人GM-CSF受体β链胞膜外区域与GM-CSF结合位点的研究

研究了抗人GM-CSF受体β链胞膜外区域4种人工合成多肽D1(9～114),D2(115～225),D3(226～325)和D4(326～422)4个多肽片段多克隆抗血清和McAb对GM-CSF生物学活性的阻断作用,结果首次发现抗D1多克隆抗血清和抗D1McAb 2A_9对 GM-CSF促进的 DMSO诱导的 HL60细胞、正常人胎儿骨髓细胞以及人GM-CSF依赖的TF-1细胞增殖有显著的阻断效应,抗D2McAb 1C₁₂对GM-CSF诱导的 TF-1细胞增殖也有显著的阻断效应,阻断抑制率均可达 90％以上,而其它抗受体 β链 McAb和无关对照 McAb E₇均无阻断活性.此结果表明:抗 D1 McAb2A₉和抗D2 McAb 1C₁₂所识别的表位则可能为受体β链与 GM-CSF的结合位点依据受体β链二级结构预测,受体与细胞因子结合部位的结构理论,设计和合成了受体β链45～75,56～75和 66～75 3个人工合成多肽片段,用间接ELISA结合试验分析表明,McAb 2A₉识别表位位于第 45～55位氨基酸内.应用受体与细胞因子结合部位的结构理论推测 McAb 1C₁₂识别表位可能位于β链内 216～220位氨基酸.此结果对于深入了解受体β链的结构与功能以及细胞因子与受体的相互作用均有十分重要的意义.