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N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ过表达对人肝癌细胞粘着斑复合物介导的信号转导作用
引用本文:王丽影,雷群英,戴振宇,陈伉俪,陈惠黎,查锡良.N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ过表达对人肝癌细胞粘着斑复合物介导的信号转导作用[J].中国生物化学与分子生物学报,2002(2).
作者姓名:王丽影  雷群英  戴振宇  陈伉俪  陈惠黎  查锡良
作者单位:卫生部糖复合物重点实验室,卫生部糖复合物重点实验室,卫生部糖复合物重点实验室,卫生部糖复合物重点实验室,卫生部糖复合物重点实验室,卫生部糖复合物重点实验室 复旦大学医学院生物化学教研室,上海200032,复旦大学医学院生物化学教研室,上海200032,复旦大学医学院生物化
基金项目:国家自然科学基金重点项目 (No .396 30 0 80 ),国家 973预研项目 (国科基字 [2 0 0 1] 5 0号 )资助~~
摘    要:为了探讨过表达N 乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ (GnT Ⅴ )后 772 1细胞侵袭、迁移等行为改变的机制 ,检测了GnT Ⅴ 772 1及pcDNA3 772 1两组细胞中与恶性表型密切相关的粘着斑激酶 (focalad hesionkinase ,FAK)、PTEN蛋白、蛋白激酶B(PKB)等重要信号分子的表达水平 ,同时测定了 2组细胞非贴壁依赖生长的能力 .利用Western印迹方法检测FAK、PTEN、PKB的表达或磷酸化水平 .利用poly hema使细胞非贴壁生长 ,2组细胞悬浮无血清培养 2 0h ,采用流式细胞仪方法检测细胞的失巢凋亡 (anoikis) .研究发现 ,转染GnT Ⅴ后的肝癌细胞的FAK表达无明显变化 ,FAK的酪氨酸磷酸化水平增高 70 %;而PTEN的表达下降了 4 9%;PKB的磷酸化增加 2 0 0 %;pcDNA3 772 1细胞已有明显凋亡 ,而转染GnT Ⅴ的 772 1细胞未发生凋亡 .结果提示 ,转染GnT Ⅴ后的肝癌细胞迁移力增强 ,可能与其FAK的磷酸化程度升高 ,激酶活力增强有关 ;而能逃逸失巢凋亡是因为PTEN的表达下降 ,PTEN蛋白的磷酸酶活性降低 ,细胞Akt PKB磷酸化水平保持在较高水平 .

关 键 词:N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ  粘着斑激酶  蛋白激酶B  失巢凋亡
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