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呼吸道黏蛋白5AC基因转录表达的顺式调控元件分析
引用本文:李升锦,周向东. 呼吸道黏蛋白5AC基因转录表达的顺式调控元件分析[J]. 中国生物工程杂志, 2007, 27(2): 29-34
作者姓名:李升锦  周向东
作者单位:重庆医科大学附属第二医院呼吸科重庆医科大学附属第二医院呼吸科
摘    要:目的:探讨呼吸道黏蛋白(mucin,MUC)5AC基因5'上游序列顺式调控元件在中性粒细胞弹力酶(neutrophil elastase , NE)诱导MUC5AC基因转录表达的调控机制。方法:应用DNA重组技术,构建含萤光素酶报告基因和MUC5AC启动子不同长度片段的嵌合质粒。采用定点突变技术,在嵌合质粒的基础上构建MUC5AC启动子区特殊蛋白(specificity protein)-1和核因子(nuclear factor, NF)-κB结合位点单独突变体,并测定NE刺激的转染细胞荧光素酶相对活性。结果:成功构建了4种含有不同长度MUC5AC基因启动子序列的荧光索酶报告基因质粒。含有启动子序列-1330bp、-689bp、-324bp的嵌合质粒荧光素酶相对光强度较对照组均显著增加,而含有启动子序列-64bp的嵌合质粒荧光素酶相对光强度与对照组相比差异无统计学意义。NE可诱导含有MUC5AC启动子区NF-кB结合位点单独突变体(pGL3E-MUC5AC-NF-кB-MU)荧光素酶相对光强度增加,而NE不能诱导Sp-l结合位点单独突变体(pGL3E-MUC5AC-SP-1-MU)荧光素酶表达增加。结论:MUC5AC 5'上游序列中-324~-64位点存在参与NE诱导MUC5AC基因表达的重要调控元件,位于此区域的顺式作用元件Sp-1位点在NE诱导MUC5AC基因表达机制中起重要作用,该位点可能作为靶向性基因治疗的关键调控元件。

关 键 词:黏蛋白5AC  中性粒细胞弹力酶  Sp-1元件
收稿时间:2006-11-21
修稿时间:2006-11-21

Analysis of cis-acting elements on respiratory mucin MUC5AC expression and regulation in pulmonary A549 cell line
LI Sheng-jin,ZHOU Xiang-dong. Analysis of cis-acting elements on respiratory mucin MUC5AC expression and regulation in pulmonary A549 cell line[J]. China Biotechnology, 2007, 27(2): 29-34
Authors:LI Sheng-jin  ZHOU Xiang-dong
Abstract:
Keywords:MUC5AC NE Sp-l element
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