定量检测 IL-2-HSA 融合蛋白双抗体夹心 ELISA 法的建立 |
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引用本文: | 张玉民,刘运龙,陈知航,李丽,刘学龙,程远国.定量检测 IL-2-HSA 融合蛋白双抗体夹心 ELISA 法的建立[J].生物技术通讯,2013,0(2):214-218. |
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作者姓名: | 张玉民 刘运龙 陈知航 李丽 刘学龙 程远国 |
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作者单位: | 1. 延边大学,吉林 延吉 133000 2. 军事医学科学院 微生物流行病研究所,北京 100071 |
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摘 要: | 目的:通过抗体配对方法,建立能高特异、高灵敏地定量检测食蟹猴体内 IL-2-HSA 融合蛋白浓度的双抗体夹心 ELISA 法.方法:以 IL-2单克隆抗体为包被抗体、IL-2-HSA 融合蛋白为夹心抗、生物素标记的 HSA 为检测抗体,一抗和二抗的工作浓度分别为8μg/mL 和1∶5000,HRP 标记的亲和素为1∶200.结果:IL-2-HSA 融合蛋白标准品的曲线范围为3.9~250 ng/mL,最低检测限为3.9 ng/mL,与 IL-2、HSA、GLP-1/HSA 和 CD20单抗均无交叉反应,方法的回收率为98.9%~101.5%,批内和批间准确度分别为96.1%~98.3%和93.9%~105.4%.结论:本方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导则的要求,可用 IL-2-HSA 融合蛋白在临床前药代动力学试验的定量检测.
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关 键 词: | 双抗体夹心 ELISA IL-2-HSA 融合蛋白 药代动力学 |
Development and Application of Double Antibodies Sandwich ELISA Method for Quantitative Detection of Fusion Protein IL-2-HSA |
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Abstract: | |
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Keywords: | double antibody sandwich ELISA IL-2-HSA fusion protein pharmacokinetics |
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