| 人Pokemon蛋白锌指结构域的表达与纯化 |
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| 引用本文： | 刘莉,李岳亭,张萌萌,杨予涛,徐志卿.人Pokemon蛋白锌指结构域的表达与纯化[J].生物技术通报,2015(2):222-227. |
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| 作者姓名： | 刘莉 李岳亭 张萌萌 杨予涛 徐志卿 |
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| 作者单位： | 1. 首都医科大学基础医学院,北京,100069
2. 嘉兴出入境检验检疫局,嘉兴,314001 |
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| 基金项目： | 国家“973”计划，国家自然科学基金项目，高等学校博士学科点专项科研基金项目，北京市教委科技发展计划 |
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| 摘 要： | 旨在原核表达Pokemon基因的锌指结构域,纯化获得GST-Zinc finger的融合蛋白。以人胶质瘤T98G细胞的c DNA为模板,利用PCR扩增带有Bam H I和Sal I酶切位点的人Pokemon基因的锌指结构域,然后将其克隆到p GEX-4T-1原核表达载体中。将正确的重组载体转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,再利用Magne GST particles亲和纯化Zinc finger融合蛋白,最后通过Western blot鉴定此融合蛋白。结果显示,成功构建p GEX-4T-1-Zinc finger原核表达载体;30℃条件下,0.2 mmol/L的IPTG能诱导出大量的可溶性GST-Zinc finger蛋白;经Magne GST particles纯化的GST-Zinc finger蛋白可被识别Pokemon锌指结构域的抗体特异识别。纯化的GST-Zinc finger蛋白可用于后续的生物学研究。
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| 关 键 词： | Pokemon 锌指结构域 原核表达 蛋白纯化 |
Prokaryotic Expression and Purification of Zinc Finger Domain of Human Pokemon Protein |
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| Liu Li,Li Yueting,Zhang Mengmeng,Yang Yutao,Xu Zhiqing.Prokaryotic Expression and Purification of Zinc Finger Domain of Human Pokemon Protein[J].Biotechnology Bulletin,2015(2):222-227. |
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| Authors: | Liu Li Li Yueting Zhang Mengmeng Yang Yutao Xu Zhiqing |
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| Institution: | Liu Li;Li Yueting;Zhang Mengmeng;Yang Yutao;Xu Zhiqing;School of Basic Medical Sciences,Capital Medical University;Jiaxing Entry-Exit Inspection and Quarantine; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pokemon Zinc finger prokaryotic expression protein purification |
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