| 枯草杆菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的诱导分泌表达 |
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| 引用本文： | 李海军,王林刚,王治泽,陈芳,高剑峰. 枯草杆菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的诱导分泌表达[J]. 生物技术通报, 2010, 0(3) |
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| 作者姓名： | 李海军 王林刚 王治泽 陈芳 高剑峰 |
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| 作者单位： | 石河子大学生命科学学院,石河子,832003 |
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| 基金项目： | 2008年度教育部促进与美大(美洲与大洋洲)地区科研合作与高层次人才培养项目 |
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| 摘 要： | 借助生物信息学对已克隆的枯草杆菌脂肪酶LipB2全长基因序列进行比对分析。结果显示该脂肪酶基因全长635bp,编码包括31个氨基酸分泌型信号肽在内的211个氨基酸,与NCBIGenBank中已报道的枯草杆菌属脂肪酶核苷酸序列有94.0%的一致性。将该基因克隆到pET-28a(+)表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),利用枯草杆菌脂肪酶的信号肽序列进行了分泌表达。SDS-PAGE电泳显示分泌表达的脂肪酶分子质量约为21kD。对表达条件优化后,在30℃、大肠杆菌菌液OD600值为1.8、乳糖诱导浓度为1.5mM、摇瓶发酵10h后大肠杆菌分泌表达26.0U/mL重组脂肪酶,相比较IPTG的诱导,既实现了脂肪酶的高效表达,又节省了成本。
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| 关 键 词： | 乳糖诱导 IPTG诱导 枯草杆菌 脂肪酶基因 分泌表达 |
Induced Secretion Expression of Lipase Gene from Bacillus subtili in Escherichia coli |
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| Li Haijun,Wang Lingang,Wang Zhize,Chen Fang,Gao Jianfeng. Induced Secretion Expression of Lipase Gene from Bacillus subtili in Escherichia coli[J]. Biotechnology Bulletin, 2010, 0(3) |
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| Authors: | Li Haijun Wang Lingang Wang Zhize Chen Fang Gao Jianfeng |
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| Affiliation: | Li Haijun Wang Lingang Wang Zhize Chen Fang Gao Jianfeng(School of Life Science,Shihezi University,Shihezi 832003) |
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| Abstract: | Bioinformatics analysis results showed that,the sequence length of the target lipase gene is 635 bp,encoding 211 AA which contain 31 AA secretion signal peptide,with the indentify of 94.0% by comparing with Bacillus subtili lipase reported in NCBI GenBank.The lipase gene was inserted into the expression vector pET-28a(+),which was finally expressed in Escherichia coli BL21(DE3)by its secretory signal peptide.SDS-PAGE detected the molecular weight of lipase was 21 kD.With the optimal induction temperature 30... |
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| Keywords: | Induction of lactose Induction of IPTG Bacillus subtili Lipase gene Secretory expression |
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