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棉花HSP70基因的克隆与原核表达
引用本文:刘 娜,曲延英,陈全家,倪志勇. 棉花HSP70基因的克隆与原核表达[J]. 西北植物学报, 2015, 35(4): 688-693
作者姓名:刘 娜  曲延英  陈全家  倪志勇
作者单位:(新疆农业大学 农学院/新疆农业大学农业生物技术重点实验室,乌鲁木齐 830052)
基金项目:新疆维吾尔自治区自然科学基金(2014211A025)
摘    要:以抗旱性较强的棉花品种‘KK1543’为材料,采用RT-PCR技术克隆了1个棉花HSP70基因,命名为GhHSP70。研究结果表明:GhHSP70基因开放阅读框长1 997bp,编码648个氨基酸,GhHSP70蛋白相对分子量为70.94kD,等电点为4.83。氨基酸序列比对和系统进化树分析发现,GhHSP70与欧洲大叶杨HSP70的亲缘关系最近,氨基酸序列一致性达到96.4%。为进一步分析基因的功能,构建原核表达载体pGEX-4T-1-GhHSP70,并在大肠杆菌中异源表达。SDS-PAGE分析表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致,重组蛋白在37℃,0.2mmol/L IPTG诱导2h时表达量最大。研究为进一步研究棉花HSP70基因功能奠定基础。

关 键 词:棉花  热激蛋白70  基因克隆  原核表达

Cloning and Prokaryotic Expression of Heat Shock Protein 70 Gene in Gossypium hirsutum L.
LIU N,QU Yanying,CHEN Quanji,NI Zhiyong. Cloning and Prokaryotic Expression of Heat Shock Protein 70 Gene in Gossypium hirsutum L.[J]. Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica, 2015, 35(4): 688-693
Authors:LIU N  QU Yanying  CHEN Quanji  NI Zhiyong
Abstract:
Keywords:cotton  heat shock protein 70  gene cloning  prokaryotic expression
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