Armillariella tabescens EJLY2098β-甘露聚糖酶的诱导、纯化及酶学性质分析

Armillariella tabescens EJLY2098经魔芋精粉诱导，可产β-甘露聚糖酶，再用正交实验优化诱导培养基，结果在培养基为魔芋精粉2％、蛋白胨1％、土豆汁25％、KH2PO4 0.3％、MgSO4·7H2O 0.15％、维生素B1 0.01％时可诱导出较高活性的酶。用DEAE－阴离子交换色谱从培养上清分离纯化β-甘露聚糖酶，出现2个活性组份。 活性组份P2 的SDS-PAGE分析，发现为电泳纯的一条带，分子量约78.9kD。 HPTLC分析， P2为内切β-甘露聚糖酶；酶反应的最适温度为60℃，最适pH 为4.0～6.0。保温30min的半失活温度t1/2为63℃，在pH 4.5～6.0之间稳定性较好。Na+和Ba2+对其有激活作用，等电点pI约为4.0～4.1。本研究获得了一株产β-甘露聚糖酶的新菌种，为进一步用基因工程方法克隆并构建具有完整自主知识产权的重组β-甘露聚糖酶基因工程菌提供了一个重要的基础工作。