构巢曲霉内切甘露聚糖酶在毕赤酵母中的表达及重组蛋白质的表征 |
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引用本文: | 张鹏飞,李小连,王自强,袁向华,李建军,杜昱光.构巢曲霉内切甘露聚糖酶在毕赤酵母中的表达及重组蛋白质的表征[J].微生物学报,2018,58(3):391-400. |
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作者姓名: | 张鹏飞 李小连 王自强 袁向华 李建军 杜昱光 |
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作者单位: | 四川师范大学生命科学学院, 四川 成都 610101,中国科学院过程工程研究所, 生化工程国家重点实验室, 国家生化工程技术研究中心(北京), 北京 100090,中国科学院过程工程研究所, 生化工程国家重点实验室, 国家生化工程技术研究中心(北京), 北京 100090,四川师范大学生命科学学院, 四川 成都 610101,中国科学院过程工程研究所, 生化工程国家重点实验室, 国家生化工程技术研究中心(北京), 北京 100090;中国科学院过程工程研究所, 全军生物药制造与剂型工程重点实验室, 北京 100090,中国科学院过程工程研究所, 生化工程国家重点实验室, 国家生化工程技术研究中心(北京), 北京 100090;中国科学院过程工程研究所, 全军生物药制造与剂型工程重点实验室, 北京 100090 |
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基金项目: | 国家“863计划”(2014AA093511) |
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摘 要: | 【目的】内切甘露聚糖酶是一类重要的半纤维素酶,能够有效水解半纤维素的第二大组分甘露聚糖,已广泛应用于工业生物技术领域。【方法】本文对来源于腐生真菌构巢曲霉(Aspergillus nidulans)的一个内切甘露聚糖酶在毕赤酵母中进行过表达及详细的酶学性质研究。【结果】该甘露聚糖酶在摇瓶和发酵罐条件下都成功获得表达,发酵罐条件下的蛋白质表达量高达3.9 mg/mL;该酶的最适pH和温度分别为4.0和60°C,在pH 5.0–9.0之间表现出了很好的稳定性;在温度≤40°C时,该酶非常稳定,当温度≥60°C,该酶的稳定性大大降低;Co~(2+)和Zn~(2+)促进了该酶的活性,而Pb~(2+)、Cu~(2+)、Mn~(2+)等金属离子表现出了一定的抑制作用。【结论】该构巢曲霉来源的内切甘露聚糖酶能在毕赤酵母中高效表达,表现出了一定的耐酸、耐碱及耐热等性能,具有开发为商品酶的潜力,为深入开发构巢曲霉来源的其他糖苷酶奠定了基础。
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关 键 词: | 构巢曲霉 β-1 4-甘露聚糖酶 酶学性质 二价金属离子 发酵 |
收稿时间: | 2017/4/14 0:00:00 |
修稿时间: | 2017/6/7 0:00:00 |
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