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| 尿激酶催化结构域在毕氏酵母中的表达、纯化及结晶 | |
| 作者姓名： | 赵更香 袁彩 卞传兵 江龙光 叶晓明 黄子详 黄明东 |
| 作者单位： | 中国科学院福建物质结构所,结构化学国家重点实验室,中国科学院研究生院,福州,350002 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划);国家重点实验室基金;中国科学院"百人计划" |
| 摘 要： | 利用重叠延伸PCR方法扩增尿激酶催化结构域的突变体基因片段,将其克隆至表达载体pPICZαA上,转化酵母X-33,用Zeocin筛选高拷贝数的酵母菌落.重组蛋白通过阳离子琼脂糖柱纯化,纯度达到99%,该仅含尿激酶催化结构域的突变体(C279A/N302Q),无需激活即具有尿激酶活性.用气相扩散法获得蛋白质晶体,其衍射分辨率达1.45!. |
| 关 键 词： | 尿激酶 Pichiapastoris 纤溶酶原 重叠延伸PCR 结晶 |
| 收稿时间： | 2005-11-08 |
| 修稿时间： | 2005-11-082005-12-31 |
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