation and Chloroplast DNA Extraction Protocol for Chinese Wild Grapes[J]. Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica, 2016, 36(7): 1464-1469 |
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| Authors: | XIE Haikun JIAO Jian FAN Xiucai ZHANG Ying JIANG Jianfu SUN Haisheng LIU Chonghuai |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chinese wild grapes chloroplast isolation cpDNA extraction column plant chloroplast DNAout modified high salt low pH method |
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