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丹参多酚氧化酶基因的克隆及表达分析
引用本文:时王珂,孙奕玥,舒志明,张跃进,梁宗锁,郭宏波.丹参多酚氧化酶基因的克隆及表达分析[J].西北植物学报,2016,36(9):1735-1742.
作者姓名:时王珂  孙奕玥  舒志明  张跃进  梁宗锁  郭宏波
作者单位:(旱区作物逆境生物学国家重点实验室,中药指纹图谱与天然产物国家地方联合工程研究中心,西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨陵 712100)
基金项目:国家自然科学基金(81373908);
摘    要:前期研究发现多酚氧化酶(PPO)能正向调控丹酚酸B合成,该研究运用RACE技术,从丹参毛状根中克隆到多酚氧化酶基因(SmPPO,GenBank登录号为KF712274)全长序列,其cDNA全长1 930bp,开放阅读框为1 770bp,编码589个氨基酸。将SmPPO与管状花目其它4个物种进行氨基酸序列比对,在N端类囊体转移结构域中发现都存在2个N-豆蔻酰化位点。在丹参毛状根培养液中加入不同诱导因子,利用实时荧光定量PCR检测,发现该基因在酵母提取物处理中表达量显著上调,但在银离子、抗坏血酸和L-半胱氨酸处理中表达受到明显抑制。运用HPLC技术同步检测毛状根中丹酚酸B含量,显示出与基因表达相同的变化趋势。研究表明,丹参中多酚氧化酶基因(SmPPO)对丹酚酸B的合成具有正向调控作用。

关 键 词:丹参  多酚氧化酶  基因克隆  序列全长  基因表达

Cloning of Polyphenol Oxidase Gene from Salvia miltiorrhiza Hairy Roots and Its Expression Analysis
SHI Wangke,SUN Yiyue,SHU Zhiming,ZHANG Yuejin,LIANG Zongsuo,GUO Hongbo.Cloning of Polyphenol Oxidase Gene from Salvia miltiorrhiza Hairy Roots and Its Expression Analysis[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2016,36(9):1735-1742.
Authors:SHI Wangke  SUN Yiyue  SHU Zhiming  ZHANG Yuejin  LIANG Zongsuo  GUO Hongbo
Abstract:
Keywords:Salvia miltiorrhiza  polyphenol oxidase  gene clone  cDNA sequence  gene expression
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