人组织型纤溶酶原激活剂表达调控及高效表达的研究——Ⅱ.t-PA cDNA在CHO细胞中的高效稳定表达 |
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引用本文: | 欧阳应斌,黄培堂,徐秀英,陈琳,黄翠芬.人组织型纤溶酶原激活剂表达调控及高效表达的研究——Ⅱ.t-PA cDNA在CHO细胞中的高效稳定表达[J].中国科学C辑,1996,26(1):92. |
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作者姓名: | 欧阳应斌 黄培堂 徐秀英 陈琳 黄翠芬 |
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作者单位: | 军事医学科学院生物工程研究所 北京 100850 |
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摘 要: | 曾报道t-PA mRNA非翻译区序列对其表达有明显的抑制作用,在此基础上,通过对5′-UTR及3′-UTR的改造,使t-PA在COS-7细胞中的表达水平提高30倍左右。将t-PA表达质粒用电击法转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株(CHO-dhfr- ),经过混合加压及筛选,在CHO细胞中高效表达了t-PA,表达水平达到5000~6000IU/10~6细胞·d-1.重组t-PA具有与天然t-PA相同的分子量及酶活性。经过8个月连续传代,表达水平未下降,表明细胞株是稳定的,其主要指标均符合工程细胞株的要求。
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关 键 词: | 人组织型纤溶酶原激活剂 CHO细胞 高效表达 |
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