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丙肝病毒全基因组克隆转染细胞体系的初步研究
引用本文:郭佳,姚相杰,郑从义,方呈祥,屈三甫,李信墙,李卫云.丙肝病毒全基因组克隆转染细胞体系的初步研究[J].中国病毒学,2004,19(4):320-324.
作者姓名:郭佳  姚相杰  郑从义  方呈祥  屈三甫  李信墙  李卫云
作者单位:1. 武汉大学生命科学学院,湖北武汉,430072
2. 广州中海潮生物技术有限公司,广东广州,510010
基金项目:国家高技术研究发展计划(863)(2002AA216031)
摘    要:采用一种含有HCV全基因组和噬菌体T7启动子和终止子序列的载体(pHCV)转染Vero-E6细胞,随后感染高效表达T7 RNA聚合酶的重组痘病毒(vTF7-3),通过vTF7-3的辅助作用,使Vero-E6细胞高效增殖HCV病毒体,建立了一种新的HCV体外细胞培养体系.RT-PCR、荧光定量PCR检测转染细胞裂解液中HCV滴度的结果显示pHCV转染细胞内HCV基因拷贝达107-108/mL,同时有HCV正链RNA合成;免疫印迹显示该培养体系中有HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达;pHCV转染细胞经透射电镜观察,可见清晰的HCV病毒体,直径在40-50nm.这一新体系的初步建立,为研究HCV的复制机制、制备HCV疫苗和研发抗病毒药物奠定了基础.

关 键 词:HCV全基因组  克隆  转染细胞体系  重组痘病毒
文章编号:1003-5125(2004)04-0320-05
修稿时间:2004年1月14日

Study of Cell Culture System Transfected with Full-length cDNA Clone of Hepatitis C Virus
GUO Jia,YAO Xiang-jie,ZHENG Cong-yi,FANG Cheng-xiang,QU San-fu,LI Xin-qiang,LI Wei-yun.Study of Cell Culture System Transfected with Full-length cDNA Clone of Hepatitis C Virus[J].Virologica Sinica,2004,19(4):320-324.
Authors:GUO Jia  YAO Xiang-jie  ZHENG Cong-yi  FANG Cheng-xiang  QU San-fu  LI Xin-qiang  LI Wei-yun
Institution:1.1. College of Life Scinces, Wuhan University, Wuhan 430072, China2.Chinawave Biotechnology Co. Ltd, Guangzhou 510010, China
Abstract:
Keywords:Full genome of HCV  Clone  Transfected cell culture system  Recombinant vaccinia virus
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