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家蝇Thymosin(THY)基因的克隆及原核表达
引用本文:王宇,吴高吉,罗曼,彭传林,修江帆,尚小丽,吴建伟.家蝇Thymosin(THY)基因的克隆及原核表达[J].生物技术通报,2015(2):143-147.
作者姓名:王宇  吴高吉  罗曼  彭传林  修江帆  尚小丽  吴建伟
作者单位:1. 贵阳医学院基础医学院,贵阳 550004; 贵州省疾病预防控制中心,贵阳 550004
2. 贵阳医学院基础医学院,贵阳,550004
基金项目:国家科技支撑计划,国家自然科学基金项目
摘    要:采用EST测序技术从构建的家蝇(Musca domestica)幼虫c DNA质粒文库中筛选到胸腺肽(Thymosin,THY)基因,以该基因的c DNA文库质粒为模板,设计引物,通过PCR扩增,测序鉴定,获得THY基因完整编码序列。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽和亚细胞定位等方面进行预测和分析。构建p ET-28a(+)-THY重组质粒,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。研究结果表明,THY基因ORF全长384 bp,编码127个氨基酸,理论分子量14.3 k D,等电点为5.22,具有THY家族的蛋白保守结构域。构建重组原核质粒p ET-28a(+)-THY,经IPTG诱导,蛋白在大肠杆菌中获得表达,经亲和层析柱纯化获得目的蛋白,Western blot检测发现纯化的目的蛋白大小正确。

关 键 词:家蝇  胸腺肽  克隆  原核表达

Cloning and Prokaryotic Expression of Musca domestica Thymosin Gene
Wang Yu,Wu Gaoji,Luo Man,Peng Chuanlin,Xiu Jiangfan,Shang Xiaoli,Wu Jianwei.Cloning and Prokaryotic Expression of Musca domestica Thymosin Gene[J].Biotechnology Bulletin,2015(2):143-147.
Authors:Wang Yu  Wu Gaoji  Luo Man  Peng Chuanlin  Xiu Jiangfan  Shang Xiaoli  Wu Jianwei
Institution:Wang Yu;Wu Gaoji;Luo Man;Peng Chuanlin;Xiu Jiangfan;Shang Xiaoli;Wu Jianwei;Basic Medical College,Guiyang Medical College;Guizhou Provincial Center for Disease Control Prevention;
Abstract:
Keywords:Musca domestica  thymosin  cloning  prokaryotic expression
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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