| 同源重组法构建枯草芽孢杆菌转酮酶缺失突变菌株 |
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| 引用本文： | 彭其安,张西峰,吴思方,王伟平. 同源重组法构建枯草芽孢杆菌转酮酶缺失突变菌株[J]. 生物技术, 2006, 16(6): 23-26 |
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| 作者姓名： | 彭其安 张西峰 吴思方 王伟平 |
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| 作者单位： | 1. 湖北工业大学生物工程学院,湖北,武汉,430068
2. 西北农林科技大学生命科学院,陕西,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 湖北省工业微生物重点实验室开放基金项目资助(No.20040405) |
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| 摘 要： | 采用同源重组法高效构建枯草芽孢杆菌转酮酶(tkt)缺失突变株。以大肠杆菌(E.coliDH5α)质粒pBlUSKM为框架,构建出基于枯草杆菌(B.S104)tkt基因位点的整合载体pb-Trs-n,将此载体重组到Bacillus subtilis104中,从新霉素抗性平板上挑取转化子,整合载体pb-Trs-n的测序结果与Kunst.F报道的tkt基因高度同源(98.9%)。同源重组后,B.S104染色体上的tkt基因(2 004bp)部分与载体pb-Trs-n的neo基因(1 197bp)发生了同源交换,确定了该转化子为枯草芽孢杆菌转酮酶缺失突变株(tkt-,neo),该方法构建枯草芽孢杆菌转酮酶(tkt)缺失突变株是可行的,为D-核糖工程菌的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 同源重组 枯草芽孢杆菌 转酮酶基因 |
| 文章编号： | 1004-311X（2006）06-0023-04 |
| 收稿时间： | 2006-06-05 |
| 修稿时间： | 2006-10-11 |
Construction of Bacillus subtilis tkt- Mutant by Homologous Recombination |
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| PENG Qi-an,ZHANG Xi-feng,WU Si-fang,WANG Wei-ping. Construction of Bacillus subtilis tkt- Mutant by Homologous Recombination[J]. Biotechnology, 2006, 16(6): 23-26 |
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| Authors: | PENG Qi-an ZHANG Xi-feng WU Si-fang WANG Wei-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | homologous recombination Bacillus subtilis tkt gene |
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