| Sulfolobus acidocaldarius DHH超家族核酸酶Saci0542的酶学特征研究 |
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| 引用本文： | 王伟玮,谢娟娟,宋吴涛,刘喜朋,汪启胜. Sulfolobus acidocaldarius DHH超家族核酸酶Saci0542的酶学特征研究[J]. 微生物学报, 2022, 62(2): 556-566 |
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| 作者姓名： | 王伟玮 谢娟娟 宋吴涛 刘喜朋 汪启胜 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海应用物理研究所, 上海 201800;中国科学院大学, 北京 100049;上海交通大学生命科学技术学院, 微生物代谢国家重点实验室, 上海 200240 |
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| 基金项目： | 国家重点研究发展计划（2017YFA0504901） |
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| 摘 要： | 【目的】以嗜酸嗜热硫化叶菌Sulfolobus acidocaldarius的DHH超家族核酸酶（Saci0542）为例,研究其核酸外切酶活性特点,为阐明其在DNA代谢中的具体功能提供生化基础。【方法】将嗜酸嗜热硫化叶菌DHH超家族核酸酶Saci0542基因在大肠杆菌中重组表达,经亲和层析纯化得到电泳纯的重组蛋白;利用荧光标记的寡核苷酸作为底物,用尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,鉴定Saci0542的酶学特征。【结果】重组表达的DHH超家族核酸酶Saci0542具有典型的单链核酸特异性的3’-5’外切酶活性。进一步酶学特征表征结果如下:酶活性依赖于二价金属离子Mn2+,而Ca2+、Mg2+、Zn2+等二价金属离子对活性没有明显的促进作用;Saci0542在pH5.5–10的广泛范围内均表现出较高酶活性;高于200 mmol/L的NaCl强烈抑制酶活性;最适反应温度为50–55℃;末端磷酸基团抑制3’-5’外切酶活性。【结论】本研究证实,Saci0542是一种Mn2+依赖型3’-...
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| 关 键 词： | 嗜酸嗜热硫化叶菌 DHH超家族核酸酶 酶学特征 3’-5’外切酶 |
| 收稿时间： | 2021-04-22 |
| 修稿时间： | 2021-08-14 |
Enzymatic characterization of Sulfolobus acidocaldarius Saci0542 nuclease belonging to DHH superfamily |
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| WANG Weiwei,XIE Juanjuan,SONG Wutao,LIU Xipeng,WANG Qisheng. Enzymatic characterization of Sulfolobus acidocaldarius Saci0542 nuclease belonging to DHH superfamily[J]. Acta microbiologica Sinica, 2022, 62(2): 556-566 |
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| Authors: | WANG Weiwei XIE Juanjuan SONG Wutao LIU Xipeng WANG Qisheng |
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| Affiliation: | Shanghai Institute of Applied Physics, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 201800, China;University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China;State Key Laboratory of Microbial Metabolism, School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sulfolobus acidocaldarius DHH superfamily nucleases enzymatic characterization 3''-5'' exonuclease |
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